C. — LES PRODUITS ÉLABORÉS PAR LE CHONDRIOME

Les processus que nous venons de passer en revue aboutissent à la formation dans l’intérieur du cytoplasma intervacuolaire de deux catégories de granulations. Au sein des chondriocontes s'accumulent certains matériaux issus du protoplasma et qui subissent des modifications menant en fin de compte à deux substances au moins : l’une représentée par les grains sidérophiles entièrement teintés par l’hématoxyline, l’autre par des grains dont le centre est clair, mais dont la périphérie est cerclée par une écorce colorable par la méthode de Heidenhain : les grains à coques.

Ces deux variétés coexistent le plus souvent dans la cellule hépatique de la Souris nourrie normalement, avec une prédominance plus ou moins marquée de telle ou telle catégorie. Plus rares sont les cas où l’on ne constate qu’une seule catégorie à l'exclusion de l’autre. On peut considérer ces éléments comme des constituants morphologiques constants.

Un rapprochement peut être effectué entre les faits ci-dessus relatés et les phénomènes du même type décrits par divers auteurs et en particulier par Guillisermond dans la cellule végétale. L’amyloplaste dérive du chondrioconte initial suivant une série de transformations successives rigoureusement parallèles à celles observées dans la cellule hépatique. Dans les deux cas, on observe des images identiques représentatives de processus élaborateurs semblables. Dans l’une et l’autre alternative il s’agit d’éléments cellulaires doués d’une activité synthétique particulièrement grande.

Nous allons étudier successivement chacune des deux variétés de granulations dont il vient d’être question.

a) Étude des granulations sidérophiles.

4. IMAGES OBSERVÉES. — Les granulations sidérophiles d’origine mitochondriale sont réparties sans ordre dans l'aire cytoplasmique; leur taille varie suivant le moment de leur développe-

ment où onles considère, entre 0 x, 5 et 2114. Définitivement constituées, elles offrent l’aspect de formations arrondies colorées en noir par l’hématoxyline après fixation par le bichromate-formol (PI. VII, fig. 5). Sur les préparations traitées par la méthode osmiochromique de Meves avec coloration ultérieure par l’hématoxyline elles apparaissent en noir franc; la méthode de Benda les montre sous forme de granulations de couleur violet pâle, tandis que la fuschine acide utilisée selon la technique indiquée par Altmann ou par Kull les colore en rouge plus ou moins foncé. Après fixation par le Bouin, le Hollande, le Zenker, suivie de coloration à l’éosine alcoolique lente, ces granulations sont teintées électivement en rose plus franc que le cytoplasma dans lequel elles sont plongées.

5. SIGNIFICATION DES IMAGES OBSERVÉES. — Quelle est la nature de cette élaboration mitochondriale? On ne peut la considérer comme un artifice pour les raisons exposées précédemment.

1. S’agit-il de granulations de graisse ou de glycogène? — Ce ne sont point des granulations graisseuses, les preuves abondent contre cette interprétation : l’acide osmique n’est point réduit à leur niveau; la fixation au formol salé, suivie de coloration spécifique par le Soudan ou l’écarlate donne des résuitats absolument négatifs. D'ailleurs le seul fait de les voir persisler sur des Coupes incluses à la paraffine, après fixation par le Bouin et passage dans la série des alcools et des xylols, suffit à prouve: qu'il ne s’agit pas de substances graisseuses. La méthode de Ciaccio montre enfin que ce ne sont pas des granulations lipoïdes. On ne pourrait non plus les considérer comme des granulations de glycogène; les fixations employées, les nombreux lavages à l’eau subis par les préparations rendent cette interprétation inadmissible d’mblée.

2. S'agit-il de granulations albuminoïdes? — Reste l'hypothèse des figurations albuminoïdes. Nombre d'arguments semblent plaider en faveur de cette façon de voir.

Sur des Souris sacrifiées après cinq jours d’un régime exclusivement constitué de blanc d'œuf cuit, on constate que la grosse majorité des cellules hépatiques se présente comme littéralement

SUR LA CELLULE HÉPATIQUE DES MAMMIFÈRES. Be

bourrée de granulations soit sidérophiles, soit fuschinophiles, soit éosinophiles, suivant la technique employée. Ces constatations seront analysées en détail ultérieurement. Retenons seulement pour l'heure le fait que la nourriture par les seules matières albuminoïdes, contenues dans le blanc d’œuf coagulé par la chaleur, entraîne une véritable accumulation intracellulaire de granulations homogènes, ces granulations ne sont ni de la graisse, ni du glycogène; elles sont constituées par une substance différente du cytoplasma. Les réactifs ordinaires des albuminoïdes furent essayés sur les pièces fixées à l’alcool, liquide considéré comme coagulant des albuminoïdes sans les modifier chimiquement. Seule la réaction de Millon fut positive, les autres réactifs ordinairement employés (biuret, acide phosphomolvhdique, etc.) n’ont donné aucun résultat.

Les recherches d’un certain nombre d’auteurs sont à rapprocher de nos constatations personnelles. Leurs travaux sont d’ordre morphologique et d'ordre chimique. Afanasiew, le premier, signale que les cellules du foie chez le Chien nourri par la fibrine offrent une structure nettement granuleuse et se colorent intensément en rouge par le réactif de Millon. Slowzow, Ascher, Kusmine et Bôhm ont également observé que l’absorption d’albumine influe sur la morphologie de la cellule hépatique, en particulier en augmentant ses dimensions. En 1906, Seitz, élève de Pflüger, confirme les idées de son maître et conclut de ses recherches chimiques que le foie constitue un lieu de réserve pour les albumines.

Récemment Tichmeneîff, se basant sur une expérimentation physiologique complétée par une étude chimique, a apporté des résultats fort intéressants. Cet auteur, comme nous, a travaillé sur le foie de la Sourisblanche. Après un jeûne préalable de quarantehuit heures, les animaux sont séparés en deux lots. La première moitié est immédiatement sacrifiée; les foies sont enlevés rapidement, pesés, broyés dans un mortier contenant une solution de tannin à 9 p. 100. La bouillie ainsi obtenue est portée sur un filtre, lavée avec de l’eau, de l'alcool, de l’éther, puis séchée et de nouveau pesée. Le dosage de l’azote est effectué par la méthode de Kjeldal; le dosage du phosphore est fait par le procédé de Neumann. Le second lot de Souris est nourri abondamment pendant trois jours avec de la viande de bœuf cuite. Les foies sont traités de la même

façon que pour la première série. Tichmeneff arrive au résultat suivant : 1° les dimensions du foie deviennent plus considérables, son poids augmente de 20 p. 100 environ; 29 l'augmentation de l'azote et du phosphore est importante, elle peut atteindre de 53 à 78 p. 100 en ce qui concerne l'azote. Tichmeneff conclut, comme Seitz, que le foie d’un animal mis à jeun, puis nourri de protéines peut absorber rapidement et conserver ensuite, une grande quantité d’albuminoïdes : « Bei Eïweissernährung rasch grosse Mengen Eiweiss auf zunehmen und zunächst fest zu halten ». Nos observations ne sont que la preuve morphologique de ces conclusions chimiques.

Dans une série de travaux qui s’échelonnent de 1912 à 1920, Berg a décrit dans le foie de différents animaux, en particulier de la Salamandre, des formations « en gouttes homogènes », qui semblent se rapprocher des images observées par nous. Dans un dernier mémoire publié en 1920, cet auteur résume et complète ses recherches antérieures. Il trouve dans le foie des Salamandres bien nourries, à côté de graisse et de glycogène, des gouttes homogènes qui contrastent avec la structure du protoplasma, et sont de nature albuminoïde. « Diese Tropfen bestanden aus Eiweiss, wie aüsser ihren Verhalten in den verschiedenen Phasen der mikroskopischen Teknik, der positive Ausfall der millonschen Reaktion unter den Mikroskop zeigte, und zwar aus Eiweiss, welches nach früheren Erfahrungen von denjenigen der Protoplasmastrukturen different sein musste ». Les « homogenen Tropien » montrent une coloration rouge par le réactif de Millon, deviennent rouge brillant comme les nucléoles avec le vert de méthvle-pyronine, prennent le carmin, se teintent en rouge violet par le Biondi, en violet pâle par l'hémalun-éosine; avec l’hématoxvline elleS se décolorent plus tôt que les plastosomes et la chromatine, de telle sorte que, quand ceux-ci sont bien colorés, les gouttes homogènes ont une teinte grise. Le seul fait de constater la coexistence de plastosomes ordinaires et de gouttes homogènes dans une même cellule suffit pour démontrer qu'il ne s’agit point là d'artifices.

Les gouttes homogènes disparaissent par le jeûne; leur réapparition peut être obtenue par l’absorption de substances albuminoïdes, à l'exclusion des graisses et des hydrates de carbone. Les

albuminoïdes peuvent être déposés dans la cellule hépatique des animaux, au même titre que les graisses et le glycogène et dans une forme différente des albuminoïdes du protoplasma.

Dans le but de déterminer plus exactement la nature de ces gouttes, Berg s’est livré à des recherches fort intéressantes dont nous mentionnerons seulement les résultats très suggestifs. La fixation in vitro de diverses protéines montre que les albuminoïdes complexes, comme ceux du protoplasma, sont très rapidement précipités par les fixateurs et se transforment en mottes, ou « Gerinnsbilder». Les « Granulabilder » sont fournis par les protéines à molécules moins complexes, dont la coagulation est plus lente. Les « homogenen Tropfen » granuleuses sont donc constituées par des protéines simples et cette constitution plaide en faveur de l’hypothèse que ce sont là des matières de réserve différentes du protoplasma.

Abordant ensuite la question des relations possibles in vivo entre les plastosomes et les « homogenen Tropfen », Berg répond par la négative. « Bei den gefütterten Tieren werden also die Formen der Plastosomen durch das Auftreten der homogenen Tropien nicht beeinflusst. Diese sind dieselben wie bei Hungertieren » « Jedenfalls sieht man dass durch das Auftreten von homogenen Tropfen keine Veränderung an den Plastosomen einzutreten braucht. » A la fin de son mémoire, Berg revient encore sur la question de l’indépendance des plastosomes et des gouttes homogènes, qui pour lui ne fait aucun doute. « Ueber den Modus ihrer Entstehung in den Zellen hypothetische Vorstellungen zu entwickeln, unterlasse ich. Ich môüchte nur darauf hinweisen dass es nicht gelungen ist, eine Beteiligung der Plastosomen an der Entstehung der Tropfen im Sinne einer morphologischen Veränderung nachzuweisen, und dass keine Beziehungen zwischen den Tropfen,

welche den Kernen anhaften, und den Gebilden, welche im Kern enthalten sind, aufzufinden waren. »

La conclusion est ferme : les « homogenen Tropfen » n’ont aucun rapport avec le chondriome.

Cette opinion est exactement opposée à nos résultats personnels. (Voir planche VII.) La question se pose donc de savoir si les granulations sidérophiles observées dans la cellule hépatique de la

40 KR. NOEL. — RECHERCHES HISTO-PHYSIOLOGIQUES

Souris blanche sont assimilables aux « homogenen Tropfen » décrites par Berg dans le foie de la Salamandre? Un fait est certain, c’est que dans l’un et l’autre cas, on obtient, par la nourriture albumi noïde, le dépôt et même l'accumulation de granulations arrondies dans l’intérieur de la cellule hépatique, granulations qui ne peuvent être ni de la graisse, ni du glycogène et qu’on est en droit, par conséquent, de considérer, a priori, comme représentant une substance protéique.

Mais tandis que les « homogenen Tropfen » présentent une réaction de Millon positive, se teintent en violet pâle par l’hématéine éosine, et retiennent moins intensément l’hématoxyline que les plastosomes avec lesquels elles n’ont aucun rapport originel, les granulations sidérophiles de la cellule hépatique de la Souris, si elles donnent une réaction de Millon positive, se teintent en rose franc par l'hématéine-éosine. Elles prennent la coloration noire de l’hématoxyline au même degré que le chondriome et sont enfin reliées aux chondriocontes par toute une série de formes de passage très facilement observables ne laissant aucun doute sur l’origine mitochondriale de ces formations.

En dépit des différences certaines que l’on vient de constater entre les « homogenen Tropfen » de Berg et les grains sidérophiles, nous croyons que ceux-ci sont constitués aussi par des matières albuminoïdes. Les arguments exposés plus haut, renforcés par les constatations d'ordre physiologique et chimique faites par Tichmeneff, imposent cette façon de voir.

Une seule chose reste à nos yeux fort énigmatique, c’est la contradiction formelle existant entre les résultats de Berg et nos propres observations au point de vue de l’origine de ces formations protéiques intracellulaires.

Nous avons observé et nous reproduisons dans ce travail des figures qui ne peuvent laisser subsister aucun doute sur le rôle joué par le chondriome dans l'élaboration des grains sidérophiles. Il est absolument certain que ces corps proviennent d'une transformation des chondriocontes, dans la cellule hépatique de la Souris blanche. Comment dès lors expliquer des résultats aussi divergents? La question paraît insoluble, car il est difficile d’admettre que, si les granulations protéiques intracellulaires sont d’ori-

gine mitochondriale dans une espèce animale donnée, il puisse en être autrement ailleurs. La structure fondamentale de la cellule étant partout la même dans le monde animal et dans le monde végétal, sa physiologie, évidemment adaptée comme sa morphologie, doit rester néanmoins fondamentalement identique. Nous n’en voulons pour preuve que le parallélisme chaque jour plus étroit établi par la cytologie contemporaine entre la cellule des Vertébrés supérieurs et la cellule végétale, cependant beaucoup plus éloignées l’une de l’autre que les cellules hépatiques de la Salamandre et de la Souris blanche fonctionnant dans des conditions qui, par définition, sont rigoureusement identiques.

Cette question fondamentale mise à part, les divergences qui subsistent encore entre les observations de Berg et nos constatations personnelles nous semblent faciles à interpréter. Les albuminoïdes des « homogenen Tropfen » ne sont vraisemblablement pas identiques à nos granulations sidérophiles. Leur constitution chimique variant, il n’y a rien de surprenant à ce que leurs réactions vis-à-vis des colorants ne concordent pas. Ici, la question de complexité moléculaire doit seule entrer en jeu et ce point de vue n’a rien à voir avec le précédent.

Pour nous, les granulations sidérophiles représentent une élaboration mitochondriale, dont le résultat est la mise en réserve dans la cellule hépatique de matières albuminoïdes d’origine alimentaire, de constitution moins complexe que les albuminoïdes cytoplasmiques et par conséquent différentes d'elles.

b) Étude des éléments à centre clair et à bordure sidérophile. Grains à coque.

4. IMAGES OBSERVÉES. — Sur une préparation de foie traitée par la méthode de Regaud, à côté de granulations uniformément noires, correspondant aux grains pleins que nous venons de décrire, on peut observer des formations vésiculeuses dont le centre clair est entouré par une bordure sombre teintée par l’hématoxyline.

Il s’agit là d’une véritable coque, dont la nature mitochondriale est encore démontrée par les colorations de Benda, d’Altmann et de Kull qui la teintent en violet et en rouge. La partie centrale

reste incolore, sauf après différenciation par l’acide picrique selon la technique d’Altmann; elle prend dans ce cas une teinte jaunâtre.

Ces formations existent en assez grand nombre dans la cellule hépatique; leur forme est variable, quelques-unes sont en fuseaux, d’autres sont arrondies; leur taille oscille entre 1 y, 5 et 2 u, 5. L'origine mitochondriale de ces grains à coque ne fait aucun doute. Ils apparaissent en général sous la forme de renflements creux

situés à une des-extrémités des chondriocontes. Au fur et à mesure

Fic. III. — Dessin de détail montrant des plastes à centre clair (grains à coque) aux divers stades de leur évolution. (Méthode de Regaud, hématoxyline ferrique.)

qu'ils se développent ils semblent s’incorporer la substance des chondriosomes initiaux. Ici comme dans le cas des granulations albuminoïdes, on retrouve des stades de passage : formes en raquette, grains à queue et grains définitifs. Nous nous trouvons donc en présence d’une seconde élaboration intracellulaire à point de départ mitochondrial; il ne peut s’agir en effet d’altérations, la présence dans la même cellule de chondriosomes parfaitement normaux, voisinant avec les grains à coque, suffit à faire écarter d'emblée cette hypothèse.