III. —— ÉDIFICATION DE LA TUMEUR MÉSOTHORACIQUE

Les formations néoplasiques, déclenchées par la présence du Chironomide ectoparasite, augmentent au fur et à mesure de l’évolution larvaire de celui-ci. Chez une Rhithrogena, longue de 8 mm., pourvue d’une larve de Symbiocladius au stade IT, elles sont déjà assez développées, pour amener le soulèvement de la région postéro-centrale du repli sous-alaire, d’où elles en ont gagné les côtés en direction antérieure (pl. X, fig. 115-116). Elles se présentent comme des amas basophiles irréguliers, partiellement collés aux lobes adipeux du sinus nourricier et reposant sur la musculature alaire. Elles possèdent la structure d’un syncytium, que d’étroites fissures parcourent dans tous les sens, le découpant en d'innombrables petits groupements, comprenant des noyaux très rapprochés, entourés de cytoplasmes homogènes et denses. Les noyaux vésiculeux sont parfois inégaux. Des figures caryocinétiques se rencontrent, tant à l’intérieur que sur les bords des amas syncytiaux (pl. VITT, fig. 95).

Le processus proliférant se poursuit activement, car près des anciennes plages d’une certaine importance, de nouveaux îlots ou traînées cellulaires naissent par la coalescence des macronucléaires, qui affluent de plus en plus dans le sinus sous-alaire. Au contact des productions néoplasiques, les nappes adipeuses et les couches obliques supérieures de la musculature alaire, subissent une dislocation progressive (pl. X, fig. 115-116). Il en résulte des cellules adipeuses ségrégées (pl. VIIT, fig. 104) et des débris musculaires, que le courant sanguin charrie et dépose à distance dans les espaces hémocoeliens. Les fragments musculaires, arrondis et nucléés (fig. 103, pl. VIII) sont comparables aux caryolytes (BERLESE) provenant de l’histolyse des muscles pendant la métamorphose des Insectes holométaboles (voir HENNEGUY 1904, p. 584). La destruction des muscles appelle un afflux de micronucléaires qui, eux seuls, se chargent d’inclusions phagocytaires et aboutissent parfois à la formation de nodules leucocytaires.

Lors du IIIe stade larvaire de Symbiocladius, les formations néo-

208 R. CODREANU

plasiques, en plein accroissement, continuent à élargir le repli sousalaire, dont elles comblent la lumière sur tout son trajet et de là, elles s'étendent antérieurement, latéralement et en profondeur assez loin dans le mésothorax (pl. XI, fig. 121). Dans les points périphériques du sinus nourricier, le fusionnement des macronucléaires, très nombreux et en division mitotique, engendre constamment des ébauches syncytiales, reproduisant le mécanisme néoplasique initial. En même temps, le processus tumoral progresse par infiltration des lobes adipeux, qui existent normalement dans la région paracardiale et sur les côtés du mésothorax. L’infiltration néoplasique marche de pair avec l’hystolyse des muscles obliques superficiels et l’atrophie des paquets musculaires longitudinaux profonds, ce qui lui ouvre la voie entre le sinus alaire et les nappes adipeuses latérales. Les macronucléaires s’appliquent à la surface du tissu adipeux, prolifèrent dans ses interstices, déterminant la réduction des vacuoles graisseuses et le découpage du cytoplasme autour des noyaux plus gros. Finalement, les plages adipeuses apparaissent morcelées et envahies par des traînées syncytiales néoplasiques.

D'autre part, les anciens syncytiums ont subi des modifications structurales, dans le sens que plusieurs de leurs noyaux se sont agrandis, ayant acquis de gros nucléoles excentriques, parfois oblongs, unis par des trabécules radiaires à la chromatine disposée sous forme de granulations périphériques ; parallèlement, les cytoplasmes basophiles ont intimement fusionné, se creusant çà et là de petites vacuoles. De toute évidence, il y a là une tendance d'évolution vers un jeune tissu adipeux.

Le processus néoplasique aboutit ainsi à l'édification d’une véritable tumeur mésothoracique, dont le développement maximum coïncide avec le début du IVe stade larvaire du Symbiocladius. A ce moment, une partie de la tumeur est nettement visible à l'extérieur, car elle fait saillie comme un épais bourrelet blanchâtre à travers le repli sous-alaire excessivement distendu, chez l’Éphémère examinée in toto. Une vue de profil de l’ectoparasite en place sur son hôte, montre bien la tête du Symbiocladius étroitement appuyée contre l'extrémité du bourrelet tumoral, qui lui sert de zone nourricière (pl. III, fig. 21). En enlevant le Chironomide, l'épaisseur du bourrelet est telle, que les fourreaux alaires ne peuvent atteindre que par leurs bouts la région dorsale sousjacente. Ce bourrelet apparaît encore mieux en vue dorsale, chez une

nymphe parasitée, ayant subi l’ablation des fourreaux alaires supérieurs (fig. 22, pl. II).

CHIRONOMIDE CANCÉRIGÈNE 209

La déformation due à la tumeur mésothoracique est également mise en évidence par la comparaison des coupes sagittales dans deux Rhithrogena, l’une normale et l’autre parasitée (pl. XI, fig. 122,123), fixées immédiatement après la mue les conduisant au dernier stade nymphal. A la place d’un sinus vide et aplati, on trouve un abondant tissu tumoral qui détermine une bosse proéminente, englobant le repli sous-alaire et la région du mésonotum au-devant de l'insertion des fourreaux alaires.

Considérons la topographie interne de la tumeur à l’époque de son accroissement maximum, d’après les coupes transversales à trois niveaux différents d’une Rhithrogena longue de 8,5 mm., venant de muer pour entrer dans son dernier stade nymphal (pl. X, fig. 117-119). En nous reportant, en outre, aux coupes transversales par la région mésothoracique d’une nymphe indemne au même stade (fig. 112-113, pl. X) et d’une autre de la même taille, pourvue d’un Symbiocladius au ITe stade larvaire (fig. 115-116, pl. X), on peut reconstituer à présent la marche envahissante du processus néoplasique local. La prolifération expansive des macronucléaires à potentialités syncytiales, dans le sinus sous-alaire préalablement vide, se complique au delà du ITe stade larvaire de Symbiocladius, d’un accroissement infiltratif à travers les nappes adipeuses dorsales et latérales du mésothorax postérieur (voir aussi fig. 121, pl. XI). C’est ainsi, qu’au début du IVe stade larvaire de l’ectoparasite, le tissu tumoral prend une extension considérable, allant du repli sous-alaire dilaté à l’extrême, vers l’intérieur du corps, où il arrive à se substituer aux gros paquets de la musculature alaire. Les faisceaux obliques de cette dernière ont subi une telle histolyse, qu’il en reste à peine quelques fibres; quant aux couches longitudinales frappées d’une forte atrophie, elles sont réduites à une paire d’insignifiants vestiges. La tumeur, comprend, à droite et à gauche du vaisseau dorsal, un système de volumineuses nappes basophiles, compactes et irrégulièrement découpées; se reliant les unes aux autres; celles-ci s'étendent en direction antérieure jusqu'aux muscles verticaux des pattes intermédiaires, et descendent sur les côtés, un peu au delà des grands troncs trachéens, situés à la mihauteur de l'intestin. Il ne s’agit donc pas d’une tumeur bien circonscrite, à limites précises, mais au contraire, d’un complexe néoplasique ayant une répartition tout à fait diffuse dans l’hémocoele mésothoracique de l’Éphémère-hôte.

Le syncytium tumoral (pl. VIII, fig. 96) offre, chez Rhithrogena, des

210 R. CODREANU

noyaux de différentes tailles, dont les plus grands rappellent ceux d’un jeune tissu adipeux. Ils sont assez serrés, car leur cytoplasme basophile demeure peu développé, pouvant présenter une aréole juxtanucléaire faiblement éosinophile, et rarement une petite vacuole graisseuse. Dans les lobes adipeux envahis, la réduction des vacuoles et la ségrégation cellulaire sont plus accusées qu’au stade précédent; il apparaît, en outre, dans leur cytoplasme, des inclusions basophiles caractéristiques, à structure lamelleuse concentrique. Des macronucléaires libres foisonnent tant sur les bords et dans les interstices des formations tumorales, que près de la paroi du sinus sous-alaire; on les observe même ailleurs, au contact des nappes adipeuses ventrales, dans les lacunes des trachéobranchies et des fourreaux alaires, etc.; des micronucléaires et des stérrocytes (œnocytoïdes) leur sont entremêlés. Les divisions mitotiques n’ont pas cessé au sein des masses néoplasiques; elles se poursuivent chez les jeunes éléments, qui sont maintenant pour la plupart libres.

Dans les Heptagenia au même stade, les syncytiums néoplasiques montrent des caractères adipeux encore plus marqués, du fait qu'ils se chargent d’assez nombreuses vacuoles graisseuses. Chez cette dernière espèce, il m’a paru intéressant de contrôler l’aspect de la tumeur mésothoracique dans le cas où, en plus d’une larve ectoparasite au début du IVe stade, l'hôte a son hémocoele atteint d’une infection générale à Endoblastidium. C’est un Protiste voisin des Chytridinées (voir CODREANU 1931) et dont les plasmodes épuisent littéralement le tissu adipeux de l'Éphémère, pour se développer eux-mêmes. On voit nettement sur une coupe du mésothorax d’une telle Heptagenia (pl. XI, fig. 126), que malgré l’atrophie des nappes adipeuses normales, il s’est formé un abondant tissu néoplasique, qui s’étend du tégument mésothoracique dorsal jusqu'aux troncs trachéens latéraux, et n’a de particulier qu’une texture syncytiale très compacte, à cause de l’absence des vacuoles graisseuses. Il est naturel que le néoplasme ne puisse pas élaborer de la graisse dans un organisme, où celle-ci est électivement détournée au profit d’un parasite surajouté, les plasmodes d’Endoblastidium. Il est donc à présumer, que si en général la différenciation finale dans le sens adipeux du syncytium néoplasique est plus avancée chez Heptagenia que chez Rhithrogena, cela ne doit tenir qu’à la différence de métabolisme graisseux entre les deux espèces-hôtes. Il en ressort clairement d’autre part, que ce n’est pas le tissu adipeux secondairement envahi, qui ordinairement fait le volume de la tumeur mésothoracique, mais bien les forma-

CHIRONOMIDE CANCÉRIGÈNE 211

tions néoplasiques elles-mêmes, lesquelles sont presque exclusivement représentées dans le cas examiné maintenant.

Il importe de relever enfin, que la prolifération mitotique et l’agencement syncytial des macronucléaires au cours de la phase néoplasique locale, ont pour résultat une véritable histogenèse, correspondant à l'édification de la tumeur mésothoracique dorsale. C’est là une différence essentielle entre ces formations néoplasiques et les productions inflammatoires les plus complexes, comme les nodules leucocytaires (granulomes) qui, bien que pouvant se rencontrer jusqu’au niveau même de la tumeur, ne réalisent jamais une structure réductible à un tissu préexistant de l’organisme, outre que leurs éléments constitutifs sont incapables de divisions cinétiques.

$ 2. — Phase généralisée I. — L'ÉTAT LEUCÉMIQUE

La constitution d’une tumeur mésothoracique dorsale — par fusionnement des macronucléaires en syncytiums à tendance histogénique adipeuse — est suivie d’une seconde phase néoplasique, se manifestant par la prolifération diffusive à travers l’hémocoele entier, des mêmes éléments qui, cette fois, demeurent libres et s'accumulent progressivement dans le sang circulant, dont ils changent complètement l’image cytologique. Ces derniers phénomènes, je les ai signalés depuis longtemps (CODREANU 1930 b), mais je me suis mépris alors sur leur véritable signification, pour ne pas avoir tenu compte, faute de données suffisantes, de la phase tumorale locale, qui les précède.

La phase néoplasique généralisée commence à se préparer chez l'hôte, déjà à partir du ITe stade larvaire de son ectoparasite; cependant elle ne se déclare et ne s’accomplit qu’uniquement après l’entrée de l’'Éphémère dans son dernier stade nymphal. Elle a pour origine des macronucléaires libres, qui affluent de bonne heure au niveau des syncytiums tumoraux, d’où ils sont en partie entraînés par le courant sanguin, de plus en plus loin, le long des espaces hémocoeliens, généralement ménagés entre les nappes adipeuses, ou entre celles-ci et le tégument. Là, ils peuvent se rassembler par petits nids et présenter des figures mitotiques, tout en étant entièrement libres et encore peu fréquents. Ensuite, à mesure que le tissu néoplasique déborde le sinus sous-alaire

212 R. CODREANU

et pénètre antérieurement et latéralement dans le mésothorax, on observe une agglomération notable de macronucléaires, quiescents ou en mitose, au contact des lobes adipeux ventraux et dorsaux, situés aux confins des formations tumorales fixes. Ce phénomène est encore local, car dès que l’on s'éloigne dans le reste de l’hémocoele, vers la tête ou dans l’abdomen, le nombre des macronucléaires décroît sensiblement. En général, la préparation de la prolifération généralisée, grâce à la dispersion des macronucléaires par la circulation lacunaire, se réalise plus tôt chez Rhithrogena que chez Heptagenia, et d'autant plus intensivement que la nymphe est plus grande.

Regardons plus particulièrement l’état de l’hémocoele chez l’Éphémère-hôte venant de subir sa dernière mue effective, la conduisant dans son ultième stade nymphal. Symbiocladius, lui-même, n’est qu’au début de son IVe stade larvaire et la tumeur mésothoracique finit de s’accroître. Les nappes adipeuses se trouvant en dehors du territoire du néoplasme, semblent avoir gardé une structure normale (pl. XI, fig. 123) : elles sont très développées et renferment de nombreuses et larges vacuoles graisseuses. Toutefois, à un grossissement plus fort (fig. 127, pl. XIT), on voit bien les macronucléaires insinués à la file, soit entre deux nappes adipeuses, soit entre celles-ci et la paroi du corps. Le même aspect, on le retrouve d’un bout à l’autre de l’hémocoele de la nymphe parasitée; en outre, les lacunes des fourreaux alaires et des trachéobranchies montrent beaucoup plus de macronucléaires que jusqu’à présent.

Suivons maintenant l’extraordinaire prolifération, qui va s’effectuer aux dépens des macronucléaires déjà disséminés dans tous les espaces hémocoeliens. C’est principalement au niveau des nappes adipeuses abdominales — sous-hypodermiques et périviscérales — que les éléments néoplasiques forment rapidement des colonies nombreuses. Voici un tel fragment adipeux (pl. IX, fig. 106), entouré de macronucléaires, qui adhèrent à sa surface et s’y divisent par caryocinèse, sans fusionner cependant entre eux, comme lors de l'édification de la tumeur mésothoracique. Les ovaires, organes pleins de réserves, attirent également les macronucléaires, qui s'accumulent contre leur tunique péritonéale et pénètrent même parmi les tubes ovariens. Les muscles alaires basophiles, qui ont subisté dans la région mésothoracique antérieure, étant hors de l'atteinte des syncytiums tumoraux, sont à présent couverts de macronucléaires sur leur pourtour. Par contre, les muscles acidophiles, fonctionnels à l’état nymphal, et les testicules chez les hôtes mâles, n’ayant pas

CHIRONOMIDE CANCÉRIGÈNE 213

des réserves à céder, ne sont pas recherchés par les cellules néoplasiques. Il n’y à pas là une attaque phagocytaire de la part des macronucléaires, car ils sont toujours exempts d’inclusions et se comportent, de toute évidence, comme de véritables éléments parasitaires, qui empruntent — probablement par une action enzymatique — aux tissus riches en réserves, les substances nutritives nécessaires à leur prodigieuse multiplication. D’autre part, le sang circulant, baignant ces tissus, s'enrichit progressivement en macronucléaires néoplasiques, qui y continuent leurs divisions cinétiques.

Au point culminant de la prolifération généralisée des macronucléaires, l’hémocoele se présente comme dans la figure 128 (pl. XII) qui, assez démonstrative par elle-même, gagne encore à être comparée à l’image de la même région, immédiatement après la dernière mue effective de l’hôte (fig. 127, pl. XIT). Les éléments néoplasiques peuplent en quantité considérable les espaces hémocoeliens, d’ailleurs élargis par suite de la forte atrophie des nappes adipeuses. Celles-ci, ayant perdu la plupart de leurs enclaves graisseuses, sont réduites à des cordons étroits, disloqués par places. Les mêmes faits sont responsables de la remarquable castration des ovaires des Éphémères parasitées (voir p.177). Ces profondes modifications survenues dans l’hémocoele, apparaissent nettement sur le vivant, quand on examine les hôtes sur leur face ventrale à peu près transparente. En effet, les nappes adipeuses, qui offraient une disposition segmentaire caractéristique et se signalaient par leurs sphérules réfringentes de graisse, ont disparu et, d’une extrémité à l’autre du corps, s'étend maintenant un voile opalescent continu. Celui-ci est dû à l’épaississement du sang qui, dès que l’on pique l’Éphémère, jaillit en produisant d’abondants nuages laiteux. L'observation microscopique montre (pl. IX, fig. 107) que ce sang est une suspension excessivement riche en macronucléaires fusiformes, arrondis ou en mitose, parmi lesquels il ne subsiste que peu de micronucléaires, le tout dans un plasma formant un dense coagulum éosinophile. Vis-à-vis du sang normal, où prédominent les micronucléaires, le sang en question se distingue donc par l’augmentation numérique écrasante d’une autre lignée cellulaire, celle des macronucléaires néoplasiques, ce qui lui vaut pleinement l'appellation de leucémique, comme on le verra plus loin (p. 232).

La larve de Symbiocladius s'accroît parallèlement à l’instauration de la phase proliférante généralisée, et son corps arqué arrive à couvrir le 3° tergite abdominal chez Rhithrogena (pl. TT, fig. 19), le 4° chez

214 R. CODREANU

Heptagenia, au moment où l’état leucémique est au maximum. L’atrophie des formations adipeuses ayant pour effet un élargissement des voies de retour de la circulation sanguine, celle-ci dispose maintenant d’un vaste espace périintestinal, où elle s'effectue plus librement. Grâce aux pulsations du vaisseau dorsal et aux contractions de l'intestin, le sang surchargé d'éléments néoplasiques, subit un brassage continuel à travers l’hémocoeleentier et baigne abondamment la zone nourricière de l’ectoparasite. En blessant la paroi du sinus sous-alaire, la larve de Symbiocladius ingurgite activement ce sang converti en une purée cellulaire, si bien que jusqu’à sa nymphose, elle réussit à vider la cavité générale de l'Éphémère de la plupart des macronucléaires néoplasiques. À cet égard, la comparaison du contenu intestinal de l’ectoparasite et de n’importe quelle région de l’hémocoele de l’hôte, les deux photographiés à la même échelle (pl. XII, fig. 128, 129), ne laissent plus aucun doute : l'identité entre les macronucléaires du sang leucémique de l’Éphémère et les éléments du bol alimentaire du Chironomide, est évidente. La raréfaction des cellules néoplasiques dans l’hémocoele de l’hôte se trahit sur le vivant, par une atténuation notable de l’opalescence de la face ventrale de celui-ci, au moment de la nymphose de l’ectoparasite.