MODE OPÉRATOIRE
l'on vent au contraire nitraterune séreuse surplace, comme par exemple le péritoine d'un batracien ou d'un reptile, on ouvrira largement la cavité périlonéale, et on rabattra sur une plaque de liège les parois latérales de l'abdomen. On remarquera que la nitratation des épilbéliums qui tapissent les membranes minces, épiploon, mésentère, s'opère plus difficilement que celle de ces mômes épitbéliums lorsqu'ils reposent sur une épaisseur plus grande île tissu. C'est ainsi que les deux laces du centre phrénique des différents animaux s'imprègnent rapidement, tandis que le revêtement épitbélial de l'épiploon exige, pour être mis en évidence, un contact beaucoup plus prolongé avec la solution de nitrate d'argent.
Lorsque la surface épitbéliale est bien étalée, on la soumet pendant quelques instants au lavage à l'eau distillée. Il est bon dans certaines circonstances, surtout lorsqu'on veut imprégner plusieurs épitbéliums à la fois, de plonger le tissu en entier pendant quelques minutes dans de l'eau distillée. Ce lavage a pour but de détacher les substances albuminoïdes qui auraient pu rester adhérentes à l'épithélium,, et qui dans la suite détermineraient un précipité irrégulier de nitrate d'argent. Le précipité obtenu dans ce cas se présente sous la forme de grains d'argent plus ou moins volumineux disposés le long des limites épitbéliales et surtout dans l'intervalle de plusieurs cellules. Ce sont des productions accidentelles de ce genre qui ont fait croire aux premiers observateurs (Dybkowsky) qu'il existait à la surface des séreuses des orifices béants faisant communiquer la cavité de la séreuse avec le système lymphatique. On les a successivement décrits sous les noms destomates puis de pseuclostomates . Ce sont de simples accidents- de préparation, dont on peut déterminer à volonté l'apparition à la surface de toutes les séreuses, et en particulier à la face pleurale du diaphragme. Il suffit, pour cela, de ne pas laver la surface de la séreuse à l'eau distillée, ou encore de faire usage de solutions trop concentrées, surtout si on laisse agir directement la lumière solaire.
Lorsque la séreuse est suffisamment lavée, on procède à l'imprégnation. Pour cela on peut avoir recours à deux procédés : au lavage superficiel avec une solution de nitrate d'argent à 3 pour 1000, ou bien à l'immersion pendant quelque temps dans une solution plus faible que la précédente: i à 2 pour 1000 par exemple. Toutes les fois que la surface épithéliale sera bien étalée, il faudra avoir recours au premier procédé. Les contours des cellules seront plus nettement délimités, et les préparations seront moins sujettes à brunir dans la suite. Il est impossible de fixer d'une manière précise la durée de ce lavage qui doit être autant que possible continu. Elle est surtout en
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rapport avec l'inlensiLé de la lumière dans laquelle on opère. En général elle ne doit pas dépasser quelques minutes.
Quand on se propose, au contraire, d'imprégner toute une séreuse, ou bien un tissu dans l'épaisseur duquel on désire mettre ceilains éléments en évidence, il faut employer l'immersion. La durée de cette immersion variera de cinq minutes à un quart d'heure pour une solution de nitrate d'argent à 2 pour 1000 : elle sera beaucoup plus prolongée avec une solution à 1 pour 1000. Cette dernière convient surtout pour la délimitation des couches épithéliales du périnèvre, des corpuscules deVater, etc(1). Elle peut également s'appliquer aux épithéliums vasculaires, pour peu que les vaisseaux n'aient pas un calibre trop considérable. Nous citerons, comme exemple, les vaisseaux du mésentère qui sont assez superficiels pour pouvoir s'imprégner directement. Dans le cas contraire, il faudrait recourir aux injections de nitrate d'argent, ou mieux d'un mélange d'une solution de gélatine et de nitrate d'argent (nitrate d'argent 1, solution de gélatine iOO), après avoir fait passer un courant d'eau distillée dans le système circulatoire. Les préparations devront être montées dans ce cas particulier avec le baume de Damar. Enfin si le vaisseau est trop volumineux, il est préférable de le fendre dans sa longueur et de l'étaler sur une plaque de liège, pour le nitrater, après quoi on détachera à l'aide du rasoir ou par décollement les couches superficielles qui seront préparées dans la glycérine.
La lumière qui semble convenir le mieux pour la réussite de la nitratation est une lumière moyenne. C'est celle que l'on obtient par exemple en se plaçant à l'ombre par un jour de soleil. Sous l'influence directe des rayons solaires, le précipité obtenu serait irrégulier, et ne resterait pas limité aux confins des cellules.
Lorsqu'on s'est assuré en examinant rapidement la préparation que la nitratation est suffisante, il faut la soumettre rapidement à un lavage abondant à l'eau distillée. La pièce est ensuite portée dans de l'alcool à 36 degrés, et plongée dans l'obscurité pendant quelques jours. Au bout de ce temps, les préparations pourront être montées dans la glycérine ou dans le baume de Damar. Elles devront ensuite être conservées à l'abri de la lumière.
On peut du reste obvier à l'inconvénient qu'ont les préparations de noircir au bout d'un certain temps, en employant un procédé signalé par Legros {Journal de VAnal., 1868), et qui consiste à plonger la pièce une fois nitratée pendant quelques instants dans une
(1) Dans les immersions prolongées on remplacera par des épingles de verre ou des piquants de hérisson les épingles en laiton qui servent à fixer la préparation et qui détermineraient un précipité abondant d'argent.
