INFLUENCE DE L'AGE DES CULTURES

Je devais aussi m'arrêter à rechercher le temps de végétation nécessaire pour que la toxine soit décelable dans les liquides de culture. Pour cela, les liquides des cultures de divers âges préparées dans des conditions identiques, ont été inoculés à doses égales. On sait déjà à quoi s'en tenir sur les cultures de 13 jours, et au delà ; voici quelques indications pour les cultures d'âge inférieur à 13 jours.

ExpÉR. XXXVI. — Un cobaye de poids moyen reçoit sous la peau. 15 ce. d'un liquide d'une culture de cinq Jours ; ce liquide est très acide. L'animal ne présent^. rien d'anormal. Un autre cobaye reçoit la même quantité d'un liquide de culture de six Jours sans manifester le moindre trouble. Avec 15 ce. d'un liquide de sept Jours, un nouveau cobaye ne présente encore' rien d'anormal.

Enfin, un liquide provenant d'une culture âgée de dix Jours, inoculé à un cobaye, toujours à la dose de 15c.c., provoque Tapparit'on de tremblements bien accusés avec quelques phénomènes tétaniques et paralytiques. A ce moment, le liquide de culture est alcalin.

Relativement à l'âge des cultures, ces expériences permettent d'affirmer que, sur les milieux peptonisés à 1 p. 100 et glucoses à 3 p. 100, la toxine apparaît vers le 10« jour, (la végétation s'effectuant à 30°) capable de provoquer chez le cobaye l'app.irition de symptômes d'intoxication très nets. Enfin, on a vu qu'au 14<îjour elle était mortelle pour le cobaye de poids moyen, à la dose de 10 ce. ; et qu'elle tuait le lapin à la dose moyenne de 5 ce. par 1000 gr. d'animal.

. Mais, je crois devoir faire remarquer à nouveau, que l'absence de toxine dans les liquides des cultures de moins de neuf jours, n*est que relative ; et qu'il ne faut pas perdre de vue que la dose injectée, ainsi que le choix du sujet d'inoculation, sont des facteurs importants dans

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la mariifestalion du pouvoir loxique. Une méthode d*expériehô'e ^ui permettra de condenser le pouvoir toxique dans un faible volume de liquide à Inoculer, sera déjà par là-même, capable de plus de précision et de sensibilité que celle dont je me suis servi.

Ayant présentes à l'esprit, toutes les causes qui influent sur l'apparition de la toxine aspergillienne dans ses liquides de culture, et étant donnée la réceptivité des divers animaux à Tégard de cette toxine, il devient aisé maintenant de s'expliquer, comment l'existence ^'un poison causant des symptômes aussi nets et aussi graves, a pu échapper aux savants expérimentateurs qui ont étudié VAspergillus fumigntus.

L'anomalie présentée par le pigeon, suffit déjà en grande partie à expliquer les insuccès de Kotliar, de Rénon et de Macé. Ils avaient pensé, et cela semblait très rationnel, que l'animal qui présentait la plus grande réceptivité aux spores du champignon, devait également, être sensible à sa toxine. Cette déduction ne se trouve pas confirmée, ainsi que je l'ai montré.

Les cultures peu âgées (5 jours), que certains ont employées, les faibles doses (1/2 ou 1 ce.) parfois inoculées, le moût de bière utilisé comme milieu nutritif, ont également contribué pour une grande part aux observations négatives, même lorsque l'animal expérimenté appartenait à une espèce sensible.

Pourtant, j'ai fait remarquer que Lucet expérimentant sur le lapin avec deux cent, cubes d'un liquide, de culture sur Raulin, avait réussi à constater des phénomènes thermiques. Nul doute qu'avec des doses plus considérables il eût constaté, comme je l'ai fait, des troubles graves qui l'eussent renseigné sur l'existence certaine d'une toxine.

Quant à l'activité de ce poison, elle peut paraître faible, comparée à celle des toxines bactjériennes, mais il faut remarquer que le poison est ici en solution très diluée, et mélangé à d'autres produits solubles étrangers, diastases, pigments, déchets organiques, etc. ; enfin, que les liquides de culture employés ne sont peut-être pas encore les meilleurs au point de vue du rendement en toxine.

Si l'on évapore un liquide de culture, mortel pour le lapin, à la dose de 5 ce. par kil. d'animal, on obtient un résidu, dont le poids après dessication, est de gr. 007 par cent, cube, et dont la toxine ne représente qu'une faible partie, impossible jusqu'ici à déterminer. Cela suffit à montrer qu'il s'agit en réalité, d'un poison plus actif qu'on ne pouvait le penser tout d'abord. D'ailleurs, des recherches surTisolementdù poison, qui sont actuellement en cours, permettront d'abaisser la dose mortelle»

En indCulatioris intra-veineuses, j'ai observé que la toxine agît plus rapidement qu'en inoculations sous-cutanées ; mais j'ai remarqué aussi que la dose mortelle est en même temps abaissée, ainsi qu'il ressort des expériences suivantes :

ExpÉR. XXXVIÏ. -— Un lapin de 1790 gr. reçoit dans les veines quatre ce. d'un liquide d'une culture de 16 jours. Eq cinq minutes, l'animal est pris des accidents habituels, violents. Il meurt dans la nuit.

ExpÉR. XXXÏI. — Un lapin de 1340 gr. reçoit deux ce. et demi du même liquide ; il est pris rapidement de tremblements avec paralysie très nette des membres ; le tétanos est peu accusé, et l'animal se remet peu à peu.

ExpÉR. XXXIX. — Un lapin de 1250 gr. reçoit un ce. do même liquide dans l'appareil circulatoire ; en cinq minutes, il est pris de tr<*mblements et de parésie, mais ne présente pas de crises tétaniqu'^s ; l'animal se remet ensuite. Une fois rétabli, ce même lapin reçoit dans la soirée, dcuir ce du liquide précédent ; il est presque aussitôt pris de tremblements et de violents accès tétaniques entrecoupés de convulsions et de paralysie. L'animal meurt dans la nuit.

On constate ainsi, que par voie intra-veineuse, la dose mortelle pour le lapin est voisine de 2 ce. par lOCO gr. d'animal. Avec moins (Vun cent, cube, les symptômes sont encore très accusés.