B. —: CONSTATATIONS

a) Le chondriome à l’état vivant.

La cellule hépatique observée dans le sérum de Locke tiède, sans coloration, quelques secondes après la mort de l’animal, présente les caractères suivants.

La périphérie des cellules est marquée par un cadre grisâtre, qui, très étroit et à peine perceptible au niveau du pôle biliaire, est beaucoup plus épais du côté des capillaires. À ce niveau, en effet, l’exoplasma est plus ou moins doublé par l’endothélium. Il existe donc une condensation cytoplasmique périphérique, comme de nombreux auteurs l’ont déjà indiqué.

Le cytoplasma dense et homogène possède une teinte gris pâle sur laquelle le chondriome tranche grâce à sa réfringence un peu plus forte (voir Planche I, figures 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7). Les chondriosomes se présentent soit sous forme de longs chondriocontes onduleux et diversement entrecroisés entre eux, soit sous forme de courts bâtonnets; tous ces éléments se détachent nettement et leur observation est des plus aisée sans le secours d’une coloration quelconque. Ils sont répartis à peu près uniformément dans l'aire protoplasmique et ne présentent pas de mouvements facilement perceptibles. Des mitochondries granuleuses sont disséminées entre les filaments; elles sont arrondies, de dimensions analogues, leur réfringence est identique à celle des chondriocontes.

Certaines cellules possèdent un chondriome presque exclusivement constitué par des filaments grêles, allongés et de calibre uniforme. Aülleurs, le cytoplasma contient en proportions à peu près égales des mitochondries et des filaments; ceux-ci apparaissent plus courts, plus épais, leur aspect paraît tassé; une de leurs extrémités semble quelquefois renflée. Enfin dans une dernière catégorie de cellules on peut observer des granulations dont le volume dépasse de beaucoup celui des mitochondries granuleuses. Leur réfringence est analogue à celle des chondriosomes : il s’agit là de plastes élaborés par le chondriome comme nous en établirons plus loin la preuve.

Bordé par une condensation périphérique nette, de contour ovoïde ou circulaire, le noyau est constitué par une plage uniforme dont la réfringence est légèrement plus accentuée que celle du cytoplasma; un ou deux nucléoles, quelques mottes chromatiques, sont les seules formations identifiables. On ne trouve pas trace de réticulum de linine.

b) Vésiculisation du chondriome.

Tel est l’aspect général des cellules vivantes. Au bout d’un temps variable, entre cinq et vingt minutes, le chondriome s’altère et se présente alors sous forme de vésicules, arrondies ou fusiformes, selon qu’il s’agit de grains ou de chondriocontes (voir Planche I, figures 11, 12, 13, 14). Cette vésiculisation est une altération et paraît être la première manifestation de l’autolyse cellulaire. On peut du reste la provoquer en remplaçant le sérum de Locke par de l’eau distillée ordinaire. C’est en somme une altération banale.

Comme l'ont déjà signalé de nombreux auteurs et en particulier Fauré-Fremiet, Ciaccio, R. et H. Lewis, Cowdry, Lewitsky, Bang et Sjôvall, Guilliermond, les milieux hypotoniques provoquent immédiatement une série d’altérations qui aboutissent à la mort de la cellule. L’altération porte d’abord et surtout sur le chondriome et débute par un gonflement très appréciable des chondriocontes qui, en augmentant d'épaisseur, montrent sur leur partie axiale une région plus hyaline que la périphérie qui conserve sa densité et sa couleur ordinaire. Bientôt après, ce gonflement

s’accentue et aboutit à la transformation des chondriocontes en petites vésicules. Les mitochondries granuleuses se gonflent et prennent l’aspect de petites vésicules, mais cette transformation se produit lentement et succède toujours à celle des chondriocontes.

Cette vésiculisation du chondriome peut être aussi produite par les élévations de température comme Policard, R. et H. Lewis, Cowdry l'ont signalé 1.

c) Granulations graisseuses.

A côté du chondriome, mais s’en distinguant nettement par leur réfringence très accusée, se trouvent des granulations arrondies, . brillantes, en général plus volumineuses que les mitochondries; il s’agit de granulations graisseuses (Planche I, figures 8, 9, 10). La variabilité de leur taille (certaines sont punctiformes, d’autres dépassent de beaucoup les dimensions des chondriosomes granuleux) constitue un caractère distinctif, très net qui, ajouté à leur réfringence plus forte?, en fait des éléments qu’il est impossible de confondre avec le chondriome, sur la cellule vivante. Les granulations graisseuses, comme les éléments du chondriome, ont une répartition à peu près régulière : on les rencontre disséminées également sur toute la surface cytoplasmique.

d) Vacuoles.

Les vacuoles ne sont pas directement visibles sur la cellule vivante, à l'inverse de ce que nous venons de voir pour le chondriome et les granulations graisseuses. On peut très facilement et très rapidement les déceler par l’addition de rouge neutre au sérum de Locke utilisé pour le montage des préparations. Presque immédiatement, à la périphérie du fragment, on voit le colorant se précipiter dans l’intérieur des vacuoles; celles-ci se présentent alors sous la forme d’un pointillé rouge qui tranche sur l’ensemble inco-

1. Il y a lieu de rappeler à ce sujet les travaux faits sur l’action des milieux hyperto niques sur le chondriome de la cellule animale et végétale. I] y a contraction et amincissement des chondriocontes qui se déforment comme s'ils perdaiïent de l’eau (R. et H. Lewis, Bang et Sjôvall, Guilliermond).

2. Une autre preuve en est donnée par l’action de l’acide osmique; voir le paragraphe consacré à l’étude postvitale.

lore du champ protoplasmique (PI. II, fig. 1, 2, 3, 4). Ces vacuoles sont de toutes les tailles, les plus grandes peuvent atteindre la moitié du volume de la sphère nucléaire, les plus petites, qui sont les plus nombreuses, ont un diamètre inférieur à celui des mitochondries; entre ces deux extrêmes existe toute la série des intermédiaires. Leur forme est arrondie, souvent ovale, quelquefois anguleuse. Nous n’avons jamais observé la forme filamenteuse décrite dans la cellule végétale. Les vacuoles paraissent surtout localisées au voisinage du noyau; elles forment là, soit des amas circonscrits, soit un cercle plus ou moins complet autour de la membrane nucléaire. Au fur et à mesure qu’on s'éloigne de cette région, elles deviennent de moins en moins nombreuses; elles sont clairsemées comme autant de points rouges entre les chondriosomes et les granulations graisseuses visibles par leur réfringence propre. Ni les uns, ni les autres ne prennent le rouge neutre.

$ II. — Étude postvitale.

L'étude vitale peut être complétée par un certain nombre de procédés qui colorent les éléments intracellulaires en même temps qu'ils tuent la cellule. Les vapeurs d'acide osmique décèlent les granulations graisseuses intracellulaires, et permettent de différencier ces éléments colorés en gris plus ou moins foncé des chondriosomes; ceux-ci, en effet, ne sont pas osmio-réducteurs.

Les vapeurs d’iode et l’iodo-iodure servent à la détection du glycogène; c’est là leur emploi essentiel : mais, comme l’ont fait remarquer Guïlliermond et Lewis, leur usage retarde l’altération rapide des cellules et fait ressortir plus nettement le chondriome. Cette pratique de l'application du pouvoir fixateur de l’iode est depuis longtemps connue.

$ III. — Conclusions.

L'étude vitale constituera le procédé de recherche de l'avenir, lorsque les moyens et les méthodes se seront perfectionnés au point de permettre de suivre sous le microscope toutes les modifications qui se produisent incessamment pendant la vie de la cellule. A l'heure actuelle elle ne peut être considérée que comme un moyen

de contrôle, très précieux d’ailleurs, des techniques de fixation et de coloration utilisées pour les recherches. Elle permet, en établissant une discrimination entre celles-ci, de se prononcer sur leur valeur et d'utiliser celles dont les résultats sont les plus proches de la réalité vivante.

Pour conclure, d’après nos observations, on peut dire que le cytoplasma de la cellule hépatique est formé par un gel colloïde contenant : 1° des constituants différenciés au double point de vue morphologique et fonctionnel : les chondriosomes; 2° des enclaves plus ou moins visqueuses (vacuoles, granulations graisseuses, glycogène).