I. — PRINCIPE DE L'ÉCLAIRAGE A FOND NOIR

L'éclairage à fond noir n'est pas une nouveauté, comme certains le croient. C'est une méthode connue depuis longtemps : sans remonter plus loin qu'une vingtaine d'années, tous les grands microscopes des maisons sérieuses possédaient déjà, parmi leurs accessoires, un diajjhragme à fond noir. C'était une sorte de diaphragme à étoile (fig. 121) qu'on plaçait au-dessous du condensateur, au niveau de l'iris. Le résultat ainsi obtenu était assez

P ., Fig. 121. — Dia-

1 m pariait. ^ ^ phragme pour fond

L'essor qu'a pris récemment cette méthode noir. d'examen est dû à des causes multiples, dont les principales sont le perfectionnement des sources lumineuses, la découverte du Tréponème et enfin les travaux sur les véritables objets ullramicroscopiques.

L'éclairage à fond noir nécessite une source lumineuse intense. Aussi, tant qu'on en a été réduit à l'emploi des grosses lampes à arc, celte méthode de recherches ne pouvait réellement entrer dans la pratique courante. L'apparition des petites lampes à arc et surtout de la lampe de Nernst, ainsi que des brûleurs à gaz à manchon (type droit ou renversé), donnant une lumière éclatante, a permis d'installer, commodément et sans grands frais, un éclairage très suffisant pour les observations à fond noir.

La découverte du Tréponème a provoqué la recherche d'un procédé de diagnostic facile, rapide et sûr. Il faut, pour colorer convenablement ce parasite et le découvrir dans une préparation, une éducation technique que n'ont malheureusement pas tous les praticiens. Pour un opérateur un peu exercé et avec les méthodes

M. Langeron. — Précis de Microscopie, 14

actuelles, il ne iaiil ])as plus de cinq minnles pour colorer un frottis : néanmoins c'est encore trop long lorsqu'on a de nombreux malades à examiner. L'emploi du fond noir est beaucoup plus rapide et tout aussi sûr. Aussi l'usage universel qui en a été fait jiour le diagnostic de la syphilis a-t-il grandement influé sur le perfectionnement et la simplificalion des appareils. D'ailleurs tous ces perfectionnements étaient corrélatifs des progrès accomplis dans le domaine de l'ultramicroscopie pure, qui est du ressort de la physique et de la chimie. Les sciences biologiques ont profité des perfectionnements réalisés dans l'étude des objets réellement invisibles.

Dans l'éclairage à fond noir, les objets api)araissent comme des points brillants sur un fond obscur, comme un ciel constellé d'étoiles par une nuit claire et sans lune. On conçoit que des objets très petits, très difficiles à colorer ou peu réfringents, deviennent très facilement visibles grâce à cet ai tifice.

Voici comment on arrive à le réaliser. On s'arrange de manière à arrêter tous les rayons lumineux qui pourraient pénétrer directement dans l'objectif. On y parvient au moyen d'un diaphragme, dont le diamètre correspond à l'ouverture de l'objectif et qui est interposé, sous le condensateur, sur le trajet des rayons lumineux. Par contre, l'objet à examiner est éclairé viveuient par les rayons qui traversent la zone annulaire entourant le précédent diaphragme. Cette zone est située au delà des limites de l'angle d'ouverture de l'objectif. Il ne parvient donc, dans ce dernier, aucun rayon lumineux direct; aussi le champ est-il parfaitement obscur. De son côté, l'objet est éclairé par des rayons latéraux très obliques qui subissent la réflexion totale (p. 48); il modifie la marche de ces rayons en les réfractant et en les dilïractant et les fait pénétrer ainsi dans l'objectif; cet objet paraît donc brillamment éclairé sur le fond obscur. Le phénomène est analogue à celui qui se produit, lorsqu'un rayon de soleil pénètre dans une chambre obscure et illumine les poussières invisibles qui flottent dans l'air.

Il faut donc, pour obtenir un bon éclairage à fond noir, réaliser les deux conditions suivantes :

1° Empocher qu'aucun rayon du faisceau éclairant ne pénètre dans l'objectif;

2° Eclairer l'objet par des rayons latéraux aussi intenses que possible.

ECLAIRAGE A FOND NOIR ET ULTRAMICROSCOPIE

Ces deux conditions sont réalisées grâce au phénomène de la réflexion totale, qui se trouve être le fondement de la méthode du fond noir.