mgr. d'azote, correspondant à la même erre I n'est

d'ailleurs g. re possible d'évaporer le résidu de la distillation

du dosage VIE, attaquer par l'acide sulfurique et distiller avec la soude sans s'exposer dans une operation si longue à une perte légère. En tou’ as, je ne pense pas que la différence observée puisse être attribuée à une décomposition de l'urée dans l'opération VIE. Cette décomposition, si mème elle était serait d'ailleurs de l'ordre des erreurs de lecture et

prouvée, ait être considérée comme nuisant à

si infime qu'elle ne pourr l'exactitude du dosage (2).

(4) Au lieu de la somme de Let HE, qui est de 96,6 + 14,7 = 111.3. (2) Cette méthode, étudiée par moi en RO. a été utilisée pour les reeher-

ee ton un à 2) riens era

a tnt dés

En ‘ue

Recherches faites avec l'urée

Si la levure utilise de préférence somme aliments azotés Les corps capables de se transformer facilement en dérivés ammoniacaux, elle doit pouvoir se développer aux dépens de Furée, qui subit si aisément Fhydrolyse en donnant du carbonate d'ammonium.

Les seules données expérimentales qui existent sur ce sujet sont celles de Maven Diet de Benenner 2). Le premier 5Jmet que Purée peut servie d'aliment à la levure, bien que la fermentation obtenue soit trés lente: Le second pense qu'elle n'est pas utilisable par ce végétal, D'autre part, Pasrecr avait montré que Palbumine ne convient pas à La levure en vie anaérobie, Mayen trouvant, au contraire, que le sérum sanguin permet la fermentation. Les aliments azotés seraient done parmi les matériaux dialvsabtles du sérum :eest justement Furée qui en forme la partie priucipale 0 gr, 15 à 0 gr. 30 par litre).

La question devait done être reprise en entier, J'ai fait d'abord une expérience préliminaire, disposée comme suit

On dissout dans 500 à 600 ce. d'eau 100 grammes de slucose, grammes de phosphate bipotassique, Leranmme de sulfate de magnésium, 2 grammes d'acide tartrique, en chauffant légèrement: Le liquide bien refroidi est additionné de 4 gramme durée, ie volume complété à 1 litre. On filtre à la bougie et on recoit dans un ballon d'environ 1.500 ce. puis on ensemence

avec une petite quantité de levure pure (cette quantité n'a pas

ches qui vont étre exposées ici dès le début de 1899. Je dois laure remarquer que pendant l'exécution de ces expériences, NENGRI et ZALESkI on publié une méthode de dosage de Fammoniaque, basée sur le même principe el applicable à Fétude du sang et des tissus (Zrits. physiol Chemie, L. 33, pe 19% 1901, L'appareil que j'ai ciiplove à Favantage d'une grande simpliile el permet d'utiliser Le serpentin de Senasisé At 8ix qui existe dans tous les laboratoires

(1) A. Maven. Lntersuchunqen 4. d. alkool. Gührung (ASG9). Cité par Décraux, lraité de Microbiolouie. 1. 3. p. 20.

(2) Beuerixek. Centralhl f. Bakter., LA p.68 (ISO2).

en

été déterminée, mais elle ne dépassuit certainement pas dur. 05 à Fétat sec). Le ballon est placé à Fétuve à 25",

Dans ces conditions, li fermentation est tres lente else poursuit pendant des semaines: a quantité de levure parait aus menter assez peu. Apres 45 jours, le liquide à été examiné:

voiei des chiffres trouves:

\vunl \pres tepmentation lermentation Glucose, : O3 ur llur. 77 Alcool. . ’ nee, \eide acétique. ' Our. 643 Urée, : ET Al Lyr. 0 Pur. 0501) Aote total du liquide üur. tte ur. UM) Wzote total de la levure Our. 0066 ” Our. 120

Poids de levure formée

H S'est done formé peu de levure, dont la teneur en azote était de 5,18 P: 100 : La consomimation de Purée nacte que de Our, 030, soit 1 36 de la quantité presente, Fajoute quil ne S'étuit pas fait d'azote ammoniaeal décelable dans Le Hquide fermenté, Néanmoins, la plus grande partie du sucre à été transformée en alcool.

Ce résultat, assez peu encourageant correspond aux donnces anciennes, Mais il faut remarquer que. dans l'expérience précédente, Fépaisseur du liquide était considérable Lil parait done indiqué de recommencer en mettant le liquide en couche mince et en opérant dans des conditions d'aération qui puissent favo viser Le développement de la levure végétal.

Une solution contenant 10 p. 100 de glucose, 0,25 pr 100 de phosphate bipotassique el 0.05 p 100 de sulfate de magnésium est additionnée à froid d'une solution durée de manière à ce que la teneur du milieu en urée soit d'environ {gramme par litre, On stérilise la solution par filtration à li bougie et on lintroduit aseptiquement dans des ballons à fond plat. où le

liquide occupe une épaisseur d'environ 2 à 3 centimetres, cha-

(1) Ces chiffres ont été déterminés ga7omt triquement à Ps pobromite par

comparaison avec une solution durée titrée à 1 p. 1000. Les quantités sont

rapportées au volume total de 1.000 ce.

que ballon contenant exactement 300 ce. de milieu. Le dispositif adopté est représenté (fig. 2) : le liquide filtré est reçu dans un ballon répartiteur contenant 300 ce. entre les deux traits de jauge. Après avoir isolé ce ballon au moyen d'une

pince placée sur le caoutchouc, on peut procéder commodé-

ment à la répartition. L'appareil tout entier est stérilisé d'une

seule pièce à l'autoclave (D

Fig. 2. — Dispositif de filtration et de répartition.

L'ensemencement est fait avec 10 ce. exactement mesurés d'une émulsion de levure pure dans Feau stérile, rendue bien homogène par lagitation (voir p. 20). Chaque ballon à reçu ainsi 19 ce. de liquide contenant 0 gr. 0382 de levure, séchée à 105%. et 4 mgr. 09 d'azote, sans trace d'ammoniaque.

Voici les chiffres obtenus avant et après fermentation, rapportés à la totalité du volume d'un ballon :

(1) La composition du liquide filtré n'étant pas la même au début et à la fin de la tiltration, il est nécessaire de mélanger avant de répartir, pour éviter des erreurs dans les expériences comparatives.

Jémoin .

Après 14 jours Après 19 jours

Aucun ballon ne renfermait d'azote ammonti néanmoins da levure

Glucose présent

er.

PAR der Poids Alcool de levure formé séchée ce. gr » 0,0382 BAL 0,2440 8.3 0,3116

La fermentation à été assez lente :

emprunté à l'urée représente 1.20 de la quantité présente.

La méme expérience à été refaite, mais avec des ballons Lenxsaca dont le fond posséd de liquide (dont le volume restait le même,

pas plus de 1 centimètre d'épaisseur.

On a trouvé :

Témoin

Après 3 jours Après 6 jours Après 9 jours

Aucun ballon n la fermentation est plus rapide que dans lexpé-

On voit que

rience précédente s atteint presque cette la fermentation précédente. Le poids de levure obtenu représente à peu près 9 fois la quantité ensemne peu plus riche en azote et elle Lt milligrammes d'azote, au minimum, allant ainsi jusqu'à 1/13 de la quantité présente.

I va donc amélior

imparfaits.

Glucose

présent er.

Alcool formé

Poids de levure séchée

gr.

Auote de ia levure

gr 5,09 (1) 7,70

Azole de la levure

mer

Azote 0 0

de La levure

al.

Azole O 0

de la levure

e contenait trace d'ammoniaque.

Azote total du liquide

mur.