SUR LE MÉCANISME DE L'ACTION HÉMOLYTIQUE DU SÉRUM D'ANGUILLE

Par L. CAMUS et E. GLEY

Depuis l'époque où nous avons découvert la puissante action hémolytique du sérum d'anguille et l'action antagoniste du sérum des animaux immunisés contre l'ichtyotoxine*, l'étude des phénomènes d'hémolyse et d'anli-hémolyse a pris le plus grand développement. Contrairement aux idées qu'ont imposées surtout les travaux de Bordet et ceux d'EHRLicH sur les sérums hémolytiques en général, nous avons toujours admis que le sérum d'anguille exerce une action hémolytique directe, c'est-àdire que l'hémolyse qu'il détermine se produit suivant un mécanisme simple, non séparable en deux facteurs [sensibilisatrice et complément) ayant réciproquement besoin pour provoquer l'effet globulicide de leur influence respective».

" C. R. de UAcad. des Se, 10 juin 1912, t. CLIV, p. 1630.

1. L. Camus et E. Gley : De l'action destructive d'un sérum sanguin sur les globules rouges d'une autre espèce animale (C. R. de l'Acad. des Se, t. CXXVI, p. 128, 31 janvier 1898). — Recherches sur l'action physiologique du sérum d'anguille. Contribution à l'étude de l'immunité naturelle et acquise (Arch. intern. de pharmacodynamie, 1898, t. V, p. 247-305.

2. Hans Sachs (Antigène tierischen Ursprunges, in Handbuch der Tecknifc wid Melhodik Immunitaisforschung, t. I, léna, 1908, p. 248) a considéré les poisons des crapauds et des araignées comme des « hémotoxines pures » (c'est ce que nous appelons hémolysines directes) et il tend aussi à ranger dans cette catégorie le sang d'anguille : « Zu den echten tierischen Toxine wâre schliesshch noch das Gift des Aalblutes (Ichthyotoxin) zu rechnen » (Loe. cil. p.274). Dans son remarquable article Hémolyse (1909) du Dictionn. de physiologie de Richet, Nolf présente la môme thèse : La substance toxique du sérum d'an-

fih if^tT^M f ""'P^^-- ""^ pu jusqu'ici la scinder en un anticorps (sensibilisatrice) et un complément » {loe. cit., p. 457).

Nous réunissons et groupons ici les différentes séries d'expériences que nous avons eu maintes fois l'occasion de faire à ce sujet, et dont nous n'avions pas encore présenté l'ensemble.

l* Le sérum cV anguille quihêinohjse rapidement le sang du lapin agit avec une égale activité sur les globules lavés.

Le sérum d'anguille manifeste toute son activité sur des globules de lapin soigneusement lavés, cinq ou six fois de suite, dans l'eau salée à 8 p. 1.000, c'est-à-dire débarrassés complètement de toutes les substances de leur plasma. L'expérience comparative a toujours été réalisée et l'action du même sérum d'anguille sur les globules non lavés du même lapin s'est montrée identique. On peut faire l'expérience de façon très démonstrative : on soumet un échantillon de sang à huit centrifugations successives; à chaque centrifugation, on prélève une gouttelette de globules sur lesquels on fait agir chaque fois la même quantité de sérum d'anguille ; chaque fois, l'action hémolytique a été la même. — On peut se servir pour cette expérience de globules de lapin préalablement et fortement immunisé contre le sérum d'anguille ; ces globules sont lavés avec soin ; ils sont également détruits par le sérum aux mêmes dilutions. Quelquefois, il est vrai, on trouve des globules qui ont, de par l'immunisation, acquis une résistance propre*; les lavages répétés ont certainement enlevé toute l'antitoxine qu'ils pouvaient retenir, ils n'en résistent pas moins à l'action hémolytique; mais c'est là un cas particulier, facile à reconnaître.

La propriété hémolytique du sérum d'anguille est donc indépendante de la présence du plasma sanguin qui baigne les globules sur lesquels il agit et les constituants de ce plasma ne paraissent rien ajouter à son action.

2" Le chauffage à 58% qui supprime l action hémolytique du sérum d'anguille, ne fait pas disparaître cette propriété en détruisant une alexine analogue à celle des sérums de cobaye et de lapin.

Le sérum d'anguille chauffé 15 m. à 58° a perdu tout pouvoir hémolytique sur les globules rouges du lapin. En ajoutant à ce sérum du sérum frais de lapin, c'est-à-dire le complément duquel on peut penser qu'il a été privé par le chauffage, on ne voit jamais reparaître le pouvoir hémolytique. Le mélange des deux sérums ne détermine qu'une

1. L. Camds et E. Glet, loc. cit. et aussi H. Kossbl (BeW.^ftiin. 14 février 1898j.

très légère hémolyse après 24 heures, identique à celle qui se produit au bout du même temps dans un tube témoin (globules de lapin dans l'eau salée à 8 p. 1.000) et beaucoup moins forte que celle qui se produit dans le sérum de lapin normal.

Jn vivo, du reste, l'injection à des lapins de sérum d'anguille chauffé, à la dose de 0 ce. 4 par kilogramme d'animal (dose hypertoxique du sérum non chauffé), mélangé avec 4 c. c. de sérum de lapin, ou même à la dose de 0,7 c. c. par kilogramme, également additionné de 2 ou de 4 c. c. de sérum de lapin, ne provoque aucun accident. Ainsi, l'alexine de ce sérum est incapable de réactiver le sérum d'anguille chauffé.

Les globules de lapin mis en contact avec du sérum d'anguille chauffé ne dévient pas le complément.

Les globules de lapin mis en contact avec du sérum d'anguille chauffé qui ne sont pas hémolysés par addition de sérum de cobaye normal ne fixent pas l'alexine de ce sérum.

En effet, si à des globules de lapin restés en contact avec du sérum d'anguille chauffé, puis additionné de sérum normal de cobaye, on ajoute des globules de mouton ^sensibilisés au sérum anti-mouton, ces derniers globules se détruisent dans ce mélange comme en présence de sérum de cobaye seul. Les doses de sérum de cobaye employées pour cette recherche ont été reconnues par des expériences préalables comme juste suffisantes pour hémolyser les globules de mouton sensibilisés.

Enfin, le sérum d'anguille nest pas hémolytique parce que son alexine est plus active que l'alexine des autres sérums.

En effet, des globules de mouton sensibilisés avec du sérum antimouton chauffé ne sont pas détruits plus activement par le sérum d'anguille que des globules non sensibilisés; la limite inférieure de l'activité du sérum est à peu près la même dans les deux cas. On doit donc admettre que l'alexine du sérum d'anguille n'est pas plus active que l'alexine du sérum de cobaye ou du moins qu'elle est de nature différente et qu'elle ne peut être identifiée avec celle-ci.

3« Dans le sérum d'anguille chauffé, il ne reste pas de sensibilisatrice'. On ne peut du moins sensibiliser des globules de lapin

1. Une curieuse expérience de A. Frouin (C. R. de la Soc de Biol 24 octobre 1908, p. 355) a déjà montré l'absence de sensibilisatrice dans le Bérum il ânguillc.

par un contact plus ou moins prolongé avec ce sérum préalablement porté à. 58° pendant un quart d'heure ; 'ils ne sont nullement détruits quand on les met en contact avec du sérum de cobaye ou de lapin.

Des globules de lapin, lavés dans Teau salée à 8 p. 1.000 à cinq ou six reprises, puis sensibilisés par du sérum d'anguille chauffé (à 38" pendant un quart d'heure) et centrifugés ne sont nullement détruits quand on les met en contact avec du sérum de lapin normal. Nous avons des expériences dans lesquelles parties égales de globules ou de sérum d'anguille chauffé ont été en présence pendant des temps variables, avant que ces globules, supposés ainsi sensibilisés dans les meilleures conditions, fussent soumis à l'action de l'alexine du sérum de lapin. Cette alexine n'en est pas moins restée sans effet.

Toutes ces expériences montrent donc que nous n'avons pu séparer en deux facteurs l'agent hémolytique du sérum d'anguille. Celui-ci constitue une hémotoxine pure ou hémolysine directe.

Paris. — L. Marktheux, imprimeur, 1, rue Casselle.

Pull. — L. &UbiT)i 1, r. UiMua.