‹ Précis de technique histologique et embryologiqueChapitre 46 sur 133 · M E T 11 0 1) E S G E N EGALES · texte numérisé non relu

M E T 11 0 1) E S G E N EGALES

particulier au lavage des lames et lamelles imprégnées de baume < 1 ue l’on voudrait remettre en usage.

Pour débarrasser les coupes de la paraffine, ou peut tout aussi bien mettre les lames qui les portent dans un récipient quelconque, tel qu'une boîte à rainures, contenant du xylol, dans lequel la paraffine se dissout aisément.

Dès que le lavage au xylol est achevé, on essuie l’excès de ce liquide sur les bords de la lame, en dehors du champ occupé par les coupes et on verse immédiatement sur celles-ci en évitant de les laisser dessécher (le xylol s’évapore très vite), quelques gouttes d'alcool absolu. La préparation qui était restée transparente dans le xylol devient alors opaque, on lave une fois à l'alcool absolu et on recouvre les coupes d’alcool à 00° en ayant bien soin de les tenir constamment couvertes de et; liquide jusqu'au moment où on s'apprêtera à les colorer. L'alcool dont on se sert immédiatement après le xylol doit être parfaitement absolu, sans cela il ne se mêle pas bien avec le xylol et il se forme de petites gouttelettes blanchâtres qui ruinent la préparation. Les coupes parfaitement dépouillées de la paralline par le xylol et imprégnées d'alcool sont prêtes à recevoir une coloration et suivant que le colorant choisi sera en solution alcoolique ou aqueuse, on pourra les y plonger de suite, ou seulement après une hydratation préalable comme nous l'expliquerons au chapitre des Colorations.

4° Précautions à prendre pour faire les coupes à la paraffine. — En dehors des précautions que nous avons indiquées dans le cours de cette description, il en est quelques autres dont il convient de parler ici. Et d'abord pour faire de bonnes coupes il faut avoir des inclusions parfaites, c'est-à-dire dont la paraftine ait complètement pénétré la pièce en s’incorporant avec elle, et possède en même temps une dureté convenable.

On reconnaît que l'inclusion est bien faite lorsque la surface d'une seclion faite à travers la pièce est aussi brillante au niveau de cette dernière que sur la paraffine elle-même, et présente un aspect glacé. Si la coupe de la pièce est au contraire ternie, c'est que la paraffine a mal pénétré cette der-

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nière. Dans ce cas les coupes se font mal, elles sont épaisses, incomplètes, inégales, il est même parfois impossible d’en faire. La pièce peut aussi se détacher du bloc de paraliine dans lequel elle est mal incluse.

Cette mauvaise pénétration de la pièce peut tenir à une imbibition imparfaite de cette dernière par le dissolvant de la paraliine, ou à un séjour insuflisant dans le bain de paraliine fondue. Dans ce dernier cas, il est facile de remédier au mal en remettant la pièce dans le bain de paraliine à l’étuve, mais si l’imbibition par le dissolvant a été mal faite, comme cela peut tenir en partie à une déshydratation incomplète, il est difiicile de réparer le mal et la pièce est le plus souvent perdue.

Pour ce qui a trait à la dureté de la paraliine, on a dit plus haut comment on l’obtenait par la méthode des mélanges, mais il peut arriver pendant les grandes chaleurs de l'été qu'un bloc formé môme de paraliine dure pure, fondant à 58°, soit trop mou pour permettre de faire de bonnes coupes. Dans ce cas on peut placer le bloc dans un peu de glace avant de commencer les coupes, et l'y reporter avec son support de temps à autre pendant le travail ; on peut aussi le placer sous un robinet d'eau très froide, mais malgré cela les coupes se font mal et l'on est parfois obligé de renoncer à en faire.

Le meilleur moyen d'avoir des coupes régulières est de ne pas s'interrompre ou de s’interrompre le moins possible pendant la confection du ruban. Si l'on devait suspendre l’exécution des coupes pour quelques heures, il serait bon de recouvrir la surface de section d'un peu de paraffine fondue pour la mettre à l'abri de la dessiccation. En e lie t, malgré la présence de la paraffine qui les imprègne, les pièces renferment encore assez de liquide (xylol ou autre dissolvant de la paraliine) pour se dessécher et se rétracter si on les expose à l’air.

- Coupes au microtome a plan incliné

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