II. — SENSIBILITÉ DES GERMES A LA CHLOROMYCETINE

Nous avons déterminé chez la plupart de nos malades, dès l'isolement du germe en cause, le taux de sensibilité moyenne aux différents antibiotiques en vue d’en déduire des conclusions pratiques pour l’efficience de la thérapeutique. Il convient tout d’abord de, noter que les recherches de laboratoire sont entachées d’un certain défaut de précision, le clinicien devant en tenir compte pour l'élaboration de son traitement. Nous avons calculé cette sensibilité vis-à-vis de la chloromycétine et de l’auréomycine, les deux autres antibiotiques connus et employés à l’heure actuelle n'ayant pas ou peu d'action in vitro sur les Salmonellæ. Nous avons employé une méthode simple de dilutions en série sur milieu utilisé par Sureau [1 et composé ainsi

PODIODE MEN Fe cette de 10 g GUCDSEN SA MR ER 22 10 g RO A RE A OO ee OS cn 1 litre Phénol sulfone phtaléine .... qiS:

Au cours de ces multiples manipulations, nous avons constaté les faits suivants : de nombreux facteurs perturbent ou font varier l’activité in vitro de la chloromycétine.

1° La concentration.

En effet, et de façon à peu près générale, le taux de sensibilité d’un germe varie, avec des concentrations allant de 10° à 10° germes par centimètre cube, du simple au double. Cette variation de sensibilité n’est pas toutefois progressive : « Brusque pour des concentrations élevées, elle tend vers une asymptote pour les concentrations faibles. « (SUREAU- CHABBERT.)

Nous comprenons la nécessité, au cours des titrages de taux de sensibilité, d'employer des inoculums faibles de l’ordre de 1.000 à 10.000 germes par centimètre cube.

Nous partons, pour ce faire, de cultures jeunes, repiquées la veille sur bouillon ordinaire ou eau peptonée. Sur le point de pratiquer nos dilutions en série, nous prélevons quelques gouttes (I à IT) du bouillon-culture, pour ensemencer un

nouveau tube de bouillon stérile qui sert à nos dosages. Sui: vant la pousse plus ou moins rapide sur bouillon de la veille, on peut pratiquer un ou deux passages pour réduire son inoculum aux proportions indiquées. Nous arrivons ainsi à obtenir des concentrations peu élevées et à peu près toujours identiques.

2° Milieu et pH.

« Selon la richesse des milieux de culture, on peut multiplier par 2 ou 3 l’activité in vitro de la chloromycétine. » (SUREAU [71.)

Il convient de faire agir la chloromycétine dans un milieu de pH constant, son activité offrant de grandes variations avec le pH. Pour nous, nous restons fidèle à l’emploi du milieu indiqué par SurEAU dont la couleur rouge violacé de la phénol sulfone phtaléine indique un pH : 7,8.

Si les milieux à tester apportaient une variation notable du pH, il conviendrait de rajuster celui-ci et de la ramener à 7,8.

3° Paliers de bactériostase. 4

Si l’on surveille toutes les heures un titrage effectué en milieu liquide et placé à l’étuve, on observe les phénomènes suivants

Au bout d’un temps correspondant à la pousse microbienne de six à dix heures, il se produit un virage plus ou moins prononcé dans le tube témoin et les tubes contenant les plus faibles concentrations en antibiotique. À ce moment peut se faire une première lecture qui indique la sensibilité maxima de l’ensemble des germes.

Puis, dans les heures qui suivent, et ce jusqu’à environ vingt-quatre heures, se produisent des paliers successifs correspondant aux sensibilités variées des germes au sein de la souche isolée. Au bout de vingt-quatre heures, quelquefois davantage, la courbe se stabilise en plateau définitif qui indique la sensibilité définitive du germe à la chloromycétine. Pour un clinicien non averti, le temps horaire indiqué peut être méconnu et le germe passer pour sensible ou

non à la thérapeutique. Il convient donc pour le laboratoire de répondre au clinicien : « Ce germe est sensible à tel antibiotique et nécessite des concentrations humorales que vous devez obtenir par l'emploi de telles doses plus ou moins fractionnées. »

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Fic. 6. — Courbes des paliers de bactériostase.

4° La résistance.

Le processus du développement de la résistance ne semble pas être l’effet d’une sélection entre les organismes résistants qui se présentent dans la culture originale, car, dans la culture résistante définitive, les organismes sont plus résistants que tous les éléments de la culture originale. Ce processus doit donc impliquer une adaptation de l'organisme à l’antibiotique, qui entraîne une atténuation de la sensibilité. L'adaptation des organismes ne semble cependant pas une réaction spécifique, car les organismes rendus résistants au même médicament peuvent différer dans leur mécanisme

de résistance et dans d’autres propriétés. Le mécanisme pro-

ET

fond du développement de la résistance est probablement un aspect de la faculté de variation et de mutation spontanée qui est une propriété commune de tous les microorganismes.

« Il semble que certains organismes soient plus sujets que d'autres à développer la résistance au cours des infections chimiques, mais peut-être est-ce la nature de la lésion qui représente le facteur déterminant ? » (Mc Ixrosn.)

Ou plutôt s'agit-il d'une élimination graduelle des souches plus sensibles qui laisse se propager seulement les souches plus résistantes ?

Nous avons essayé de créer des résistances à la chloromycétine de bacilles typhiques, in vitro, en les repiquant dans des milieux contenant des taux d’antibiotique de peu inférieurs aux doses susceptibles d’inhiber leur pousse. Opérant d'autre part sur des boites de Petri contenant de la gélose, au moyen de disques ou de cylindres de Heatley, nous avons pu constater la pousse de colonies microbiennes dans la zone d'inhibition. Il s'agissait de bacilles typhiques isolés d’hémoculture, et dont nous recherchions la sensibilité à la chloromycétine sur milieu solide par mesure du diamètre d’inhibition. Ces colonies, identifiées comme des bacilles d’Eberth, montrèrent, par la méthode de dilutions successives de type Oxford, une sensibilité identique à celle de la souche incriminée. Mais la courbe des paliers de bactériostase montrait une ascension plus rapide vers le plateau définitif.

D'autre part, chez les mêmes malades, nous avons suivi la sensibilité des germes isolés à l’occasion

4° de l’hémoculture pratiquée à leur arrivée dans le service;

2° d’hémocultures ou coprocultures effectuées à l’occasion d’une rechute.

Dans tous ces cas, compte tenu des légères différences qu'entraîne l’imprécision de nos méthodes, nous n'avons pu jusqu'ici déceler de diminution de la sensibilité ou la création d’une résistance.

Le clinicien doit entendre, par résistance d’un germe à un antibiotique donné, l'impossibilité d'obtenir ou de main-