INOCULATION PRÉALABLE DV MÊME MICROBB
spores). En général, l'atténuation ainsi obtenue se conserTe dans les générations filles (transmission héréditaire de Tatténuation). Cette création de l'atténuation par le simple vieillissement est un fait banal, contre lequel le bactériologiste doit journellement lutter, dans les laboratoires, pour conserver ses cultures virulentes ; les réensemencements fréquents sont le remède. Le Pneumocoque, le Streptocoque pyogène, le Stapkylocoque pyogène, etc., s'atténuent rapidement ; d'autres microbes résistent bien au vieillissement : Bacille tuberculeux (J. GouRMONTet Nicolas), Bacille tétanique, etc., et, en général, tous les microbes à spores. Ce mode d'atténuation ne peut être réglé, il n'est pas pratique.
b. Atténuation par la culture à une température dysgèné^ue, — Pasteur a attribué l'atténuation des cultures qui vieillissent à l'air libre aux effets de l'oxygène agissant sur des microbes peu vivaces. Parti de cette idée, il a fabriqué des vaccins charbonneux en laissant à l'air libre des cultures de Bacillus anthracis placées dans des conditions dysgénésiques, pour affaiblir la vitalité des microbes. Cette condition dysgénésique consistait en une température ambiante de 4-^^^)^^^^ ^® permet pas la formation de spores. Chaque variété ainsi atténuée devenait une race dont les cultures filles conservaient la même atténuation (transmission héréditaire de l'atténuation) . Tel est le mode de fabrication des vaccins charbonneux pastoriens (Pasteur, Roux et Chambbrland, 1881). On cultive du Bacillus anthracis à + 42^,5; vers le douzième jour l'atténuation est suilisante pour que l'inoculation de la culture immunise, sans danger, le mouton et le lapin, mais elle peut tuerie jeune cobaye ; vers le trentième jour la culture ne peut plus tuer que les jeunes souris ; elle périt au bout d'un mois et demi. Les cultures filles conservent pendant longtemps le même degré de virulence. On utilise en général deux vaccins (dixième jour et vingtième jour environ) dans la pratique vétérinaire des inoculations préventives. Il est inutile d'insister sur le grand rôle économique des vaccins charbonneux.
La théorie pastorienne, qui attribuait au seul oxygène de l'air l'atténuation du B. anthracis, demande à être revisée.
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c. Atténuation par le chauffage, — Toussaint est rînyenteur de la préparation des vaccins par le chauffage des microbes virulents. Il vaccinait contre le charbon en inoculant du sang charbonneux défîbriné, chauffé pendant dix minutes à -f- ^^^ (1880). Ghauveau conseilla de préparer deux vaccins en chauffant à -f- ^^ soit pendant dix minutes, soit pendant quinze minutes. Les deux vaccins sont employés dans la pratique à quelques jours d'intervalle.
En 1883, Ghauveau a préconisé le procédé suivant : culture du Bacillus anthrads à + ^^^i^ pendant vingt-quatre heures, puis trois heures de chauffage à -f- 47*».
Le chauffage d'une culture virulente pour obtenir des microbes atténués est entré dans la pratique courante des laboratoires. Le temps et la température du chauffage varient naturellement suivant les microbes; en général une exposition de quelques minutes à + S0<» suffît pour atténuer les microbes sans spores.
On peut aussi atténuer par le chauffage les cultures ou humeurs contenant des spores. Arloing, Gornevin et Thomas préparent leur vaccin contre le charbon symptomatique en chauffant les spores du B. Chauvœi. Ce microbe est déjà sporifère dans la sérosité des malades ; on fait dessécher cette sérosité à + 30° -f- 35*». Les spores, ainsi desséchées, sont plus résistantes que les spores à Tétat frais. Gette sérosité desséchée, broyée et humectée est chauffée pendant quelques heures entre -\-Q0 et -f- 110^. On a une grande marge entre les limites de température du chauffage, avantage précieux. Le premier vaccin de ces auteurs est chauffé pendant six heures à + 100^> le second à + 85<>. On vaccine en injectant sous la peau de la région caudale du bœuf, 1 centigramme de poudre délayée dans 1 centimètre cube d'eau.
Ges différents procédés ne créent pas des races de vaccins comme la méthode Pasteur. Ghauveau est arrivé à créer des races de microbes à atténuation transmissible en opérant de la façon suivante : 1** cultiver une goutte de sang charbonneux dans du bouillon léger à + 42^^,5 pendant vingt-quatre heures (pas de spores) ; 2® chauffer trois heures à + 47*^ ; 3® ensemen-
