TABLEAU XXIX
Influence de petites quantités de peptone
sur l'effet désinfectant du ciycocoilate de cuivre
Temps de contact à +370
0 Témoin s0t 601 90! 120! 150!
Yube A 357 0 0e 0 "0 0 (sans peptone) fube B 426 601 615 855 + 8290 761
(avec peptone)
Ainsi la décroissance du staphylocoque normalement provoquée par le cuivre dans l'eau pnysiclogique est remplacée par une croissance du fait de l'addition de petites quantités de BSPÈONS à cette eau physiologique.
Par contre, l'addition de 1. A de edge dans le glycocollate de cuivre à D = #00 en eau physiologique n'a pas sensiblement modifié la durée d'obtention de l'action bactéricide (exoérience non décrite).
5) Résistance acquise du SRE A Seau vis-à-vis du Glycocollate de cuivre.
On sait que l'on peut &évelopper chez un grand nombre de bactéries une accoutumance vis-à-vis des substances antiseptiques et antibiotiques, “ous avons constaté que le staphylocoque végétant en eau peptonée peut 6tre rendu progressivement plus résistant à l'action du glycocoliate de cuivre grâce à une série de réensemencement sur des milieux contenant des concentrations croissantes de ce sel, Ce sont les essais que nous avons réalisés et que nous allons ‘résumer brièvement :
| Chaque tube reçoit 0,5 cms de culture mère (soit 1, 2x100 staphylocoque) dans 10 cm5 d'eau peptonée additionnée de glycocollate de cuîivre.à concentration croissante d'un tube au tube suivant de la série,
RE a
A l'incubation à +37°0 on constate facilement que plus un tube de la série est riche en cuivre, moins 11 se développe de ger-
mes en un temps donné ainsi dans cette première série, nous consta-
tons que le tube contenant 0,80 cms de glycocollate de cuivre à la dilution D = 1 donne après 24 heures d'étuve à +57°C une culture très peu trouble alors que les concentrations inférieures en cuivre donnaient des cultures abondantes.
2ème passage
On ensemence (64 x 104) germes provenant du tube précédent dans chacun des tubes d'une nouvelle série (tubes â'eau peptonée) contenant des concentrations croissantes en cuivre. Cette fois, c'est le tube contenant 1,60 cm®.de glycocollate de cuivre à la dilution D = 1 qui en 24 neures:d'incubation est légérement troublé et que l'on repique et ainsi de suite, |
FSS : y vême Passage
=: On ensemence (21 x 104) germes précédents et la tolérance au cuivre monte à 2,80 cmo de glycocollate de cuivre à la dilution De is
4ème Passage
On ensemence CON 10%) germes précédents-et la tolérance au cuivre monte à 5,5 cm de glycocollate de cuivre D = 1 (le tube contenant 4 cmS étant resté stérile après repiquare sur gélose),
5ème Passage
On a ensemencé 498 x 10* germes. La tolérance en cuivre reste.alors en apparence au même niveau (5,5 cm® de glycocollate de cuivre D = 1) La culture est limpide mais non stérile car un repiquage sur gélose nutritive (sans cuivre) donne quelques colonies et cela même dans le tube dè série contenant 4 cm de glycocollate de cuivre D = 1,
An D Géme Passage
On continue toujours à opérer comme précédemment et cette foîs on ensemence 45 x 100 germes que l'on a prélevés dans le tube légérement trouble contenant 2 cm de GCu D = 1 de la série précédente,. Ici le dernier tube resté trouble contient 4 cm3 de liqueur Cuivrique tandis qu'il faut monter au tube contenant 7 cmS de cuivre pour qu'aprés repiquage sur gélose nutritive et étuvage de 48 heures aucune colonie n'apparaisse, \
7ème Passage ee | Ici on ensemence (25 x 10°) germes provenant du tube. contenant 6 cmS de glycocollate de cuivre D = 1, provenant de la
série n° 6. La situation ne change plus. Le tube, d'eau peptonée additionné de 6 cm5 de Glycocollate de cuivre D = 1 reste limpide
et stérile par repiquage sur AT nutritive et nous ne pour sui vons plus les essais dans cette voie.
Au départ, le staphylocoque ayant servi à ces cie d'accoutumance au cuivre, voyait son développement sur 10 cmS d'eau peptonée, stoppé par 0,40 cmS de glycocollate de cuivre D = 1 et même en ensemencement massif (118 x 105 germes), L'accoutumance
est donc nette et peut atteindre 5 fois la concentration tolérée par le stapnylocoque non entrafné,.
Cependant cette accoutumance parait faible par rapport à colle que l'on constate avec les bactériostatiques fournis par les êtres organisés, Du reste elle se perd. assez facilement, car en : 19 passages successifs sur gélose nutritive sans cuivre, nous avons constaté que la tolérance s'abaissait à 0,20 cm de solution cuivrique par 10 cm$S d'eau peptonée (Vérification faite. par trois essais des séries précédentes avec subeulture sur gélose nutritive vérifiant ei l'on avait atteint l'effet bactéricide).
Peut-on, avec la bactérie ainsi ramenée à une faible ré- ‘sistance, développer celle-ci une nouvelle fois ? Dans un seul essai, nous n'avons pas eu de succès dans cette voie. iiais nous n'avons pas examiné la question avec assez d'insistance pour ôtre affirmatifs.
Remarque :
Dans ces essais, nous avons remarqué que le passage dans le milieu cuivrique favorise la production du pigment doré lorsque: le PÉÉPATROO RE est ensuite repiqué sur gélose nutritive.
4) Influence des différents facteurs de l'essai sur l'activité bactéricide du Glycocollate de cuivre.
ee de l'êge des germes sur lour résistance il au giycocollate de cuivre de cuivre,
Les études effectuées sur l'activité des antibiotiques d'origine fongique ont montré que la résistance d'un germe peut être considérablement renforcée par entrainement, c'est-à-dire par repiquages successifs sur milieux de pihal en PÈRE riches en. principe actif RAPIDE
En sens inverse, ‘noÿ essais nous permettent de supposer que si des germes microbiens ne se multiplient plus dans un milieu nutritif, Ces germes deviennent avec le temps, moins résistants vis-à-vis des hd E C'est du moins le Se tudion qui parait pouvoir être tirée deg essais qui sont décrits ci-après et qui ont été exécutés sur différents milieux plus ou moins chargés en substances nutrit1ves. On peut admettre qu'une colonie de staphylocoque doré de 8 jours, poussée sur LEE nutritive, contient tous ses germes
PE
sous une forme déjà vieillie. On peut en faire une dispersion très étendue, de turbidité convenable, puis, à partir de celle-ci, réaliser une dilution dans l'eau pnysiologique contenant du glycocoïlate de cuivre à la concentration en cuivre de 4 millisgrs/litre suspension notée Aj. La suspension de stapnylocoque dans la dilution de cuivre 6st mise en contact avec le désinfectant à un temps variable,
ler Essai :
On prépare 4 tubes semblables dont le premier sert à faire une numération immédiate au départ (0,5 cmS sont introduits dans 10 cms de gélose nutritive et répartis dans une boîte de Pétri, Au bout de 86 heures d'étuve à +57°C., on compte les colonies apparues sur le milieu solidifié. Les trois autres tubes, contenant la suspension de stapnylocoque À dans la solution de cuivre, sont placés dans une étuve à +57°C,., pour y subir le contact avec le cuivre, de durée progressivement croissante, soit :
(TaborN°52).0 161 mie (Tube: NPLS NS SON etes
Après ces durées de contact, on ajoute la gélose puis on remet 56 heures à l'étuve à +57°C, et on procéde aux numérations comme 11 a été dit plus haut, afin de vérifier le degré de résistance des germes vis-à-vis du cuivre.
RESULTATS obtenus :