II. — Examen microscopique

C'est le temps le plus important de l'analyse parasitologique des selles.

Si l'on excepte la recherche des amibes vivantes dans Îles mucosités dysentériques, que nous conseillons de pratiquer suivant la technique de Le Dantec, exposée ci-dessous, la recherche microscopique des parasites ou de leurs œufs dans les matières fécales comporte les temps suivants :

1° Examen direct;

2 Examen après l'application d'une méthode d’enrichissement et de concentration.

Recherche des amibes vivantes dans les mucosités dysentériques.

Voyons d'abord la recherche des amibes vivantes dans les mucosités dysentériques. Le Dantec (33) l’expose ainsi : « On prélève au moyen d’une anse de platine 1 ou 2 gouttes de la sérosité qui surnage les mucosités dysentériques et on les dépose

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sur une lame, Cette sérosité est un bon milieu dans lequel les amibes conservent pendant longtemps leur mobilité. On prélève alors un fragment grisâtre de la mucosité dysentérique et on le dissocie dans la goutte de sérosité que nous avions préalablement placée sur la lame. La dissociation terminée, on recouvre la préparation d’une lamelle couvre-objet, on lute à la paraffine et on examine à un grossissement moyen. On voit alors les amibes se déplacer lentement au milieu des leucocytes. IL n’est pas nécessaire de se servir de platine chauffante comme on le recommande, car les amibes de la dysenterie sont mobiles à la température du laboratoire et nous en avons montré vivantes plus de six heures après leur expulsion. Mais, dans ce cas, il est nécessaire de les exciter en concentrant sur elles les rayons lumineux d’une lampe. En faisant osciller le miroir du microscope, on finit par les réveiller de leur torpeur et on les voit se remettre lentement en mouvement. »

Voyons maintenant en quoi consiste l'examen direct et comment il se pratique.

14° Examen direct.

Dans cette méthode de recherche, on prélève avec un fil de platine recourbé une parcelle extrèmement ténue de matières fécales, qu'on se contente de diluer dans 2 gouttes d’eau physiologique placées sur une lame.On recouvre d’une lamelle22 x 22 et on examine au microscope en parcourant d’une facon systémalique toute l'étendue de la préparation. Pour plus de facilité, se servir d'un oculaire à diaphragme carré. Pour mieux mettre en évidence les détails de structure des kystes de protozoaires, Langeron (28) conseille une coloration avec du liquide du Lugol très fort (saluré d'iode). Aussi, à notre avis, est-il préférable de diluer les matières directement dans le Lugol à la place de l’eau physiologique.

La préparation une fois Lerminée ne doit montrer aucun grumeau si elle a été bien faite.

Bien que cerlains auteurs l’aient vivement critiqué (voir surtout les travaux de Hall (24), Bass (2), Clayton-Lane (15, 16),

Kofoid et Barber, Darling (17), en Amérique; Decio Parreiras (37), au Brésil; Telemann, Yaoïita (56), en Allemagne) ou même rejelé (Bauer (3), Carles (10, 11, 12), en France), nous considérons l'examen direct comme très utile pour le but que nous poursuivons :

1° Il est indispensable pour la recherche et l'étude des protozoaires à l'état de vie végétative et de certains helminthes à l'état larvaire (anguillules), qui sont modifiés ou détruits par les produits chimiques employés dans les méthodes d'enrichissement et de concentration :

2° Il est précieux pour préciser où compléter un diagnostic, car, fréquemment, la centrifugation, de même que l'emploi de certaines substances chimiques, entraine des déformations parasitaires marquées, et le débutant peut passer à côté du diagnostic, puisque non averti. Nous reviendrons sur cette question au chapitre : A/térations parasitaires ;

3’ IL permet de constater si la selle est riche ou non en débris cellulosiques. Dans l’affirmative, il joue un rôle dans le choix des méthodes d'enrichissement, car. n est alors porté à préférer notre méthode à toute autre.

ividemment, l'examen direct présente quelques invonvénients : sa longueur, car il est nécessaire d'examiner complètement cin | ou six préparations pour avoir un résultat valable.

Son exécution parfois difficile avec les selles de constipation ; dans ce cas, il suffit de prélever un peu du produit de l'homogénéisation, qui doit être faite pour la plupart des méthodes d’'enrichissement.

Son insuffisance relative au point de vue du diagnostic cerlain ; il ne dispense en effet jamais de l'examen que nous allons à présent exposer.

Malgré ces désavantages, l'examen direct doit toujours être fait.

20 Examen après enrichissement.

(But, classification des méthodes.)

Le but des méthodes d’enrichissement et de concentration, employées pour l'analyse parasitologique des matières fécales,

est d'éliminer ou de détruire la plus grande partie des débris animaux ou végétaux qui y sont contenus, de manière à obtenir sous le plus faible volume tous les éléments parasitaires.

Les auteurs classent ces méthodes en :

1° Méthodes physiques; 2° Méthodes chimiques,

suivant qu'elles mettent en œuvre des procédés physiques ou des procédés chimiques.

Nous plaçant sur le terrain de la pratique, nous les classons en 1° Méthodes spéciales (ne donnant qu'une partie des éléments parasitaires : œufs ou kystes); 2° Méthodes générales (permettant d'effectuer la recherche des œufs et des kystes).

Nous n'avons pas la prétention de passer en revue toutes les méthodes déjà existantes. Ceux que la question intéresse auront grand avantage à consulter l'excellente thèse de notre collègue Pirot, médecin de la marine.

Au cours de nos recherches, nous n'avons employé que les quatre méthodes indiquées ci-dessous. Nous avons pu les étudier, les comparer entre elles’ aussi, après l'exposition de chacune, allons nous donner notre opinion personnelle sur leur valeur.

a) Méraone sPéciaLe : Mérnope Sicaras-Piror (38).

(Pour la recherche des œufs d'helminthes.)

Nous nous bornerons à cette méthode qui, à l'expérience, se révèle de beaucoup supérieure à toutes les autres dun même ordre.

Exposé de la méthode. — 1° Les selles à examiner, soigneusement broyées à l’agitateur si elles sont trop consistantes, sont mises dans un grand flacon de 300 cc. contenant une trentaine de grosses perles de verre. Ajouter environ 100 ce, d’eau ordinaire filtrée (4) el

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