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La composition de ce milieu est la suivante :

RÉUSSI LE RER re AU "CC:

PO DLOnOPDIEO e MAURRAUL AE SAR 10 gr.

Phosphate dipotassique ............ 2 gr. CO ER EE PR ER LEE PA Ed ea een 15 gr.

Au moment de l'usage, pour 100 cc. de cette gélose, on ajoute :

Lactose à 20 p. 100 (en solution stérile). 5 cc. Eos Arte D AO ERA EN LE Re 2 cc.

Bleu de méthylène à 0,5 p. 100 ...... DCE.

On coule en en boîtes de Pétri à raison de 25 ce. de gélose par boîte.

Technique :« On concentre les germes de l’eau à l’aide d’un coagulant qui est de l’alumine neutre avec 70 p. 100 d’eau préparée par voie humide et stérile contenue dans une fiole, et qu'on introduira dans l’eau à raison de 20 cc. de cette suspension d’alumine pour 1.000 cc. d’eau. On agite énergiquement l’eau additionnée d’alumine et on laisse déposer dans un endroit frais pendant deux heures. Ceci fait, on soutire avec un siphon stérile le liquide surnageant le précipité et on centrifuge ce dernier à la centrifugeuse à eau. On a ainsi dans un tube un culot d’alumine contenant 90 à 95 p. 100 des germes de bacille coli contenus dans 1.000 cc. qu’on sépare de l’eau surnageante. Ce culot d’alumine est alors mélangé à la température de 30° avec 22 cc. d’un mélange de 1/3 de gélose de Teague. On agite bien le tout et on répand ce mélange sur les plaques de Pétri, contenant déjà 25 cc. de gélose de Teague, stérile et solidifiée, à raison de 2 cc. par plaque.»

On place ce milieu ainsi ensemencé à la température de 37° et au bout de 24 heures et de 48 heures, on observe les plaques de Pétri. MM. Diénert et Etrillard donnent sur l'aspect et les caractères des colonies de bacilles coli sur ce milieu tous éclaircissements désirables :

« Sur cette gélose, le bacille coli donne des colonies de ? à 3 millumètres de diamètre qui, vues par transparence, ont un centre bleu sombre, presque noir, couvrant plus des trois quarts de la colonie. La structure interne de la portion centrale est difficile à discerner. Par réflexion, on observe, au centre, une sorte de bouton surélevé bleu noirâtre, entouré d’une rigole

SRE O A NE

circulaire. La partie périphérique de la colonie prend laspect gris métallique ».

« Après 24 heures d’ineubation à 37°, on notera el compiera les colonies présentant avec netteté les caractères que nous venons d'indiquer et l’on répétera ce comptage après 48 heures. Si l’on a des doutes, on prélèvera quelques colonies aux fins d'identification ».

Et MM. Diénert et Etrillard concluent : « Par cette méthode, dans 5 cc. d’eau de Seine brute, nous avons compté et identifié 15 colonies de bacilles coli, tandis que le même volume d’eau ensemencé sur bouillon de levure phéniqué à 1/1.000° à accusé la présence de 2 bacilles coli seulement ».

Assurément la méthode est séduisante. Dès sa parution, en octobre 1929, dans les Annales de l’Institut Pasteur (t. XLVIT, 1929), sous la signature de MM. Diénert et Etrillard, elle a retenu en France l’attention des bactériologistes s’occupant plus spécialement de la question des eaux potables. Nous la retrouvons exposée dans l'Annuaire du service technique d’hygiène de la ville de Paris (Service de la surveillance des eaux d'alimentation), l’année suivante. En mars 1931, nous la voyons à nouveau rappelée dans les Annales de l’Institut Pasteur. En avril 1931, dans la Revue d'Hygiène et de Médecine préventive, MM. Dujarric de la Rivière et T.-H. Chu nous parlent, entre autres méthodes de recherche du bacille coh, de la gélose et du procédé de Teague-Levine .qu’ils jugent fort intéressants. Par ailleurs, nous savons qu’au début de la présente année, la direction centrale de l'Office des Pêches a porté cette méthode à la connaissance de ses inspecteurs régionaux chargés de veiller sur la salubrité des huîtres et de surveiller bactériologiquement l’eau de mer dans laquelle elles vivent

C'est dire que la méthode préconisée par MM. Diénert et Etrillard n’est pas considérée, il s’en faut, comme négligeable. Ses avantages sont en effet indéniables : d’abord, elle supprime l'acide phénique et son pouvoir inhibiteur. Ensuite la culture se fait à faible température. La cause d'erreur due à la concurrence vitale est annihilée puisque le bacille coli cultive sur un miheu solide et en colonie de forme et de couleur caractéristiques. En outre, la recherche et la numération du bacille col contenu dans un grand volume d’eau se fait directement. Au total, cette méthode satisfait l’esprit et on s’exphque que