Journ. amer. med. assoc, 7 mai

Méthode de Levaditi et Manouélian. — Celte mélhode, qui est une modification du procédé })rimitif de Levaditi, est une des plus employées en France. Ces deux procédés dérivent d'ailleurs de celui de Cajal (p. 433 et 661), dout ils ne sonl qu'une modification, adaptée à la recherche des organismes spirales dans les tissus.

Fixation. — Couper des fragments très minces, ayant 1 à 2 mm. d'épaisseur, et fixer vingt-quatre heures dans du formol à 10 p. 100. Durcir dans Talcool à 95 pendant vingt-quatre heures.

Imprégnation. — Au sortir de Talcool, jeter les fragments dans un récipient plein d'eau distillée qu'on change une fois; les y laisser jusqu'à ce qu'ils tombent au fond. A ce moment, les transporter dans un bocal en verre jaune bouché à l'émeri, renfermant :

Pyridine pure 10 cm'.

Nitrate d'argent à 1,5 p. 100 90 —

Il est bon de suspendre les fragments d'organes à des fils.

Laisser douze heures à 37° ou trois heures à la température ordinaire, puis trois à cinq heures à 4o'^'-50°.

Réduction. — Laver à l'eau distillée, puis plonger dans la solution suivanie fraîchement préparée :

Pyridine pure 15 cm^.

Acétone 10 —

Acide pyrogallique en solution aqueuse à 4 p. 100. 90 —

Laisser agir pendant douze heures.

Inclure à la paraffine et couper comme d'habitude. On peut faire une coloration de contraste au bleu polychrome de Unna ou au bleu de toluidine à 1 p. 100, suivie d'une différenciation à Téther glycérique de Unna (p. 427) très étendu (10 gouttes pour 20 cm^ d'eau dist.) '.

Méthode de Yamamoto. — Le procédé de Yamamoto pour les coupes ressemble beaucoup à celui que nous avons décrit pour les frottis (p. 507). Il est très vanté par certains auteurs.

La fixation se fait de préférence au formol; mais on peut employer un fixateur quelconque (c'est là le grand avantage),

1. Minassian [Giortt. ilal. d. mal. ven. e. d. pelle, I, 1910) procède très rapidement comme il suit :

l'' Fixer et imprégner en vingt-quatre heures à o^° dans : nitrate d'argent 1.5, formol 5, eau 50; — 2° Réduire en vingt-quatre licures à froid dans : acide pyrogalliquo 3,5, formol 10, eau 100. Renouveler quatre ou cinq fois ce liquide; — 3» Déshydrater et inclure. Opérer en flacons jaunes.

])Our\u qu'il soil éliminé ensuite par un lavage convenable el prolongé. Si le matériel est conservé dans Talcool, on élimine celui-ci par un grand lavage de 24 heures à Teau distillée. On imprègne pendant quarante-huit heures à 37'' dans du nilrate d'argent à 5 p. 100. On lave à Teau distillée et on laisse ensuite vingt-quatre heures à 31° dans le bain réducteur (p. 507), puis on lave une heure à l'eau distillée. L'inclusion se fait à la paraffine ou de préférence au coUodion ^

Méthode de Golgi - pour la coloration de l'appareil réticulaire interne, applicable à la recherche des organismes spirales dans les tissus. Le grand avantage de cette méthode est de colorer en noir les Spirochètes seuls. Les tissus restent incolores et peuvent être leints par un colorant de contraste électif, tel que la safranine ou mieux le trichromique de Gajal (p. 426.)

1. Fixation. Traiter de deux à six heures à 30°, suivant la taille des fragments, par le mélange suivant :

Formol à 25 p. 100 \

Alcool à 90 ( cîa.

Acide arsénieux^ en soi. aq. sat )

2. Imprégner, après un court lavage, dans le nitrate d'argent à 1 p. 100 pendant dix à vingt-quatre heures.

3. Laver rapidement à l'eau distillée et réduire, pendant 8 à 24 heures, dans le réducteur de Gajal :

Hydroquinone 20 gr.

Sulfite de sodium 5 gr.

Formol 50 cm^.

Eau 1000 —

4. Laver à l'eau ordinaire, inclure à la paraffine, couper et déparaffiner les coupes ^.

5. Virer par le virage de Gajal, en poussant à fond au noir :

1. Barannikov [Centrolbl. f. Bukt., Orig., L, p. 263, 1909) emploie une méthode analogue. Il recommande d'imprégner à 42*' et dans robscurité. Il passe les organes, avant et après imprégnation, par une série graduée d'alcools et non directement de l'alcool à 80 ou 90" dans l'eau et vice versa.

2. Golgi. Di un mctodo per la facile e pronta dimostrazione dell'apparato reticolaro interne dellc cellule nervose. Avch. ital. biol., XLIX, p. 269-274, 1908. Gazz. med. lombarda. LXVII. p. 119-421. 1908.

3. L'acide arsénicux ne doit pas être pris à l'état vitreux, mais en poudre ou en cristaux.

4. D'après une communication verbale que je dois à l'obligeance du D"" Aldo Perroncito, de Pavie, Veratti fixe et imprègne soit par la méthode de Golgi pour l'appareil réticulairc interne, soit par la méthode de Cajal pour les neurotibrilles (p. 433) et continue comme il va être dit.

512 iMÉTIlODES SPÉCIALES

Snirocyanure d'nmmnniiim 3 gr.

liyposuUile de sudium 3 —

Eau 100 cm'.

Chlorure d'or brun à 1 p. lOl) quelques goutles.

6. Décolorer, très rapidement (une à trois minutes) et avec précaution, dans :

Permanganate de potassium • 0 gr. 50

Acide sulfurique pur 1 cm^.

Eau 1 000 —

Au besoin, allonger de son volume d'eau pour modérer Faction.