RECHERCHE DE L'AMYLASE ET DE LA MALTASH

En 1908 GRréLoT (1) écrivait:

« Si on délaie de la farine de moutarde, très finement pulvérisée, dans de l’eau froide, et qu’on filtre, le liquide filtré, additionné en quantité convenable de solution d’iode ioduré donne, au bout de 5 à 10 minutes, une teinte violacée intermédiaire entre la teinte bleue que donne l’amidon et la teinte rouge-brun que donne la dextrine, dans les mêmes conditions. Il y a done, dans la graine de mou- . tarde, une substance voisine de l’amidon, soluble dans . l’eau froide ».

Ne pouvions-nous pas songer, en lisant ces lignes, que la formation de dextrine pouvait être due à la présénce d’amylase?

- C’est la raison pour laquelle nous avons recherché ce ferment qui, on le sait, est capable de saccharifier l’amidon en donnant de la dextrine et du maltose.

Il a done été réalisé deux macérations aqueuses à 5 %, durant 15 heures, à 37°, avec et sans empois d’amidon à 2 %. Voici les résultats obtenus :

Macération à 5 %, durant 15 heures, à 37° Sans: amidôn 5%. 0 gr. 26 sucre réducteur Avec 2 gr. amidon..... 0 gr. 72 sucre ‘réducteur

Nous montrons. ainsi qu'il existe de l’amylase, et cela dans toutes les graines de diverses provenances. Notons, en passant, que l’empois ne possédait aucune propriété réduetrice vis-à-vis de la liqueur cupro-potassique, et que l’acidité due au bisulfate de potasse formé dans la réaction diastasique, ne provoquait pas la saccharification de

(1) Bull. Sc. Pharm., t. xv, p. 210.

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lamidon. L’invertine ne possédant pas d’action hydrolysante sur le maltose formé à partir de l’amylase agissant sur l’amidon, nous devions retrouver le maltose et pouvoir le caractériser, soit par le point de fusion de son osazone, soit par les propriétés de solubilité de cette dernière. £

L’hydrolysat précédent fournit une osazone possédant un point de fusion instantané de 228°, donc très voisin de celui de la glucosazone, 230°. Or, la maltosazone fond à 206°, c’est done que le glueide formé est du glucose et non du maltose.

D'autre part, l’examen microscopique a montré la présence de cristaux en branches de genêt (glucosazone) et non.des rosaces (maltosazone).

C’est done que le terme ultime de l’hydrolyse est non pas du maltose, mais du glucose. ;

Comparativement à cet essai physique, la méthode de GeimMgert (1) ayant pour but de différencier les osazones a été appliquée.

L’osazone obtenue, purifiée par lavage avec cent fois son poids d’eau chaude, est lavée à nouveau à la benzine après dessication. Le produit sec est alors trituré dans un petit mortier en verre, avec dix fois son poids d’acétone diluée au demi. Après quelques minutes de contact, nous avons filtré sur papier humecté d’acétone puis évaporé le filtrat, ce qui n’a donné aucun résidu; or, seule Ja maltosazone est soluble: de plus, le point de fusion de la partie insoluble était de 228°. C’est donc que le liquide d’hydrolyse ne contenait pas de maltose, mais uniquement du glucose.

Le dissaccharide maltose, formé par l’amylase, agissant sur l’amidon, s’est donc dédoublé en donnant du glucose, et cela grâce à un autre ferment: la maltase.

(1) Journ. Pharm. et Chim. (6), t:=xVIr, p.225:

L nt action

Pour confirmer sa présence, nous avons utilisé la méthode biochimique. | |

Le filtrat d’une macération aqueuse de poudre de moutarde a été additionné de 0 gr. 500 de maltose et l’ensemble porté à l’étuve à 37°, durant 24 heures; ce temps écoulé, l’osazone (1) a été préparée; son point de fusion était 227°: de plus, traitée par le procédé de GRrIMBeRT, elle ne paraissait être seulement formée que de glucosazone, non souillée de maältosazone. |

Coneluons donc à la présence de maltase à côté d’amylase, hydrolysant le maltose en deux molécules de glucose.

Ce résultat a été observé pour tous les échantillons de moutarde noire examinés, ainsi que pour les différentes graines de moutarde blanche. ;

RECHERCHE DE L’ÉMULSINE

Il peut être intéressant de rechercher le ferment émulsine si. voisin de la myrosine.

Pour cette dé‘ermination. un mactré de graine de mou tarde a été additionné d’amygdaline et porté à 37°. Un papier picro-sodé de Guranarp, placé dans l’atmosphère du ballon, hermétiquement fermé, permettait de reconnaître la présence d’acide cyanhydrique prenait naissance par hydrolyse de l’amygdaline par l’émulsine. Après avoir vérifié auparavant que l'essence de moutarde n’avait aucune action sur le papier de Gurxarp, même au bout d’un long temps, nous avons observé une coloration rouge du papier après dix minutes environ, avec toutes les sortes de moutarde noire étudiées, mais il n’en

(1) La maltosazone étant assez soluble dans l’eau bouillante et très soluble dans l'alcool Dore nous l’avons purifiée par lavage à l’eau froide.