CHAPITRE V

Réaction du type oxydasique.

A mesure que des recherches de plus en plus nombreuses et approfondies nous ont mieux fait connaître les diastases, le nombre de ces dernières s'est considérablement accru.

Dans le groupe des ferments oxydants en particulier, dont on s'est tant occupé ces dernières années, on a mis au jour des faits nouveaux qui ont imposé un classement des nombreuses substances à réaction oxydasique, classement quelquefois remanié. Aussi, devient-il quelquefois difficile en l'état actuel de la question, et devant la diversité des substances à réaction oxydante, de se prononcer sur la valeur et la place d'une réaction de ce genre. Les recherches de Linossier, Carnot, Dupouy, etc., sur les pouvoirs oxydants de divers liquides de l'organisme, montrent bien avec quelle prudence et quelle réserve les résultats d'observations de cette nature doivent être rapprochés de ceux, bien typiques, que présentent les oxydases vraies.

J'ai été conduit, dans l'étude des champignons pathogènes objets de ce travail, à observer une réaction de nature oxydasique présentée par leurs liquides de culture. Cette réaction se manifeste dans des conditions spéciales, mais assez bien définies pour permettre de caractériser la nature de la réaction, et de préciser la mesure dans laquelle elle peut être rapprochée des réactions oxydasiques types.

J'ai remarqué que les liquides de culture de divers champignons pèLVSLSites/Aspergillus pathogènes, Trichophyton, Achorion^ MicrosporumJ donnent en présence de traces infinitésimales d'un sel de manganèse (chlorure, sulfate ou autre sel) les réactions des oxydases, et seulement dans ces conditions^

Voici les expériences qui m'ont amené à faire cette constatation.

Si, à cinq cent, cubes environ d'un liquide de culture, d'Aspergillus fumigatus par exemple, — soit le bouillon glucose peptonisé ou glycérine peptonisé, soit le Raulin, — on ajoute deux à trois gouttes d'une solution d'un sel manganeux à 1 p. 1000, puis, qu'après avoir bien effectué le mélange, on introduise un peu de teinture de gaïac, on observe que l'éaiulsion produite, bleuit rapidement. La coloration apparaît immédiatement et augmente peu à peu d'intensité. Pourtant elle n'est pas franchement bleue comme celle que l'on obtient avec les oxydases végétales ; elle reste un peu verdâtre. Gela tient en partie à la coloration jaunâtre du liquide primitif, car avec le liquide de culture soumis à une décoloration préalable, la couleur obtenue est d'un bleu plus franc.

La même coloration se produit encore très nettement avec une seule goutte de la solution manganique ; ce qui représente une proportion d'environ 2 p. 100.000 du sel de manganèse employé. La réaction colorée a encore lieu avec quelques gouttes d'une solution manganique à 1 p. 10.000 et on la perçoit encore nettement, quoique affaiblie, avec quelques gouttes d'une solution à 1 p. IcO.OOO. La coloration bleue verdâtre de l'émulsion de gaïac est assez fugace ; au bout de 5 à 6 heures, elle est en voie de disparition.

En mélangeant le liquide de culture avec une solution aqueuse à

1 p. 100 d'hydroquinone, on obtient une belle coloration rose du mélange, qui fonce peu à peu, devient écarlate, puis rouge vineux au bout du deuxième jour. Avec une solution d'acide pyrogallique à

2 p. 100, la coloration obtenue est d'abord jaunâtre ; elle s'accentue et devient peu à peu rougeàtre.

Lorsque ces réactions sont conduites ainsi que je l'ai fait, dans des ballons fermés à la lampe, au sein d'une atmosphère limitée par conséquent, on remarque qu'il se produit un vide partiel dû à la disparition d'une partie de l'oxygène intérieur qui a servi à l'oxydation du principe phénolique.

Le mycélium lavé à l'eau distillée, et mis à macérer dans de l'eau glycérinée pendant deux jours, concède au liquide de macération la propriété de donner la même réaction colorée que le liquide de culture, et souvent même avec plus d'intensité.

Le tableau suivant résume comparativement, les résultats que donnent avec la teinture de gaïac : 1^ le liquide de culture^ 2' te liquide de macération*