I. Milieux transparents

Ces milieux sont la gélatine et la gélose.

Le but à atteindre dans la préparation de ces milieux est d'obtenir un produit solide, incolore, aussi transparent que possible et 'stérile. Les méthodes que nous allons indiquer permettent d'atteindre ce résultat dans la mesure du possible.

Il ne faut pas proparer la g(''Iatine et la gi'dose eu trop grandes quantités à la fois, surtout pendant l'ijté, car ces milieux, perdant par l'évaporation l'eau qu'ils contiennent, se r(!!ti'acli;nt, deviennent ca.ssants et par suite diriicilemeiit iililisables.

.\. (IFil.ATI.NE.

Pour firéparci' la géialino, prenez '2.")0 graïuiiins de viande de bu'uf, de veau, de iioiib', de iimmi- Utw, etc., déliarrasséi' des os, tondons, apom'^vrdses,

graisse, etc., hachée finement ; mélangez à oOO grammes d'eau distillée, et laissez macérer pendant vingl qualre heures à fi'oid. Filtrez alors sur un linge ; pesez le bouillon qui a passé, et ajoutez autant d'eau distillée qu'il faut pour que le bouillon pèse le double du poids de la viande, c'est-à-dire 500 grammes.

Placez ce bouillon dans un vase émaillé et ajoutez :

bO grammes de gélatine, soit 10 p. 100. (Cette gélatine est livrée dans le commerce sous forme de plaques, et connue sous le nom de gélatine extrafine, blanc-manger.) II faut, avant de l'introduire dans le bouillon, la couper en petits morceaux qu'on lave dans l'eau distillée ;

S grammes de pcptone Chapotcaut (soit 1 p. 100).

2 gr. 1/2 de sel marin (1/2 p. 100)';

Une trace de phosphate de potasse.

On mélange bien le tout, et on fait bouillir une heure à 100° dans l'autoclave.

On filtre ensuite à travers un linge préalablement mouillé; on neutralise (1) le liquide filtré par la potasse ou le carbonate de soude, et on porte dans l'autoclave à -j- lOb" pendant 10 minutes.

On liasse alors sur le papier-filtre. Le produit recueilli doit être, si. l'on a bien suivi ces indications, absolument transparent, de teinte citrine.

A l'aide d'un petit entonnoir, on le distribue dans des tubes à essai préalablement stérilisés, en ayant soin de ne pas laisser tomber de gélatine sur

(I) I.ii neutralisation exiictc île la gélatine est fort importante; si celte neutralisation n'est pas parfaite, si le milieu est alealin, il preniira une couleur foiicé,- quanil on le soumettra aux li.mtes températures nécessaires à la stérilisation. Nous conseillons de comparer sur le papier de tournesol lileu et rouge la réaction de la gélatine essayée avec la réaction d'une goutte d'eau distillée : c'est le moyen le plus simple et le plus eflicace de bien neutraliser.