ACTION DE LA CHALEUR SUR LA TOXICITÉ DES LIQUIDES DE CULTURE

En étudiant quelques-unes des propriétés du poison produit par l’Aspergillus fumigatus et en particulier sa façon de se comporter vis, à vis de la chaleur, des précipitants, etc., il sera possible de connaitre les affinités du principe toxique.

On a déjà vu, au cours de ce chapitre, que la chaleur exerce sur la toxine de l’Aspergillus fumigatus une action entravante ; mais pour être définitivement fixé sur la résistance du poison aux températuresélevées, il est nécessaire d’avoir recours à des expériences plus concluantes. A cet effet, les liquides reconnus toxiques et destinés à recevoir l’action de la chaleur, ont été soumis, soit à destempératures variées pendant des temps égaux, soit à une température constante pendant des temps de chauffe différents. Les liquides sont ensuite inoculés au lapin ou au cobaye à des doses qui les tuaientsürement, avant que le liquide ait subi l’action de la chaleur, Les résultats obtenus sont consignés dans les expériences qui suivent :

en ET Un

Expér. XL. — Un liquide d'une culture de 20 jours est chauffé à soixante degrès au B. M. pendant trois quarts d'heure. On en injecte 10 c.c. à un cobaye; au bout de 15 minutes environ l'animal est atteint : il présente les accidents graves habituels. Le tremblement général prédomine surtout, ainsi que la paralysie du train postérieur ; il y a quelques convulsions, mais elles semblent moins violentes qu'avec la toxine non chauffée, Le lendemain le cobaye est rétabli.

Expér. XLI. — Un cobaye reçoit 12 c.c. 5 du même liquide chauffé à soixante-dix degrés pendant 3/4 d'heure; les accidents classiques se manifestent encore, et avec autant d'intensité que pour le cobaye précédent. Le lendemain, l’animal est revenu à son état normal.

ExpPér. XLII. — Un cobaye reçoit 10 c.c. 7 du même liquide chauffé à quatre-vingts degrés pendant 3/4 d'heure. Il est atteint au bout de 25 minutes de la même façon, et avec autant d'énergie que les précédents.

Expér. XLIII. — Un autre cobaye reçoit 12 c.c. 5 du liquide précédent, chauffé à quatre-vingt dix degrés, pendant 314 d'heure. Durant la première heure, l'animal a le poil un peu hérissé, mais on n’observe pas de tremblements ; il reste ensuite blotti dans un coin de sa cage sans présenter aucun phénomène convulsif.

Ces expériences semblent indiquer que le poison est nettement altéré par 3/4 d'heure de chauffe à quatre-vingt dix degrés. Est-il complètement détruit ? On ne saurait l’a‘firmer, car le cobaye de l’expérience précédente (XLIIT) n’est pas absolument normal à la suite de l’inoculation ; avec une dose plus élevée, il est permis de penser que d’autres accidents se seraient produits. Tout ce qu'il est possible d'affirmer ici, c’est que dans les conditions de l'expérience XLII, le poison de l’Aspergillus fumigatus n’a plus d’action tétanisante ou paralytique sur le cobaye.

Voici maintenant des expériences qui prouvent qu’à des températures plus élevées que précédemment, le liquide perd assez peu de sa toxicité lorsque le temps de chauffe est réduit.

Expér. XLIV. — Un liquide d’une culture de 20 jours est chauffé à 100° pendant cinq minutes; inoculé à un cobaye à la dose de 10 c.c., il détermine chez cet animal, au bout de trente minutes, des accidents violents.

Exrér. XLV. — Un cobaye reçoit 20 c.c. du même Jiquide chauffé à 140° pendant dix minutes. Dans les deux heures qui suivent l'injection, on observe un peu de tremblement, mais pas de tétanos ni de convulsions ; le lendemain l'animal est parfaitement normal.

Expér. XLVI. — Un cobaye de 330 gr, reçoit 20 c.c. du même liquide chauffé pendant trente minutes à la température de 120°, L'animal ne manifeste aucun tremblement, ni soubr:ssauts, ni mâchonnements : il est aussi alerte qu'avant l’inoculation:

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Ces dernières expériences établissent que le temps de chauffe est un facteur important dans l’atténuation de la toxicité des liquides de culture ; il a autant d'influence que l'échelle de la température. C’est ainsi qu'un liquide toxique chauffé trois quarts d’heure à 9)° est aussi inoffensif que s’il avait été chauffé 30 minutes à 120°.

L'inoculation intra-veineuse au lapin, de toxine chauffée, permet de constater mieux encore, l’action entravante de la chaleur sur le poison, car l’animal ainsi que le mode d’inoculation choisis donnent plus de sensibilité à l'expérience.

Expér. XLVIIL — Un lapin de 2 kil. 780 reçoit dans les veines 24 c.c. 5 du liquide d'une culture de 20 jours, chauffé à 100° durant 20 minutes. On n'observe chez l'animal ni tremblements ni parésie, ni contractures ou convulsions ; seulement un peu d’anxiété et d’'hyperexcitabilité ; peu à peu, il redevient absolument normal ; cependant qu'un témoin inoculé avec une dose comparable de liquide non chauffé meurt dans la nuit, après avoir présenté tous les accidents habituels.

Expér. XLVIII. — Un lapin de 2714 gr. reçoit 14 c.c. du même liquide chauffé 45 minutes à 90°. On ne constate, après l’inoculation, qu'un peu d'hyperexcitabilité, de la fréquence de la respiration et de l'anxiété, mais pas de tremblements. Au bout d’une heure, l'animal est revenu à son état normal.

ExPrér. XLIX. — Un lapin de 2700 gr. reçoit dans les veines 14 c.c. de liquide chauffé à 85° pendant 45 minutes, et provenant d’une culture de 20 jours. Au bout de 5 minutes, on remarque un peu de tremblement et d'hyperexcitabilité musculaire ; puis, ces symptômes s’atténuent et s’effacent ; quatre heures après l’inoculation, l'animal est revenu à son état normal.

Ainsi, les températures de 100°, 90° et même 85°, quand le temps de chauffe à été suffisamment prolongé, atténuent considérablement la toxicité des liquides de culture ; cependant, il persiste encore quelques légers troubles qui sont l'indice de traces du poison non entièrement détruit.

ExPér. L. — Enfin, le liquide chauffé à cent vingts degrés pendant 30 minutes a été inoculé à un lapin de 1950 gr. qui en a reçu la dose considérable de quatre-vingt-dix c.c.en une seule fois. Au début, et pendant une demi-heure, il présente un peu d’anxiété et de très légers tremblements, puis l'animal se remet, et l'on n'observe plus chez lui qu’une légère fréquence de la respiration qui ne tarde pas d’ailleurs à disparaitre.

À la température de 120 et avec un temps de chauffe de 30 minutes, il semblait que le poison était détruit ; le cobaye de l’expérience XLVI n'avait présenté aucun symptôme avec 20 c.c. inoculés dans les mêmes

conditions. On vient de voir que le même liquide inoculé à haute dose, produit des troubles nets et bien perceptibles chez le lapin, espèce animale plus sensible,

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Îl résulte donc de cet ensemble d'expériences que le poison de l’Aspergillus fumigatus est d’une nature telle, qu’il oppose à l’action destructive de la chaleur une résistance considérable. Cependant, il parait à peu près complétement détruit après 30 minutes de chauffe à 120°, et l’on a vu qu’au voisinage de 85° le chauffage suffisamment prolongé altère singulièrement la substance toxique au point de la rendre aussi inerte qu'un chauffage à 120°, mais de durée moindre.

La destruction de la toxine me semble réalisée ici, bien plus par le fait d’un chauffage prolongé que par celui d’une température élevée ; elle paraît, en cela, d’un ordre tout différent de celui des toxines propre- ment dites.

Le tableau suivant, résume en les comparant, les résultats obtenus dans les expériences précédentes.

= | Espèce foulée Dose Température] Temps SE de liquide du de Symptômes observés = À ét poids inoculée | chauffage | chauffe

4 | 1830 gr. lapin AOcc 1100 | 15 minutes un peu d'anxiété

40 280 gr. cobaye, 10cc GQo 45 — | q.q. convul.et paralysie 4 SAT gr. — 49e 5 70° 45 — id.

42 300gr. — 40cc 7 80° 45 — id.

43 348 gr. — 49e 5 90° 45 — un peu d'anxiété

44 300 gr. — 40° 100 5 — accidents graves

45 300 gr. — 2Pee 1100 10 — | un peu de t'emblements 45 330 gr. — 20cc 1200 30 — rien en apparence

47 2780 gr. lapin 2% 5 | 1000 |20 — Jun peu d'hyperexcitabilité 48 | 2714gr. — Acc 85° 45 — id.

49 | 2700gr. — A4ec 90° 45 — un peu d’excitabilité 50 | 1950gr. — QE 1e 1006 UE anxiété et très légers

tremblements

Cette façon de se comporter vis-à-vis de la chaleur, éloigne sensible-

ment la toxine aspergillienne des toxines vraies ; et ce que l’on vient d'observer suffirait déjà, semble-t-il, à l'éloigner définitivement du groupe des toxines proprement dites, si l’on ne savait que la résistance à de hautes températures est partagée par quelques-unes de ces dernières. Cela m’a conduit à examiner si le poison aspergillien ne partage pas quelque autre propriété des toxines vraies ; par exemple

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celle d’adhérer fortement aux précipités colloïdaux provoqués dans leur solution ; ce qui revient à tenter l'isolement du principe toxique,

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