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On repique sur gélose en partant des ensemencements de 40 heures en milieu non phéniqué, en milieu phéniqué et en milieu de Besson. "Voici les résultats de ces cuitures après 12 heures environ. ,
1° Milieu non phéniqué. — Seul le tube 10 donne une colonie coliforme. Au microscope : petit bacille plus long et plus fin que le B. Coli, très mobile (plus que ne l'est habituellement le Coli), Gram négatif, groupement en dispositions parallèles,
Bacille fermentant le lactose, mais donnant une culture faible en eau peptonée et pas d’indol.
2° Milieu phéniqué. — Le seul développement apparu (100) nous donne, sur gélose, de grandes colonies plates dentelées en forme de corolles de fleurs. Ses éléments sont constitués d’un gros bacille à spore centrale,
3° Milieu de Besson. — Tous les tubes ont été, après 40 heures, le siège d’une réaction : virage, changement de teinte, gaz.
Les colonies sur gélose se présentent ainsi. Pour :
100 : Enduit de petites colonies extrêmement fines et rapprochées, émaillées de colonies plus opaques,
franchement jaunes.
Microscope : bacille Gram positif; coccus Gram, négatif. |
Ce dernier germe ne fermente pas le lactose et ne donne pas d’indol.
50 : Petites colonies translucides fessemblant assez à du B. Coli contenant des impuretés.
L'impureté est un gros bacille Gram positif.
Les petites colonies sont formées d’un cocobacille légèrement mobile, Gram négatif.
10 : Grandes colonies plates jaunâtres, aspect franchement crémeux. |
Bacilles (Gram positif) et cocobacilles (Gram négatif) faiblement mobiles. Ces derniers ne fermentent ni ne virent le lactose tournesolé et ne donnent pas d’indol. Pare -
10° : Comme pour 100, grosses colonies de bacilles Gram positif et fines colonies de cocci Gram négatif.
5 : Colonies coliformes, mais très confluentes, tendance au développement en nappe.
Petit coccobacille (presque coccus) très faiblement mobile à Gram négatif.
Pas de fermentation du lactose, pas de production d’indol. | :
2 : Colonies voisines du Colibacille, un peu plus fines et confluentes. à
Tout petit coccobacille faiblement mobile à Gram négatif, ne produisant pas d’indol.
1: Petites colonies claires et grandes colonies grenues. HEURE
Ces dernières sont constituées de grands fila-
ments à Gram positif. Les petites colonies ont pour
élément un bacille Gram négatif, plus gros que ne l’est habituellement le B. Coli et affectant un groupement en dispositions parallèles.
Nous avons obtenu sur milieu phéniqué des germes n'ayant aucune analogie avec le B. Coli, sur milieu non phéniqué la culture d’un bacille morphologiquement non colibacillaire et, sur milieu de Besson, une pousse dans les quantités 100, 50, 10, 10°, 5, 2.et 1.
Le résultat des contrôles effectués sur ces cultures — et dont nous avons cité une partie — est le suivant:
Quantité ensemencée et milieu Gélose lactosée Täbe B Lai : Eau choisi au| ,tournesolée peptonée 1° ensemencement
Ferment. - Gaz| Virage-fluor-gaz 100 (B) O OS » » » »
0 1B 04 1070 0. 0 SR D aa 10 (NP) Oo! © © Oo O Pas d'indol | Coagulation forte 10 (B) O O |Orange O + IRétetn intense | Pas d'indol (et rapide du caillot 4 Coagulation forte 10° (B) O O O O + Ré:raction rapide| Pas d'indol
5 ‘du caillot Coagulation forte Rétraction intense | Pas d'indol et rapide du caillot Coag. très forte \Rétraction très intense du caillot
2 (B) O O! O O ++4 Transudation irès| Pas d'indol
5 (B)|. © OMROLO-L Er
jrapide et très tabondante du sérum 1 (B) UE (4 OHOTO O Pas d'indol
Ne RAS PEN, DUT, LISE OS AUS "ARR 2 NO RU ee Er DEL QAR SE TE AR
Les germes qui ont produit ces réactions de con- è trôle ont été vétifiés au microscope. Partout où nous avions primitivement des impuretés, celles-ci ont été éliminées au cours du deuxième reépiquage. Donc, nous n’étudions, exclusivement, dans le tableau précédent le germe qui avait appelé primitivement notre attention.
Voici les résultats du contrôle microscopique :
1°" repiquage k k (le germe étudié est souligné) D répiquage
1) Bacille, Gram positif Coccobacille très faiblement 2) Coccobacille, Gram négatif| mobile. Gram négatif
1) Grand bacille. Gram po- Très petit coccobacille, Gram sitif négatif, faiblement mobile 2) Très petit coccobacille fai- | blement mobile, Gram né-
gatif
| |Bacille nettement plus long et 10 (N.P.) plus fin que ne l'est le Coli.
Beaucoup plus mobile |
1) Grand bacille, Gram po-|Petit coccobacille. Gram nésitif gatif
2) Petit coccobacille, Gram négatig
10’ (B) 1) Gros bacille, Gram positif Petit coccobacille faiblement 2) Petit coccobacille, Gram| mobile. Gram négatif négatif
Tout petit coccobacille, Gram|Petit coccobacille. Gram nénégatif gatlf
Tout petit coccobacille faible-|Tout petit bacille à mobilité
ment mobile. Gram négatif| assez marquée, mais sur
place
1) Grands filaments Gram positif 2) Bâäcille Gram négatif un) Col.
| peu plus grand que ne l'est\Complètement immobile
häbitüellément le B. Coli
Bacille de dimensions un peu supérieures à celles du B.
En conclusion : partout, la culture précoce nous avait démontré l'absence de B. Coli et les contrôles ne démentent en aucun cas le premier diagnostic posé. Il est intéressant de remarquer en passant l’action nettement favorisante des composants du milieu de Besson (et très probablement du glucose) sur la pousse d’une flore spéciale de germes à morphologie coccobacillaire ayant comme principal caractère de coaguler fortement et rapidement le lait.
Le Besson nous a donné deux réactions entièrement positives (100 et 10) alors que le germe en cause n’était pas un B. Coli.
SII
Nous n’avons que peu l'expérience des procécés à l’eau peptonée lactosée — tournesolée ou non — ia séule comparaison que nous ayons faite (exp. n° 2) nous donne un résultat de 10 Coli, alors que nous en isolons 500. Par contre, sur une eau ne contenant pas de Goli, ce procédé donne aussi un résultat négatif.
Cette propriété de fermenter le lactose avec dégagement de gaz ne semble pas constante chez les B. Coli des eaux.
Remarquons comme, dans les vérifications ellesmêmes, elle est souvent absente ou se manifeste incomplètement.
N'oublions pas non plus qu’elle est loin d’être
Se 7h NES
spécifique du Colibacille. Un tel procédé, basé à la fois sur une propriété inconstante d’une part et non spécifique d’autre part, ne saurait, à notre avis, être
retenu.
