MÉTHODE DE COLORATION DES CILS
faron à obtenir un trouble léger et homogène. Déposer sur une lamelle scrupuleusement propre. Laisser sécher à la température ordinaire, à l'abri des poussières.
1® Procédé de Lof fier. — On laisse la lamelle quatre à cinq minutes dans Vencre de fuchsine de Lôf/ler chauffée à dégagement de vapeurs.
Sol. aqueuse d'ac.
i galUque -^ • • • ^0 cent, cubes.
Encre de Lôffler ' Sol. de sulfate de fer
i saturée à froid. . 5 — r Sol. alcoolique de
fuchsine .... 1 —
Elle doit être filtrée chaque fois. On lave ensuite à Teau et à Talcool à 95", puis on plonge, pendant une minute, dans la solution colorante :
Sol. alcoolique de fuchsine 11 cent, cubes.
Alcool absolu 10 —
Eau d'aniline 100 —
Laver à Teau et à Talcool absolu.
Le violet peut remplacer la fuchsine . Il faut modifier Tacidité du mordant suivant l'espèce du bacille. On tâtonne avec deux solutions
s. Solution de soude à 1 p. 100.
^. Solution d'acide sulfurique à 1 p. 100.
qu'on ajoute à l'encre de fuchsine.
LôFPLRR conseille de s'exercer sur le Bacille du lait bleu dont les cils sont colorables dans une échelle assez étejidue d'acidité (20 centimètres cubes de ^ à 15 centimètres cubes de a pour 16 centimètres cubes d'encre). Voici des exemples :
Spirillum concentricum . Encre seule.
Choléra asiatique , . . . 1/2 goutte de a dans 16 ce. d'encre.
Bacille typhique 1 ce. de ^ dans 1(> rc. d'encre.
B. subtilis âO à 30 gouttes dans 16 ce. d'encre.
Vibrion septique 37 gouttes dans 16 ce. d'encre.
278 EXAMRX MICROSCOPIQCE DES MIC ROBES
Celle méthode occasionne d'abondants grumeaux très adhérents.
Elle a été modifiée par Nicolle et Morax qui jugent inutile l'addition d'alcali, ou d'acide et remplacent le colorant de I.Ofkler par la fuchsine de i^iehl^ par Lutschke qui substitue l'acétate au sulfate de fer [moins de grumeaux), par Ramon y Cajal qui substitue dans le mordant la fuchsine anilinée à la fuchsine alcoolique, par BrxoE, etc.
2'* Procédé de Sclnvo. — Laisser une minute dans :
Tanin I fjrarame.
Alcool à :>0- iOO —
Laver. Laisser une minute dans une solution aqueuse à 5 p. 100 d'acide phospho-tungstique. Laver rapidement dans l'eau distillée. Laisser trois ou quatre minutes dans la solution d'Ehrlich légèrement chauffée. Laver, sécher, etc.
3^ Procédé de Van Ermenghen (i893) (le meilleur). — Laisser, trente minutes à froid ou cinq minutes à + 60^, dans le bain fixateur :
A. osmique 2 p. 100 ! cent. cube.
Tanin 10 à !>;) p. 100 i —
A. acétique 4 à 3 gouttes.
Laver soigneusement à l'eau. Passer cinq à dix secondes dans du nitrate d. argent à O.î) p, 100. Mettre, sans laver, dans le bain réducteur :
A. galliqiie 5 grammes.
Tanin 5 —
Acétate de soude fondu 10 —
Kau 350 —
Repasser dans le nitrate d'argent et de nouveau dans le bain réducteur. Laver, sécher, etc.
Le principe est la réduction d'un sel d'argent à la surface des cils préalablement fixés.
4" Procédé de Neuhaus (pour le Bacille tt/phique). — Mettre sur la lamelle quelques gouttes de la solution :
