SECONDE PARTIE

I. — Immunité naturelle du hérisson vis-à-vis du sérum d'anguille.

i° Immunité du hérisson contre l'action toxique.

Les phénomènes que nous venons d'étudier ne sont pas présentés par tous les animaux auxquels on injecte du sérum d'anguille. C'est ainsi que le hérisson [Erinaceus europseus) est doué d'une remarquable immunité naturelle contre ce poison*. Quelques expériences le montreront.

Expérience XII. — Hérisson? de 340 gr. De 5 h. 32 m. à 0 h. 48 m. injection dans la veine jugulaire droite de 0,2 de sérum dilué dans 2 c. c. d'eau salée ; rien de particulier à noter. De 5 h. 45 m. à 6 h. injection de 0,7 c. c. ; pas de troubles apparents, sauf une défécation abondante vers 5 h. 50 m. L'animal est cependant malade, car, détaché, il reste étendu sur la table, sans se mettre en boule; vers 6 h. 30 m. la dyspnée s'établit; cet état d'abattement devient plus grave encore vers 7 h. Le lendemain matin on trouve l'animal mort. Il avait donc reçu en tout 0,9 c. c. de sérum d'anguille.

1. Nous avons signalé ce fait h la Société de Biologie (L. Camus et E Glet • De la toxicité du sérum d'anguille pour des animaux d'espèces différente (lapin* cobaye, hérisson. C. R. de la Soc. de Biol., 29 janvier 1898, p 129) '

^ Par comparaison, un cobaye de 590 p:r. est mort en 1 m. après l'injection intra- veineuse de 0,1 du même sérum, c'est-à-dire d'ailleurs, d'après tout ce que nous avons vu précédemment, d'une dose beaucoup trop forte encore (quatre ou cinq fois trop forte).

Expérience XIII. — Hérisson de 585 gr. De H h. 30 m. à H h. 47 m., injection dans la veine jugulaire droite de 1,1 c. c. de sérum d'anguille dilué dans 9 c. c. d'eau salée à 8 p. 1000. La dyspnée avec râle trachéal a commencé à 11 h. 37; brusquement, à midi, l'animal se raidit et la respiration s'arrête. A l'ouverture du thorax, pratiquée immédiatement, le cœur bat.

Ainsi, ces animaux, sans mourir sur le coup et sans être frappés des accidents aigus auxquels succombent si rapidement les lapins et les cobayes, supportent des doses considérables d'ichtyotoxique; on peut admettre qu'ils ne meurent qu'avec une dose 40 ou 50 fois plus forte que celle qui est nécessaire pour tuer presque instantanément le cobaye*.

Faute d'un nombre suffisant de hérissons, nous avons dû nous borner à ce type d'expériences dans lesquelles on recherche la dose mortelle d'emblée ^

1. Phisalix et Bertrand (Recherches sur l'immunité du hérisson contre le venin de vipère. C.R. de la Soc. de BioL, 27 juillet 1895, p. 639) ont montré que le hérisson offre au venin de vipère une résistance 35 à 40 fois plus grande que celle du cobaye; Calmette et Deléarde (Sur les toxines non microbiennes et le mécanisme de l'immunité par les sérums antitoxiques. Annales de VInslilul Pasteur, t. X, p. 675-707, 1896) ont de même établi qu'il faut pour tuer cet animal une dose d'abrine 10 fois plus forte que celle qui tue le lapin. — C'est donc un fait général que cette immunité du hérisson ; elle existe, en effet, vis-à-vis de toutes ces substances, toxines, venins, sérums toxiques, qui, par beaucoup de propriétés qu'elles ont en commun, forment un groupe naturel.

2. Dans quelques autres expériences, mais en trop petit nombre pour que nous puissions en tirer une conclusion ferme, nous avons vu que le hérisson résiste moins bien aux petites doses répétées, comme celles que l'on emploie pour immuniser le lapin ou le cobaye ; il dépérit et meurt assez rapidement. Ainsi, un de ces animaux (cf de 735 gr.), après avoir reçu à trois jours d'intervalle chaque fois 0,05 c. c. de sérum d'anguille, est mort au bout de 7 jours, ne pesant plus que 660 gr. On peut objecter, il est vrai, ou bien qu'il s'agissait d un animal par hasard peu réfractaire, ou bien que le sérum d'anguille employé était exceptionnellement toxique.

2" Immunité du hérisson contre l'action globulicide'.

II importe de remarquer tout de suite que les globules rouges du hérisson offrent une très grande résistance à l'action dissolvante du sérum d'anguille. On peut en juger par la seule inspection des courbes suivantes :

Courbe k° 7. — Hérisson cf , 685 gr.

Solution NaCl p. 100

Sérum d'anguille o i/soo i/iooo 1/2000 1/3000

Courbe n» 8. — Hérisson d*, 828 gr. T. rectale = 37o,4.

Solution NaCl p. 100

Sérum d'anguille o

On voit donc que, même à 1/50, le sérum d'anguille n'exerce qu'une très faible action globulicide sur le sang de hérisson.

mLeTési:LreTsî:fs^d": l?uf att^sér" m t?", P-r'"^"^ '^^'^ résistent absolument Y l'nrnnnHno; T «'«'^"''cide ; c'est ainsi qu'ils

Nous avons déjà indiqué la conséquence (voyez p. 33) qui sort de ce résultat, au point de vue de la relation à établir entre la toxicité générale et l'action globulicide de l'ichtyotoxique.

II. — Immunisation contre l'action toxique du sérum d'anguille et particulièrement contre son action globulicide.

Ces expériences sur des animaux pourvus de l'immunité naturelle vis-à-vis du sérum d'anguille nous ont fait entreprendre l'étude de l'immunisation d'animaux très sensibles à ce poison, comme le lapin et le cobaye. Ces essais ont porté sur Faction toxique et, d'autre part, et plus spécialement, sur l'action globulicide.

Celte division ne signifie pas que l'on puisse immuniser séparément contre l'une ou l'autre de ces actions (voyez d'ailleurs ce que nous avons dit page 33 de leur étroite relation), mais simplement que, dans beaucoup de cas, nous avons jugé du degré d'immunité des animaux par la résistance acquise à l'action globulicide. L'intérêt fondamental et le principal avantage de l'étude que nous avons poursuivie nous paraît en effet consister en ce que, grâce au procédé facile non moins que rigoureux que nous connaissons d'évaluation in vitro du pouvoir globulicide et de ses variations, nous pouvons en quelque sorte avoir une mesure de l'immunité, une mesure suffisamment exacte. Les conditions du problème si complexe de l'immunité se trouvent en outre singulièrement simplifiées par ce fait que, dans cette dernière sorte d'expériences, est mis en jeu un seul élément anatomique, le globule rouge, séparé de l'organisme et ainsi soustrait à toutes les influences qui compliquent in vivo ses réactions, les influences nerveuses par exemple. Voilà pourquoi nous étudierons dans un chapitre spécial l'immunisation contre l'action globulicide.

1" Immunisation contre l'action toxique.

Cette partie de la question n'est pas neuve. Déjà plusieurs expérimentateurs avaient montré que l'on peut immuniser des animaux d'espèces diverses contre le sérum d'anguille.

Les recherches de J. Héricourt et Ch. Richet» ont établi que l'injection sous-cutanée de sérum d'anguille chez le chien donne lieu à une réaction à la suite de laquelle le sérum sanguin de l'animal contient « une antitoxine immunisante -» ; en effet, le sérum d'un chien ainsi traité préserve le lapin contre l'action toxique du sérum d'anguille'. D'autre part, le mélange in vitro de sérum d'anguille et de sérum antitoxique rend le premier de ces liquides inefficace; on peut injecter impunément ce mélange à des lapins. Les injections étaient faites dans les veines. Les auteurs admettent que l'antitoxine agit sur la toxine comme une substance chimique neutralisante, appliquant ainsi à ce cas particulier les idées de Ehrlich et de Behring. Nous verrons plus loin que l'action réciproque de la substance globulicide du sérum d'anguille et de la substance antiglobulicide du sérum d'animal immunisé paraît devoir s'expliquer de la même façon.

Carlo Maglieri' a fait sur des lapins des expériences analogues à celles de Héricourt et Richet, et réussi à immuniser ces animaux par des injections intra-veineuses de petites doses progressivement croissantes de sérum ; il commençait par un dixième de

1. J. Hkricoukï et Ch. Richet : Action locale du sérum d'anguille. Sérothérapie contre les effets toxiques du ,sérum d'anguille. C. R. de la Soc. de BioL, 23 janvier 1897, p. 74 ; Sérothérapie in vilro dans l'intoxication par le sang d'anguille. /ôzrf., 10 avril 1897, p. 367.

Antérieurement, Phisalix (Propriétés immunisantes du sérum d'anguille contre le venin de vipère. C. R. de VAcad. des Se, 28 décembre 1896, p. 1305) avait montré que le sérum d'anguille chauffé (à liS» pendant 15 min.) immunise le cobaye contre le venin de vipère. '

2. Héricourt et Richet ont soin de rappeler que cette simple et démonstrative expérience est conçue et réalisée sur le type de celle que Phisalix et Bertrand (Sur la propriété antitoxique du sang des animaux vaccinés contre le venin de vipère. R. de la Soc. de BioL, 10 février 1894, p. 111 ; Propriétés antitoxiques du sang des animaux vaccmés contre le venin de vipère. Arch. de Phvsiol h' série, t. VI, p. 611-619, 1894) ont faite avec le venin de vipère ^''y''°^-'

3. C. Maolieri : Sull'azione tossica, immunizzante et battericida del siero di sangue di anguiUa. Annali d'igiene sperimenlale, N. S., t. VII, p I9i!214 l?97.

la dose mortelle (qu'il avait préalablement déterminée), et augmentait cette quantité de 1/10" tous les jours; la dose mortelle étant atteinte, il injectait le lendemain 1 dose mortelle et demie, puis 2 et 3; il a constaté que les lapins ainsi traités arrivent à supporter 20 fois la dose toxique. Le sérum de ces animaux, injecté dans le péritoine, protège les cobayes contre les effets d'une injection intra-péritonéale de sérum d'anguille. Injecté dans les veines en même temps que ce dernier, il ne manifesterait pas ses propriétés immunisantes. Ce résultat est en contradiction apparente avec les résultats des expériences de Héricourt et Richet, mais il faut remarquer que les auteurs français ont opéré dans des conditions différentes, se servant de sérum de chien qui pourrait être plus actif que le sérum de lapin immunisé et injectant ce sérum à des lapins.

Wehrmann* a également immunisé des lapins contre le sérum d'anguille au moyen d'injections intra- veineuses de petites doses de ce poison.

Nous avons à notre tour employé, pour immuniser des lapins ou des cobayes, le même procédé des injections répétées à intervalles plus ou moins rapprochés, suivant l'état des animaux, de petites quantités de sérum normal d'anguille ; et nous avons semblablement vu que les animaux ainsi traités peuvent, au bout de quelque temps, résister à des doses toxiques de sérum d'anguille. Mais le fait nouveau que nous avons trouvé, pour la recherche duquel d'ailleurs ces expériences avaient été instituées, c'est que le sérum sanguin de ces animaux a acquis des propriétés antiglobulicides, in vitro et in vivo; nous reviendrons plus loin sur ce fait.

Nous avons aussi cherché si, par d'autres moyens, on ne réussirait pas à conférer cette même immunité. Nous répartirons ces différents moyens en cinq classes :

1. Essais avec du sérum d'anguille ayant subi divers traitements, chauffage, neutralisation;