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venons de dire en terminant le paragraphe précédent que chacun des facteurs de la virulence doit être examiné séparément. Sur des souris présentant des aptitudes à l’inoculation aussi uniformes que possibles, nous allons donc greffer des fragments de tumeur n'ayant subi aucune atteinte expérimentale, en faisant seulement varier la dose d’inoculation, en prenant des tumeurs plus ou moins jeunes, des portions centrales ou périphériques, etc... Puis, nous passerons en revue les diverses épreuves que les expérimentateurs ont fait subir à cette greffe, avant son inoculation à l'animal. Nous verrons quels sont les troubles apportés à la virulence, quand avant d'être inoculé, le {issu cancéreux aété conservé un certain temps à la glacière, quand on lui a fait subir des élévations ou des abaissements de température, une exposition aux rayons X, etc...

A. — La greffe intacte,

Augmentation de la virulence par la multiplicité des greffages. — Une tumeur spontanée greffée pour la première fois, manifeste des caractères de virulence excessivement faibles, c'està-dire qu'elle ne donnera qu'un pourcentage de 5 ou 10 pour 100, des tumeurs peu prolifiques, dont la croissance n'apparaîtra qu'une ou deux semaines ou méme plus après l’inoculation et qui se résorberont fréquemment. Les expérimentateurs avertis, feront donc emploi d'un nombre aussi considérable d'animaux que le permettra la grosseur de cette tumeur spontanée, afin de multiplier les chances de succès de la transplantation. Au cours des générations successives, la virulence va s’exalter peu à peu : au lieu de 10 pour 100 de succès lors des premières séries d'inoculation, le pourcentage sera bientôt de 40, 60, 8o pour 100 ou même plus. Ii s'établira un cours moyen tel que certaine tumeur donnera régulièrement entre 8o et 100 pour 100 de succès à chaque inoculation. Par contre, un certain nombre de tumeurs ne pourront être transplautées que deux ou trois fois ; la virulence au lieu de s’exalter s’éteindra rapidement. Plus nombreuses encore sont les tumeurs que l'on ne peut réussir à greffer dès la première tentative. D'une façon générale, on peut dire qu'une tumeur qui se prête aux transplantations, du fait des passages successifs sur des animaux de même espèce, augmente de

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virulence et comme pourcentage de succès, et comme énergie de prolifération. Comme nous l’avons déjà étudié (cf. chap. IT, $ 4), il s'ensuit que l'évolution d’une tumeur transplantée, est bien plus rapide qu'une spontanée. Cependant, le caractère histologique, le type essentiel de la tumeur, le plus souvent n'est pas changé.

Nous verrons dans le paragraphe suivant, que la greffe d'une tumeur sur un terrain nouveau se traduit par une chute brusque de virulence. On voit celle-ci revenir peu à peu tandis que le tissu de tumeur transplanté s'assimile de mieux en mieux aux conditions bio-chimiques du nouveau terrain qui le nourrit. C'est ce que constate tout expérimentateur qui reçoit une souris cancéreuse d'un laboratoire étranger et dont il fait des transplantations sur des souris d'une autre origine. Très faible au début, la virulence ira en augmentant, mais elle mettra un certain temps pour s'accommoder aux plus infimes différences que peut présenter la souris portegreffe qui doit l’héberger. Il en est de même pour une tumeur spontanée transplantée pour la première ou deuxième fois. L'habitat prolongé chez l'animal qui a donné naissance à cette tumeur, ne saurait être en cause directement ; cependant, pour exalter la virulence d'une tumeur transplantée, il convient de ne pas choisir pour le greffage celles qui ont fait sur le même animal un séjour de trop longue durée.

Age de la tumeur. — Tissu de récidive, de métastase. — Ehrlich dit avoir obtenu une augmentatien de virulence dans les transplantations en les faisant à de très courts intervalles de temps, Il recommande l'emploi de tumeurs jeunes, à croissance rapide, c'est-à-dire se développant peu de jours après l'inoculation, et qui montrent très vite une abondante prolifération. Les tumeurs déjà vieilles, dont la date d'inoculation est déja éloignée de plusieurs semaines, dont la croissance est stationnaire et a été très modeste sont au contraire, peu virulentes. Plus les tissus de tumeurs réinoculés seront jeunes, en d'autres termes, moins il y aura de temps ecoulé entre les inoculations, et plus on aura de chance de voir s’exalter la virulence,

Nous avons cherché à exciter de cette facon la virulence d’une tumeur, qui provient du laboratoire de M. le professeur Lewin. Nos résultats n'ont pas été sensiblement meilleurs avec les tumeurs

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jeunes et les plus prolifiques qu'avec les tumeurs plus anciennes et d'un développement très lent. Cependant, notre série d'inoculation la plus virulente a été obtenue en faisant emploi d’une tumeur récidivée, qui s'était développé sur une souris mâle, à laquelle nous avons pratiqué de multiples ablations. Cette souris, en l’espace de trois mois et demi, fournit du fait de trois ablations successives de tumeurs, un poids de tissu cancéreux double du propre poids de l'animal (pesé après la mort). Les inoculations furent faites avec le tissu de tumeur provenant de la première récidive: le pourcentage de succès généralement assez faible (50 pour 100 en moyenne) fut doublé pour cette série. Les tumeurs qui se développèrent ne furent cependant pas plus prolifiques, et dans la suite, ne donnèrent pas naissance à de nouvelles séries à pourcentage élevé de succès ; elles ne conservèrent pas ces qualités d’inoculabilité. Nous n'avons noté aucun caractère particulier dans le type histologique des tumeurs de celte origine.

Les inoculations pratiquées avec « du tissu de récidive de tumeur » sont cependant habituellement moins « virulentes », comme il ressort de l'étude de Murray. Cet auteur a pratiqué aussi le greffage de noyaux métastatiques et, d'une façon générale, la virulence de ces tissus a été inférieure à celle de la première greffe.

L'emploi de parties centrales ou périphériques d’une même tumeur ne semble pas avoir donné des résultats précis. Les tumeurs avec lesquelles nous avons expérimenté à ce propos n'ont pas montré de différence. Cependant, certaines d’entre eiles (tumeur Jensen par exemple) présentent dans leur centre des foyers de dégénérescence, et Bashford, Murray et Bowen se sont efforcés de pratiquer des inoculations par sélection des parties « saines » de la tumeur, afin d'obtenir de meilleurs résultats de transplantation.

Mode opératoire. —Nous avons vu à propos des méthodes d'inoculation que le greffage des tumeurs était réalisé pratiquement de deux façons, soit par l'introduction de menus fragments à l'aide de trocart, soit par l'inoculation à la seringue d'une émulsion de lambeaux de tissu et de sérum physiologique. Certaines tumeurs s’accommodent beaucoup mieux d'une méthode que d'une autre, et de ce fait, si l'on inocule tantôt d'une facon, tantôt d'une autre, la virulence apparente de la tumeur se trouvera modifiée. Il convient

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donc d'étudier quel est le mode le meilleur pour telle tumeur déterminée, et de ne comparer que des séries d'inoculations entreprises de lamême facon. Ce sont les tumeurs de peu de consistance, telles que les tumeurs kystiques, hémorragiques, qui souffrent le plus du broyage que nécessite la méthode de l'émulsion. Les inoculations entreprises de cette façon seront done moins « virulentes » que celles pratiquées par la méthode du trocart. Ces constatations seront utilhsées dans la pratique, et l’on emploiera, suivant les cas, la méthode qui conviendra le mieux au but proposé. C’est ainsi que, si l’on veut chercher à provoquer l'immunité par absorption de cellules cancéreuses, on emploiera la méthode la moins virulente, c'est-à-dire l’'émulsion qui aura en outre l'avantage de permettre l'introduction de plus fortes doses.

Ces variations de virulence suivant la méthode employée, montrent que cette virulence est toute relative, qu'elle est sous la dépendance d’un très grand nombre de facteurs. Elles mettent en garde l’expérimentateur contre des conclusions trop hâtives, et prouvent la nécessité de ne comparer que des séries d'inoculations véritablement semblables.

Dose. — La quantitéde cellules inoculées, la grosseur du fragment grefté, ont aussi leur part dans la virulence. L'importance de la dose est surtout manifeste au point de vue des effets de l’immunité. Il faut, comme nous le verrons dans la suite, qu'une certaine proportion de quantité et même de qualité de cellules cancéreuses, soit résorbée par l'animal que l’on veut rendre réfractaire aux réinoculations. Nous n'avons pas réussi à établir d'une façon précise, cette mème relation entre la virulence et la dose, pour les séries de transplantation. De nombreuses inoculatious ont été pratiquées dans ce but au laboratoire de Bashford à qui nous devons encore les deux tableaux ci-joints et dont nous allons résumer les observations.

« La grosseur à laquelle parviennent les tumeurs d’une même série, en un temps donné, est en partie déterminée par la proportion des cellules inoculées qui s'adaptent à leurs nouvelles conditions d'entretien, c'est-à-dire par l'importance de la dose initiale effective. Ceci peut être mis en lumière dans certaines expériences où cette dose a été de quantité variable.

« Le phénomène le plus simple se rencontre dans les expé -

riences où les tumeurs ont une rapidité de croissance proportionnelle à l’inoculation de la dose initiale. Pour le cas du sarcome de rat à cellule fusiforme de Jensen, la grosseur des tumeurs des animaux inoculés avec de fortes doses présente, dix jours après, et dans la suite de leur évolution, un contraste frappant avec la grosseur de celles qui se développent à la suite de petites doses. Elles sont vingt fois plus grosses et les animaux succombent plus rapidement. Il est important de noter que dans les deux séries, le pourcentage est le même soit 100 pour 100.

« Quand on entreprend les mêmes expériences avec d’autres tumeurs, et en particulier un carcinome de la souris, le même résultat est rarement obtenu. Le contraste entre les résultats d’inoculation de fortes et de petites doses est souvent l'inverse de celui dont nous avons parlé jusqu'ici. On inocule deux lots de souris semblables. Tandis que, dans un lot, chaque animal reçoit o,1 centimètre cube d’émulsion d’épithéliome pavimenteux, dans l’autre, la dose est de 0,05 centimètre cubes de la même émulsion. Neuf jours après l'inoculation, la prolifération des tumeurs est considérable dans les deux séries mais, dans la suite, celle-ci repérée tous les cinq jours présente de remarquables différences. Les tumeurs qui se développèrent après l'inoculation de petites doses présentèrent une prolifération rapide et continue, ce qui ne fut pas le cas des tumeurs développées après l’inoculation de 0,1 centimètre cube...

« Geei se rencontre généralement après l’inoculation de fortes ou de petites doses. Les petites doses ont une croissance progressive et importante, tandis que les fortes doses, même quand elles sont suivies d'une prolifération initiale plus marquée, donnent des tumeurs qui restent dans un état stationnaire ou disparaissent spontanément. La résistance naturelle des souris ne saurait être invoquée pour expliquer cette anomalie. Les jours qui suivent immédiatement l’inoculation, et qui précèdent la revascularisation de la greffe, constituent la période la plus délicate dans le sort de la greffe du carcinome.

« Les figures 1 et 2, résultats d'expériences entreprises avec le carcinome Jensen, servent à illustrer le même contraste entre les résultats d'inoculation de fortes et de petites doses à différents moments, Dans la figure 1 les expériences furent faites sur trois