II. — Technique expérimentale
Il ne sera sans doute pas inutile, avant d'entrer en matière, de donner quelques indications d'ordre technique sur nos expériences.
Nous avons toujours recueilli le sérum d'anguille de la même façon ; une canule en verre, préalablement stérilisée, est introduite dans l'aorte d'une anguille et on reçoit le sang dans de petits tubes de verre stérilisés ; par ce mode de faire, on obtient
1. Nous avons publié quelques-unes de ces recherches. Voyez L. Camus cl E. Glet : Persistance d activilé de la présure à des lempéralures basses ou élevées. C. R. de l'Acad. des Se, 26 juillet 1897, p. 256 ; Action du sérum sanguin et des solutions de propeptone sur quelques ferments digestifs. Arch. de Physiol., 5e série, IX, p. 764, 1897 ; Influence de la température et de la dilution sur l'activité de la présure. Ibidem, p. 810.
2. L. Camus et E. Gley : De l'action destructive d'un sérum sanguin sur les globules rouges d'une autre espèce animale. Immunisation contre cette action Acad. des Se, 31 janvier 1898, p. 428.
plus de saug que parle procédé brutal, généralement employé, et qui consiste à sectionner la tête ou la queue de l'animal et à recueillir le sang s'écoulant de la blessure'. La quantité obtenue peut être encore plus grande si on a le soin, alors que l'artère ne fournit presque plus de sang, d'exercer tout le long du corps de l'anguille des pressions méthodiques, de l'extrémité inférieure vers la tête.
On peut laisser simplement les tubes pleins de sang à la température du laboratoire ; au bout de quelques heures, on a un sérum clair ; on peut aussi soumettre le sang à l'action de la force centrifuge, et l'on obtient ainsi une quantité un peu supérieure de sérum.
En opérant de cette façon, nous avons toujours eu d'assez grandes quantités de sérum clair, que nous avons conservé pendant longtemps à l'abri de la lumière sans qu'il perdit rien de son activité *. Voici un tableau qui montre les résultats de notre manière de faire :
QUANTITÉ QDANTITÉ
ANGUILLES POIDS de sang de sérum
recueilli par l'aorte obtenu
N» 1 310 gr. 4,2 ce. 1,8 ce.
No 3 350 4,5 2,25
No 12 600 8,9 4,1
No 14 1.050 16,6 9,2
No 15 1.055 16 8
No 16 1.250 14,8 6,4
1. J. Hérieourt et Ch. Richet (C. R. de la Soc. de BioL, 23 janvier 1897, p. 74) ont indiqué comme étant la meilleure manière de se procurer du sang d anguille le procédé qui consiste à introduire un pipette directement dans le cœur. Mais c'est un mode opératoire encore assez défectueux, surtout en ce qu il fait toujours perdre un peu de sang. -j j i • r
2. C. Maglieri (SuU'azione tossica, immunizante e battencida del siero ai anguilla. Annali dlgiene sperimentale, N. S., t. VIT, p. 191-214, 1897) prétend
Le sérum ainsi recueilli est la plupart du temps d'une belle coloration bleu verdâtre, quelquefois jaunâtre ; dans ce dernier cas, il nous a toujours paru moins toxique.
Nous nous sommes servis de ce sérum dilué au dixième dans l'eau salée bouillie (à 8 p. 1.000 de chlorure de sodium) en injection intra-veineuse. C'est, on le sait, par ce procédé seulement que l'on est absolument sûr d'employer les quantités que l'on veut de substance toxique et de les faire agir dans des conditions toujours identiques et dans le même laps de temps. — Dans quelques expériences d'immunisation pourtant, nous avons eu recours à l'injection intra-péritonéale ; nous aurons soin d'indiquer ces exceptions en temps et lieu.
Nous avons quelquefois employé du sérum conservé à l'état sec, après dessèchement sous le vide et l'exsiccateur à acide sulfurique. La dilution de ce sérum s'est montrée aussi active que le sérum en nature.
Les animaux utilisés ont été le lapin, le cobaye et le hérisson {Erinaceus europœus). Sur le lapin, les injections étaient faites dans une veine marginale de l'oreille ; sur le cobaye et le hérisson, dans une veine jugulaire.
