Examen après coloration

Frottis desséchés. — ExéciUer les iVollis selon la méthode indiquée p. 626. On peut essayer la méthode des frottis épais de Ross (p. 628), on les modifications de Cropper ^ et de James-. La fixation et la coloration se feront suivant une des nombreuses variantes de la méthode de Ilomanovsky (p. i04). Parmi ces procédés, ceux qui, à mon avis, donnent les meilleurs résultats sont la méthode panoptique de Pappenheim (p. 405) et le panchrome de Pappenheim (p. ili).

Pour un diagnostic rapide, on peut employer soit le bleu boracique de Manson (p. 391) ou la solution d'azur II de Giemsa (p. 389), après fixation par l'alcool, soit la méthode de Sabrazès (p. G25) (coloration vitale parle bleu de méthylène à 1 p. 500). Il est encore plus simple d'exécuter la méthode rapide de Giemsa (j). 410), qui donne en cinq minutes une préparation définitive.

Diagnostic du paludisme sur les frottis desséchés et colorés au Romanovsky. — Ce n'est pas ici le lieu de décrire les

1. Cropper, Rapid diagnosis of malaria, Brit. med. Joiuni., p. 891, 20 avril 191-2.

2. South, med. Joitrn., III, oct. 1911. Analyse dans Bull. Inst. Pasteur, X, p. 877, 191-2. Déposer sur la lame une goutte suffisante pour faire un grand frottis (7 mm'; mais ne pas étaler. Sécher. Dissoudre l'hémoglobine dans l'alcool chlorhydrique (X gouttes pour 50 cm^). Laver à l'eau, sécher, colorer.

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formes de Plasmodies qu'on rencontre dans les préparations. Nous voulons seulement mettre en garde contre les sources d'erreur.

Quels que soient la forme et le volume du corps examiné, il faut, pour que ce soit une Plasmodie, qu'on y dislingue nettement une partie bleue et une partie rouge.

Dans les formes jeunes, les plus difficiles à reconnaître, on devra donc trouver ce noyau rouge et ce protoplasme bleu : les anneaux présenteront, en outre, une vacuole incolore ou d'un bleu très pâle. Si on n'arrive pas à constater ces caractères, on ne pourra affirmer Texislence d'une Plasmodie.

Pour les formes adultes, la présence du pigment s'ajoute aux caractères chromatiques; il en est de même des granulations caractéristiques.

Causes d'erreur (voir p. 642). — 1. Une des principales causes d'erreur est due aux héinatoblastes superposés aux tiématies. Lorsqu'ils sont isolés sur un globule, ils simulent un jeune parasite; lorsqu'il y en a plusieurs, on peut les prendre pour les mérozoïtes d'un corps en rosace.

11 faut donc bien connaître ces corps, savoir qu'ils présentent un contour diiïus, un contenu g-ranuleux et qu'ils se colorent uniformément en violet, un peu plus foncé au centre. Jamais ils ne présentent un contraste net de rouge et de bleu, comme les vrais parasites.

Un amas d'bématoblastes peut simuler un gamète, mais on se tirera d'erreur en constatant l'absence du pigment.

2. Vacuoles colorées. — Elles sont quelquefois très fréquentes, surtout lorsque Tétalement a été fait dans de mauvaises conditions, avec une gouttelette longtemps exposée à l'air. Elles peuvent avoir un contour net et un aspect granuleux, mais ne présentent pas les zones rouge et bleue caractéristiques des parasites.

3. Hématies à granulations basophilcs. — C'est tout au plus si ces granulations pourraient être confondues avec celles de ScbûfTner, mais elles n'en ont ni la coloration rouge ni les dimensions et elles ne sont pas accompagnées par un parasite.

4. Nous ne ferons que mentionner comme autres sources d'erreur, les normoblastes à granulations basophiles, les débris de noyaux leucocytaires, les hématies en demi-lune, les leucocytes eux-mêmes et enfin les corps étrangers provenant de la peau sous forme de Levures, Bactéries, poussières, pigment, etc. Dans tous ces cas, il suffira de rechercher s'il y a vraiment un parasite coloré en rouge et en bleu et renfermant du pigment.

Frottis humides. — Ceux-ci n'ont d'intérêt que pour étudier la structure du noyau, après coloration par l'hématoxyline ferrique. Pour tous les autres détails morphologiques, les frottis desséchés et colorés au Romanovsky donnent d'excellentes préparations. Les frottis humides seront fixés d'après la méthode décrite p. 484 : faire les frottis sur lamelles et les déposer, face en dessous, sur le fixateur.