DES COUPES D'EMBRYONS

Les questions délicates d'embryologie ne peuvent être élucidées que par l'étude de séries de coupes faites sur des embryons de différents Ages; pour les premières phases du développement des organes, l'embryon d'oiseau est surtout utile, vu la facilité avec laquelle les incubations artificielles nous permettent de nous procurer les sujets d'observation. Pour les phases ultérieures nous disposons à la fois des embryons d'oiseaux et des embryons de mammifères, qu'il est facile de se procurer dans les abattoirs, surtout vers les mois de novembre, décembre et janvier.

La manière de traiter les pièces pour la pratique des coupes diffère, selon qu'on opère sur des embryons très-jeunes, ou sur des embryons

présentant déjà un corps bien délimité et séparable de ses annexes. Nous bornant ici à indiquer le manuel opératoire des recherches faites sur l'embryon de poule, nous dirons qu'il faut, relativement à l'âge, c'est-à-dire au mode de préparation, classer ces embryons en deux groupes : 1" ceux qui n'ont pas dépassé le quatrième jour de l'incubation ; 2° ceux qui sont arrivés au delà de ce quatrième jour.

A. — Les embryons pris au delà du quatrième jour doivent être durcis par l'acide chromique, puis l'alcool, et montés et débités en coupes, absolument comme les fragments du système nerveux central, dont il a été précédemment question.

B. — Pour les embryons pris dans le courant des quatre premiers jours de l'incubation, nous avons employé une méthode qui se résume dans la formule suivante : durcissement par l'acide osmique et coloration en masse ^ et dont voici le développement (1): l'œuf étant ouvert sur une étendue circulaire un peu plus large qu'une pièce de 2 fr., on dépose sur l'embryon

(I) Voy. Mathias Duval, Études sur l'origine de Vallantoide cJiez le poulet (avec 2 planches. Paris, 1877. Extrait de la Revue des sciences naturelles, t. VI, sept. 1877).

DES COUPES D'EMBliYONS. 303

(qui à cette époque n'est pas fixé et vient toujours se présenter au point où on ouvre l'œuf) quelques gouttes d'une solution concentrée d'acide osmique (procédé de G. Pouchet) ; aussitôt que Taire touchée par cette solution commence à virer franchement au noir, ce qui a lieu au bout de 30 à 60 secondes, l'œuf est plongé dans un cristallisoir plein d'eau distillée, et avec de fins ciseaux on découpe circulairement l'aire vasculaire, dans le centre de laquelle est l'embryon ; cette opération est très-facile, car, par l'acide osmique, le blastoderme est devenu ferme et se laisse couper aux ciseaux comme une feuille de papier (un peu fragile cependant).

Le petit disque ainsi obtenu peut être monté entre lame et lamelle, dans la glycérine, ou mieux au baume du Canada (après déshydratation, voy. pag. 248), et il constitue alors une excellente préparation pour l'étude des formes extérieures, c'est-à-dire pour l'examen des premiers plissements qui circonscrivent, sur le blastoderne, la ligne primitive, le capuchon céphalique, et même pour la formation du cœur et des trois vésicules cérébrales primitives. Mais, pour la pratique de bonnes coupes, il faut faire

30 i- TECIINIQLK APPLIQUÉE.

subir de nouvelles opérations au fragment de blastoderme traité par Tacide osmique.

Pour achever le durcissement, on place le petit disque mince ainsi obtenu dans de l'alcool à 40°, et on l'y laisse une heure ou deux; on le lave ensuite à l'eau pour enlever tout l'alcool, puis on le dépose dans une solution de picrocarmin. Ce liquide colorant pénètre et colore en ving-t-quatre heures le blastoderme et l'embryon dans toute leur épaisseur ; il n'y a plus alors qu'à monter la pièce à la gomme, en l'orientant soigneusement (pour faire des coupes bien perpendiculaires à l'axe de l'embryon, ou du moins à l'axe de la partie postérieure de son corps) entre deux lames de sureau, selon les procédés aujourd'hui classiques. Nous recommanderons cependant, de préférence à la gomme, l'emploi du collodion, substance trop négligée en histologie, et qui n'a encore, à notre connaissance, été employée, pour fixer des pièces, que par le D' Latte ux pour faire des coupes de poils ou cheveux.

Les coupes que l'on pratique alors sont colorées d'avance, ainsi qu'il résulte des opérations précédentes, et peuvent être immédiatement montées à la glycérine ou au baume du Canada.