LES
ceux-ci présentent les premiers signes d’un éclaircissement, on retire les tubes témoins (sans batériophage) et on les porte au bain-marie à 60° pendant une heure ou une heure et demie. Les tubes contenant du bactériophage sont laissés à l’étuve jusqu’à lyse complète après quoi on leur fait subir un traitement identique. On dispose ainsi d’une suspension de corps microbiens tués par chauffage ainsi que d’un lysat correspondant à une suspension de même richesse. Voici à titre d'exemples la préparation de vaccins et de lysats cholériques, typhiques et staphylococciques que nous avons employés pour nos expériences.
1. Préparation de vaccin et de lysat cholériques (Vibrion cholérique, Saïgon, 1046).
Le 7 février, à 19 heures, on ensemence du vibrion cholérique en bouillon.
Le 8 février, à 10 heures : 4 gouttes de cette culture âgée de 15 heures sont ensemencées dans 10 tubes de bouillon et mis à l’étuve à 37°.
À 14 heures, on ajoute 2 gouttes de bactériophage à 5 de ces tubes. Tous les tubes sont alors troubles. On suit le trouble dans la série de tubes additionnés de bactériophage. Ce trouble augmente pendant deux heures et demie.
À 17 heures, il s’éclaircit légèrement. À ce moment, les cinq tubes sans bactériophages sont portés au bainmarie à 60°. On les y laisse une heure et demie.
Les tubes contenant du bactériophage sont presque complètement éclaircis à 17 heures 30. On les garde à l’étuve jusqu’à 18 heures 10. Puis on les porte au bain-marie à 60°.
LS
On ensemence en bouillon pour vérifier la stérilité.
IT. — Préparation de vaccin et de lysat typhiques.
21 février, à 19 heures, on ensemence du bacille typhique (TE 2) en bouillon.
22 février, à 10 heures, 4 gouttes de culture âgée de 15 heures sont ensemencées dans chacun des 12 tubes de bouillon et mis à l’étuve à 37°.
À 16 h. 30, on ajoute une goutte de bactériophage à chacun des 6 tubes. Tous les tubes sont alors troubles.
On suit le trouble dans la série des tubes contenant du bactériophage.
À 17 h. 45, les tubes s’éclaircissent. À ce moment on retire les 6 tubes sans bactériophage. On les met au baïin-marie à 60° pendant une heure et demie.
A 18 heures, les tubes contenant du bactériophage sont tout à fait éclaircis. On les porte au bain-marie à 60°.
Nous avons opéré de la même façon pour la préparation du vaccin et du lysat staphylococciques.
Avant de commencer nos essais de vaccination, nous avons titré la virulence des germes employés pour les cobayes et pour les souris, par diverses voies
d’inoculation.
