Avoir soin de le pulvériser pour hâter la dissolution

COLORATIONS A L'HÉMATOXYLINE 375

Personnellement, je préfère employer rhémalun acide, qui donne une coloration nucléaire plus précise et se conserve encore mieux i. Dans une solution préparée depuis plus d'un an, je n'ai pas la moindre trace de précipité ni au fond du flacon ni sur les parois.

Dés ([ue la dissolution des produits est achevée, le colorant est prêt à employer. Il colore très rapidement les coupes (5 à 10 minutes suivant le mode de fixation) et pénètre très bien les objets pour la coloration en masse (24 à 48 heures'.

Ce liquide esl un des meilleurs qui existent pour la coloration en masse : c'est aussi notre colorant le plus parfait, pour la teinture des coupes par l'action successive de l'hématéine et de Téosine (p. -418).

L'hémalun ordinaire donne une coloration bleuâtre et Thémalun acide une coloration rougeàtre. Pour obtenir un beau (on bleu noir définitif, il suffit de laisser les pièces ou les coupes, pendant quelques minutes après le lavage, dans de l'eau de source. Celleci agit par les sels alcalino-terreux qu'elle lient en dissolution (carbonate de calcium). Si on n'a que de l'eau non calcaire, il faut plonger les coupes dans une solution très faible (1 p. 100) de bicarbonate de sodium ou de carbonate de lithium, puis laver à l'eau ordinaire.

Eu cas de coloration un peu diffuse, il suffit de laver les coupes ou les pièces dans de l'alun à 1 p. 100, puis dans de l'eau ordinaire. Ce passage par l'alun est toujours une bonne précaution à prendre pour les colorations en masse.

Eu cas de surcoloralion^ régresser dans l'alcool clilorhydrique faible à 0,5 p. 100, en surveillant attentivement, car ce réactif agit très vite. Quelques secondes suffisent. On lave ensuite abondamment à feau de source, jusqu'à bleuissement complet. Pour plus de sûreté, passer dans l'eau alcaliuisée comme }ilus haut.

Pour diluer l'hémalun, il faut toujours employer de lalun à 2 p. 100 et non de l'eau ordinaire qui rendrait la coloration diffuse.

Les colorations à l'hémalun se conservent bien dans le baume, à condition qu'il soit dissous dans le chloroforme, le xylol ou le toluène, mais non dans les essences de girolle ou de bergamote.

1. Ehrlirh a montre, dès 1886, que l'addition d'acide acétique empêche la dissociation de l'alun en acide sulfurique libre et composés basiques d'alumine. Ces derniers, en se combinant avec l'hématoxyline, produisent une laque aluminique insoluble qui se précipite. Le liquide s'appauvrit ainsi peu à peu. L'acidification enraye ce processus, c'est pourquoi je conseille vivement de préparer de l'hémalun et du glychémalun acides.

376 MIÎTHODES GENERALES

Quelquefois les préparations pâlissent près des bords de la lamelle (voir insuccès, p. 464). La glycérine conserve assez bien la coloration, mais ceci a peu d'importance, car ce médium est bien rarement employé pour les coupes.

Glychémalun de Mayer ».

Peser 0,4 gr. d'hématéine de Geigy, de Bùle, et broyer dans un mortier avec quehjues gouttes de glycérine. Quand on a obtenu une pâte bien homogène, on lave le mortier, par portions, avec le licinide suivant, de manière à entraîner toute la pnte :

Eau distillée 70 cm'K

Glycérine 30 cm^.

Alun de potasse 5 gr.

Faire dissoudre à chaud l'alun dans l'eau, puis ajouter la glycérine. On peut acidifier en ajoutant 2 p. 100 d'acide acétique cristallisable.

Je crois que ce colorant, qui est très stable et très énergique, doit remplacer avantageusement Ihématoxyline de Delafield qui, par suite d'une routine incompréhensible, est encore [iréconisée partout. Je reproche à cette dernière d'élre très longue à préparer (deux mois environ) et de se conserver très mal. Il n'y a aucune raison de perpétuer cette antique formule alors que le glychémalun nous donne une teinture aussi puissante, très stable et de préparation instantanée. Il faut abandonner aussi l'hématoxyline de Bohmer qu'on voit encore citer dans quelques ouvrages.

Le mode d'emploi du glychémalun est le même que celui de l'hémalun. On peut procéder par la méthode progressive, ou surcolorer et régresser dans l'alcool chlorhydrique faible.