APRÈS INCLUSION A LA GOMME, A LA CELLOÏDINE, A LA PARAFFINE

Les microtomes à plan incliné permettent de faire des coupes après tous les modes de durcissement que nous avons indiqués.

Ils se prêtent donc à des usages plus nombreux que les microtomes à paraffine, lesquels ne sont applicables qu’aux pièces incluses dans cette substance, et si l’on ne peut avoir dans un laboratoire qu’un seul microtome, il vaut mieux prendre un microtome à plan incliné qu'un autre, mais pour la confection des coupes en série après inclusion à la paraffine, ils sont moins commodes et moins parfaits que les microtomes automatiques que nous avons cités. Les séries sont beaucoup plus longues à faire et on n’obtient pas facilement des coupes aussi minces qu’avec les microtomes de Minot ou de Dumaige. Nous étudierons l’emploi du microtome à plan incliné dans différents cas.

1° Coupes après durcissement par les fixateurs, ou par la gomme et l’alcool. — Les pièces entourées et soutenues par des morceaux de moelle de sureau sont collées avec de la gomme ou du collodion sur un bloc de liège ou de bois destiné à être saisi par les mors de la pince mobile. Il faut avoir bien soin de les coller très solidement sur ce support pour éviter leur arrachement au cours de l’opération. On serre le bloc de liège dans la pince et on oriente la pièce de la manière convenable en donnant à la pince mobile les inclinaisons nécessaires. On a soin d'amener la surface destinée à être coupée juste à la hauteur du rasoir alors que le chariot porteobjet est au bas de sa course. On y arrive en élevant ou en abaissant le support dans les mors de la pince, ou bien, si cela ne suffit pas, en élevant la pince mobile sur la tige verticale disposée à cet effet.

Le rasoir est placé de manière à attaquer la pièce très obliquement, et de préférence par un de ses angles. On arrose la lame d’alcool à 90° en se servant d’un flacon compte- gouttes. Le chariot porte-rasoir étant au bout de sa course, on le tire vers soi de la main droite, en saisissant le corps du chariot et sans appuyer sur lui, puis on l’amène régulièrement à soi, jusqu’à l'autre extrémité de la glissière. Rencontrant la pièce sur son chemin, le rasoir y a fait une coupe. Celle-ci Hotte dans l'alcool, on la cueille avec un pinceau ou une aiguille, et

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on la porte dans une soucoupe pleine d’alcool où elle séjourne jusqu’au moment où l’on veut s’en servir (voy. pour cela p. 163, Colorations).

On repousse alors le rasoir à l’extrémité de la glissière ; on tourne lavis micrométrique de la quantité voulue, on fait une nouvelle coupe et l’on continue ainsi en ayant soin de tourner la vis micrométrique après chaque course du rasoir alors qu’on l’a ramené à son point de départ. Quelques accidents peuvent se produire pendant la marche de l’opération et la troubler plus ou moins. Comme ils tiennent à la nature même du microtome et peuvent se produire après les divers modes de durcissement, nous en reparlerons après avoir étudié tous les cas. Cette manière de faire les coupes ne se prête pas à la confection de séries ininterrompues à cause des sections manquées par suite du durcissement toujours imparfait.

2° Coupes après inclusion à la celloïdine. — Le bloc de celloïdine ou de collodion est collé sur le support avec du collodion, on dispose l'instrument comme il a été dit plus haut, on arrose la lame d’alcool à 90° et on fait les coupes.

On peut conserver toutes les sections et les arranger en série, en suivant le procédé un peu compliqué que voici (Weigert) : On place les coupes suivant leur rang sur des bandelettes de papier mince non collé (papier de closets) imbibées d'alcool. Pour éviter leur dessiccation, on étend ces bandelettes sur du papier Joseph imbibé d'alcool et placé sur une assiette plate, puis lorsqu'une bandelette est couverte de coupes on la porte sur une lame de verre collodionnée en la renversant de manière à mettre les coupes en contact avec la lame. Les coupes adhèrent au collodion encore humide, et on peut enlever le papier sans qu'elles se déplacent. On les recouvre d’une seconde couche de collodion et elles sont dès lors solidement maintenues en place, pourvu que l'on n’emploie pas dans les traitements ultérieurs de dissolvants du collodion tels que l’essence de girofle. Ainsi fixées, les coupes peuvent être colorées comme on le verra plus loin.

3° Coupes après inclusion à la paraffine. — On peut faire très aisément au microtome à plan incliné des coupes après inclusion à la paraffine ; on obtient ainsi des séries régulières, mais moins rapidement et moins bien qu’avec les microtomes automatiques. Voici comment on procède : le bloc de paraffine est fixé sur le support de bois et mis à une hauteur convenable ; le rasoir est placé obliquement, il doit être absolument sec. On commence la première coupe en attaquant la pièce par un de ses angles, on l'achève et on recommence après avoir ramené le rasoir à son point de départ. Les coupes ainsi faites ont une tendance naturelle à s’enrouler sur elles-mêmes, et si l'on ne s’y oppose pas, elles forment de petits cylindres qu’il est ensuite assez difficile de dérouler pour étaler la coupe sur la lame de verre.

Pour éviter cet enroulement, on se sert d’un pinceau très fin qui, tenu de la main gauche, appuie légèrement sur le coin de la pièce par lequel le rasoir commence la coupe. Le pinceau applique ainsi la coupe contre la lame du rasoir, tandis que cette dernière glisse au-dessous d’elle, et il l’empêche de s’enrouler. Lorsque la coupe est achevée, elle adhère aux poils du pinceau, et il est facile de la transporter à l’aide de ce dernier sur une lame de verre convenablement préparée. Les coupes se font ainsi assez régulièrement, et avec un peu d'habitude on arrive vite à n’en pas manquer une seule. Si donc on les a rangées sur le porte-objet dans l’ordre où elles ont été faites, on aura une série continue comme avec le microtome automatique, et beaucoup d’histologistes font ainsi leurs coupes sériées.

Si l’on veut faire un ruban avec le microtome à plan incliné, on le peut aussi de la manière suivante : au lieu de disposer le rasoir obliquement par rapport à la pièce, on le met bien perpendiculairement, on attaque le bloc non plus par un angle, mais par une de ses faces et on fait une première coupe; la seconde se présentant aussi par son bord se collera à la précédente et on obtiendra ainsi un ruban qui reposera sur la lame du rasoir. Si l’on veut donner à ce ruban une certaine longueur, il est bon de munir la lame du rasoir d’une plaque de