II. — INTERPRÉTATION DES DONNÉES D'ÉLEVAGE

a) Durée du développement parasitaire de Symbiocladius. — Le tableau XIII nous permet de lire comparativement la durée des stades successifs du développement postembryonnaire de l’ectoparasite dans la série des cas obtenus en élevage. Il est à remarquer tout d’abord, que la durée totale du cycle varie notablement avec le moment de la prise de possession de l’hôte : elle est de 32-51 jours si la contamination est précoce (N°S 1-4) et pas plus de 20-23 jours si celle-ci est, par contre, tardive (N°S 5-10). Sur les Rhithrogena (N°%S 13-15) infestées de bonne heure, Symbiocladius fait son évolution complète en 37-53 jours, chiftres comparables au premier cas distingué ci-dessus. Ces données d’élevage ‘accordent en général avec nos connaissances sur la succession des

s générations d’été du Chironomide parasite dans la nature (p. 31).

Tagzeau XIII. — Durée du développement de l’ectoparasite suivant la taille de ses deux hôtes, en élevage.

Heptagenia lateralis Symbyocladius rhithrogenae

= 2 A «2 a DURÉE EN JOURS

2 el E 2 | È 2 | b 2 e DES STADES LARVAIRES DURÉE EN JOURS Nes m | ££ a lan me Ë a% Ë 46 | a SEA | 4 |S4$ 483 2p4 s8 | à a .Hela 8 |ag| à |ESslerRs sers Bel Ad lE +10 B4 | .S |gEg SA Sad) of TT TE TRS ES RE AN VE San seu ñE [Ada £e ANNEES EM ae 1Q) 8-u 63 4,5 | 4 6 Q 19 ail 8 10 3 32 51 2; Q 7-u 2 4,5 4 6 (Gi 12 6 13 10 8 32 44 3| © 2,5 7-u 4 4,5 2 5 d' 15 3 4 9 4 2) 35 4 NOIRS 6-u DOME RE RON 5 4 7 3 19 32 5| & | 5 4-u 0 |5-5,5| 2 6 C' 5 3 2 8 3 16 21 6| © 5 4-u 1 5,5-6 £ 6,5 @i 4 4 2 8 3 17 21 2 QUES in 0 |5,5-6| 3 FAT RC 4 3 5 8 4 19 23 8| Q 6 4-u 1 6-6,5 2 {l (Gi 6 4 8 8 3 18 24 IRC 6 3-U. 0 6,5 2 7 Q 4 4 3 8 4 19 23 101" ©MNE 3-u. 0 |6-6,5| 2 7 ci 3 3 3 7 4 17 20 Rhithrogena semicolorata

131. 4 9-u. 3 5 5 6 e; 20 13 7 8 5 33 53 14| © | 5 7-u. 1 5 5 6,>AMNONIO 10 12 8 4 34 44 15| © | 4,5 | 6-u. 1 5 4 6/5 NON TO ñ 8 9 3 27 37

CHIRONOMIDE CANCÉRIGÈNE 129

En considérant la durée de chaque stade à part, on trouve! : 3-4 jours de vie nymphale; 7-10 jours, le plus souvent 8, pour le IVe stade larvaire ; 2-3-5 jours, mais parfois aussi 7-13, pour chacun des stades larvaires III et IT; enfin, 4-6 jours pour le Ier stade larvaire sur les hôtes contaminés tard et d'autre part, 10-20 jours sur ceux parasités tôt. Il est clair que la durée de la phase nymphale et celle du IVe stade larvaire sont indépendantes de l’âge où l'Éphémère fut infestée, facteur qui en revanche, peut influer sur la durée des stades larvaires III et IL, et qui décide toujours de la longueur du stade I. C’est donc la durée du Ier stade larvaire qui fait principalement varier la durée totale du développement de l’ectoparasite en fonction du moment de la contamination de l'hôte. La preuve est, qu'en retranchant la durée du stade I de celle du cycle entier, on obtient (N9S 3-10) une valeur stable de 16-20 jours pour tout le reste de l’évolution parasitaire.

Comme les parasites étaient déjà en place quand ils furent récoltés, la durée de leur Ier stade larvaire est, en réalité, supérieure aux chiffres établis en élevage. Mais je ne pense pas, qu'il faudrait additionner ceux-ci de plus d’une huitaine de jours, soit l’équivalent d’un stade nymphal de l'Éphémère, intervalle largement suffisant à l'installation de la forme infestante. D'ailleurs sur les Heptagenia n° 5 et 6 où la durée du stade I esb comptée depuis la fixation de la larvule surnuméraire sous les fourreaux alaires, les chiffres trouvés ne s’écartent point de ceux concernant les hôtes n°5 7-10, dont le moment de la contamination m’échappe.

b) Taille de l'hôte, critique pour le passage du parasite au II stade larvaire. — Si la durée du Ier stade larvaire de Symbiocladius est d'autant plus longue que l’Éphémère est infestée à un âge plus précoce, quelles sont alors les conditions que doit remplir la nymphe-hôte pour que son ectoparasite puisse passer dans son IIe stade larvaire ?

Pour faciliter la réponse, comparons (fig. xvr, A-B) les deux graphiques représentant le développement de deux Symbiocladius de la même génération sur les Heptagenia n°% 3 et 10, récoltées ensemble le 5-VII-1932 et élevées dans le même cristallisoir. Ces Éphémères réalisent le plus fort contraste d'âge parmi les cas obtenus en élevage, la première ne mesurant que 2,5 mm. (7-u stade), tandis que la seconde avait 6 mm. de taille (3-u stade) au début de l’observation. En trois jours, l’ectoparasite

1. Chez Chironomus gregarius, espèce libre, PAUSE (1919, p. 364) note à 15-180 C, une durée de 11 jours pour chacun des stades larvaires I et IT, de 14 jours pour chacun des stades IIT et IV, enfin de 24 heures pour la nymphe.

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mue pour passer au IIe stade larvaire sur l’hôte d’âge avancé; par contre, il lui faut 15 jours pour aboutir au stade IT sur la très jeune Heptagenia, laquelle subit 4 mues dans cet intervalle, lui permettant d'atteindre une taille de 4,5 mm.

En parcourant maintenant, d’après le tableau XIIT, toute la série des sujets élevés, on voit que le Ier stade larvaire du Chironomide se prolonge

mm 1-U st.

---- croissance C : ET .

e mues Heptagenia 5 mel .

NN uw = «3

0 5 10 45 20 25 30 35 40 jours

G. XVI. Représentation graphique du développement corrélatif de Symbiocladius et de son hôte, en élevage; A, Heptagenia n° 3, infestation précoce à 2,5 mm. de taille (p. 123); B, Heptagenia n° 10, infestation tardive à 6 mm. de taille (p. 126); C, Heptagenia n° 11, infestation très tardive, à la veille de son dernier stade nymphal (p. 148). Développement de l’ectoparasite exprimé d’après les données de la croissance linéaire moyenne (p. 40); #, éclosion imaginale; /I-ZIV, stades larvaires I-IV de Symbiocladius; ny, nymphe; 1-u. st.-7-u. st, stades nymphaux d'Heptagenia, comptés à partir de l’ultième, selon la notation d’IDE.

toujours jusqu’à ce que les Heptagenia contaminées de bonne heure (N°S 1- 4) soient parvenues à une taille de 4,5 mm., qui coïncide invariablement avec le passage au stade IT de la larve parasite. D’autre part, sur les nymphes infestées au delà de cette taille (N°5 5-10), les Symbiocladius au Ier stade se développent rapidement, sans aucune attente. Quant aux Rlathrogena (N° 13-15), elles doivent s’accroître jusqu’à une taille de 5 mm., afin que leur Chironomide puisse entrer dans son II° stade larvaire.

On est ainsi amené à reconnaître une taille de l’hôte, critique pour

CHIRONOMIDE CANCÉRIGÈNE 131

le passage de l’ectoparasite au IIe stade larvaire; on peut préciser dès lors, que la durée du stade I de Symbiocladius est d'autant plus longue que la contamination est plus antérieure à ce seuil de croissance de l'Éphémère. A l’appui de cette notion, voici deux observations significatives :

19 Une nymphe & de Rhithrogena, longue de 4 mm., ayant une larve parasite au Ier stade sous ses ébauches alaires, fut suivie en élevage à 120 C, du 26-VI au 26-VIT-1933, quand elle mourut à l’occasion d’une mue défectueuse. Dans ce laps de temps, elle mua normalement quatre fois, à 7-8 jours d'intervalle, mais faute d’une nourriture suffisante, sa taille ne put dépasser 4,5 mm. Sur cette Éphémère dont la croissance s’est arrêtée au-dessous de la taille critique, le Chironomide demeura au Ie stade larvaire, 30 jours durant.

20 Sept jeunes nymphes d’'Heptagenia, pourvues d’une larve parasite au stade I, récoltées le 27-XI-1931, à Sinaïa, furent transportées ultérieurement à Cluj et maintenues à la température du laboratoire dans un cristallisoir, où quelques feuilles macérées de hêtre leur servirent plutôt d’abri que de nourriture. En les examinant le 9-I1-1932, je trouve trois hôtes de 6,5 mm. de long, dont deux porteurs d’une nymphe de Chironomide et un autre d’une larve transverse au IVe stade ; trois hôtes mesurant respectivement 4,8; 5 et 5,2 mm., parasités par des larves aux stades IT et IT; enfin un hôte 4, d’une taille de seulement 4 mm., qui de ce fait portait un ectoparasite encore au Ier stade larvaire, malgré le nombre considérable de 74 jours écoulés depuis la récolte. En conclusion, par suite d’une carence alimentaire empêchant l’Éphémère d’atteindre la taille critique, la durée du Ier stade larvaire de Symbiocladius peut se prolonger indéfiniment!.

Le seuil de croissance de l’hôte, critique pour le développement de l’ectoparas te, n'apparaît pas lié à un stade déterminé de l’évolution nymphale de l'Éphémère. La taille de 4,5 mm. correspond généralement au 7-ultième stade nymphal chez les femelles indemnes d’Heptagenia (tabl. XT); les mâles de la même espèce doivent l’acquérir à un stade un peu plus tardif; il existe des écarts en rapport avec la nutrition et le torrent d’origine. D’autre part, relativement au développement normal,

1. PANTEL (1910, p. 173) cite plusieurs conditions extrinsèques pouvant influer sur la durée du développement des larves entomobies de Diptères. Il constate notamment quand l'hôte est mal nourri, que la larve accélère sa maturation. Le comportement opposé de Symbiocladius tient sans aucun doute à ce que sa propre nutrition est redevable à un mode réactionnel très particulier de l’Éphémère-hôte (p. 235).

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la taille critique est réalisée nettement plus tard chez les Heptagenia parasitées, soit du 5- au 3-ultième stade (tabl. XIIT), ce qui prouve une réduction de la croissance sous l’influence de Symbiocladius (voir p. 154). Les Rhithrogena arrivent au seuil critique de 5 mm. vers le 8-ultième stade, lorsqu'elles sont normales (tabl. XII) et seulement entre le 6- et 5-ultième stade, lorsqu'elles sont infestées (tabl. XIII). Possédant une taille définitive supérieure à celle des Heptagenia, les Rhithrogena présentent un seuil critique plus élevé que les premières et l’atteignent à un stade plus précoce du développement. On remarque que, sur les nymphes des deux espèces, contaminées avant qu’elles aient la taille critique, le passage de l’ectoparasite au ITe stade larvaire, se trouve en partie retardé de par sa propre action sur le taux de croissance de l’Éphémère.

Les chiffres de 4,5 et 5 mm., établis comme tailles critiques respectives d’Heptagenia et de Rhithrogena, pour le développement larvaire de Symbiocladius en élevage, sont largement confirmés par les observations dans la nature.

19 Sur 31 Heptagenia infestées, longues de 2,5 à 4,5 mm., notées au triage de plusieurs récoltes, je n’ai trouvé que des larves parasites au Ier stade, n'ayant même pas leurs yeux déplacés pour annoncer l’approche de la mue.

20 Sur 62 Heptagenia, pourvues d’un Symbiocladius à la fin du er stade larvaire (yeux dans le prothorax) ou au début du IT, trois seulement mesuraient 4,5 mm., alors que toutes les autres avaient une taille plus grande, allant jusqu’à 8 mm. Il s'ensuit en même temps, que la plupart des contaminations ont lieu sur des nymphes ayant dépassé la taille critique.

30 Le même chiffre est aussi valable pour les Rhithrogena de France : sur 7 nymphes récoltées le 22-TX-1934 dans la Cumane (Isère), qui portaient des parasites à la veille de la première mue larvaire (témcin leurs yeux émigrés), il y en avait une seule longue de 4,5 mm., les autres mesurant 5 à 6 mm.

4° Pour la validité de cette notion, il importe que la taille finale des hôtes ne soit généralement pas inférieure aux chiffres de la taille critique. Dans le fait : sur 524 Heptagenia parasitées en fin de croissance, il n’y en a que 3 entre 4 et 4,5 mm. de long (voir tabl. XX); parmi 665 Rhithrogena au terme de l’évolution de leur parasite, aucune n’a une taille inférieure à 5 mm. (tabl. XXT).

L'étude histologique nous apprendra (p. 206) que c’est justement

CHIRONOMIDE CANCÉRIGÈNE 133

entre 4 à 5 mm. de taille, que les nymphes-hôtes commencent à avoir un tissu adipeux abondant et que c’est ce dernier qui conditionne l'intensité du processus réactionnel, aux dépens duquel se nourrit la larve parasite. Ainsi, le phénomène de la taille critique, se ramène à un état interne de l’Éphémère, indispensable à la nutrition larvaire du Chironomide.

c) Entrée de l’ectoparasite dans son IV® stade larvaire et dernière mue effective de l'hôte. — Suivons plus loin le développement de Symbiocladius, parallèlement à celui de son Éphémère. On s'aperçoit (graphiques, fig. xvI, A-B) que peu après l'entrée du parasite dans son IVe stade larvaire, l’hôte mue pour la dernière fois, de sorte que pendant tout le reste de l’évolution du Chironomide jusqu’à son éclosion, on n’enregistre plus aucune mue de l’Éphémère, qui à sa mort garde encore le sac vide du Symbiocladius. C’est cette dernière mue normalement accomplie par l’Éphémère parasitée, que je vais désigner comme sa dernière mue effective. Dans la série des cas élevés, on trouve que le passage de l’ectoparasite dans son IVe stade larvaire, précède de très près — quelques heures à deux jours — la dernière mue effective de la nymphehôte.

Quelle est la taille des larves de Symbiocladius au moment de la dernière mue effective de leurs Éphémères? Ne pouvant pas mesurer les parasites à élever, pour ne pas compromettre leur développement ultérieur, c’est sur d’autres exemplaires prélevés rigoureusement au même moment, que j'ai fait les mensurations. Le tableau XIV indique la variation de la taille de 10 Symbiocladius pris sur des Heptagenia et de 17 Symbiocladius sur des Rhithrogena, lors de la dernière mue effective

TaBLeaAu XIV. — Taille des larves de Symbiocladius lors de la dernière mue effective de l’hôte, comparativement à celle du début et de la fin de leur IVe stade sur Heptagenia et Rhithrogena.

Symbiocladius IV® STADE LARVAIRE LONGUEUR ToeS DE DÉBUT DE LA DERNIÈRE MUE FIN, CC FIN, O9 © re EFTECTIVE DE L'HÔTE Heptag. Rhithr. Heptag. Rhithr. Heptag. Rhithr. Heptag. Rhithr.

Minimum, ...... 2,16 2 2,10 2,10 4,60 4,54 5,41 5,12 Maximum...... 2,78 2,78 3 3,58 5,20 5,20 6,41 6,25 Moyenne... .... 2,42 2,32 2,43 2,82 5,02 4,90 5,82 5,64

134 R. CODREANU

de celles-ci. Comparons ces chiffres à ceux déjà connus de la taille du Chironomide au début et à la fin du IVe stade larvaire, dans les deux sexes, en Roumanie (voir tabl. IV et V).

Il est évident que l’accroissement de l’ectoparasite depuis le commencement de son IVe stade larvaire jusqu’à la dernière mue effective de l'hôte, est tout à fait insignifiant : en moyenne 2,4 mm. sur Heptagenia et 2,8 mm. sur Rhithrogena, relativement à une taille initiale respectivement de 2,4 et 2,3 mm. Donc, la croissance considérable dont s’accompagne le IVe stade larvaire ainsi que toute la métamorphose de Symbiocladius, n’ont lieu qu’après la dernière mue effective de l'Éphémère. Cette corrélation est absolument constante, quelle que soit la modalité de la contamination, avant ou après la taille critique de la nymphe-hôte. Bien plus, quand l’Éphémère atteint très tôt sa taille critique (exemple, Heptagenia n°5 1-2, Rhithrogena, n°5 13-15), c’est du fait de cette corrélation que la durée des stades larvaires IT et III est exceptionnellement prolongée, étirant en quelque sorte le développement postembryonnaire du Chironomide (voir tabl. XIIT).

La question se pose alors de savoir, si le stade nymphal de l’hôte faisant suite à sa dernière mue effective, est un stade déterminé du développement, le même chez toutes les Éphémères parasitées et par là décisif pour l’évolution finale de l’ectoparasite; ou bien, si la corrélation observée est simplement un effet de l’action inhibitrice que Symbiocladius exerce à partir de son IVe stade larvaire, sur les mues ultérieures des hôtes, surpris à des stades variables ? Cherchons la solution, en examinant d’abord, ce que deviennent les Éphémères parasitées.

d) Suppression de la métamorphose et mort de l'hôte. — Sans exception, après l’éclosion de leur Symbiocladius, les Éphémères sont incapables de se métamorphoser et meurent à l’état de nymphes aquatiques, marquées par le sac vide du Chironomide. Je me suis rendu compte de ceci, avant même d’avoir entrepris l'élevage complet des Éphémères parasitées (CODREANU 1930 b).

Jusqu'au début de son IVe stade, la larve parasite ne modifie pas le rythme des mues de l’hôte. Il ressort du tableau XV, que les Heptagenia parasitées muent tous les 4-7 jours et les Rhithrogena parasitées tous les 4-8 jours, de même que leurs congénères indemnes, à une température de 169-189 C (comparer aux tabl. XI et XII).

Par contre, entre la dernière mue effective et la mort des hôtes, on observe un intervalle très variable, en général notablement long, soit

CHIRONOMIDE CANCÉRIGÈNE 135

TABLEAU XV. — Durée en jours des stades nymphaux des Éphémères hôtes de Symbiocladius, suivies en élevage. T. moyenne eau : 160-180 C.