avons opéré

- En iieu liquide par la tecnnique III (eau peptonée - contact désinfectant de 48 heures à +57°C - et recherche de la concenbtration bactéricide par repiquage sur milieu solide).

FA

- En milieu solide par la technique IT (sur eau peptonée gélosée contact désinfectant de &6 neures a HOTEL avant de dénombrer les

colonies apparues).

Les deux milieux ont conduit à des conclusions Patton le mélange des glycocollates de cobait et de cuivre présente une activité bactéricide ou antigénétique intermédiaire entre Bis que présente chacun d'eux pris séparément,

À haute concentration en germes, soit 11,9 x 10° par tube, l'effet bactéricide vérifié par repiquare sur milieu solide a été obtenu par 9,75 ce de glycocollate de cuivre D = 19 par tube; par ds7orccade glycocollate de cobalt D = 1 par tube et par 1,490 ce du mélange des deux glycocollates D = 10.

Ce mélange ayant été fait dans les proportions de :

.&B ce de glycocollate de cuivre GCu D = 19 2 ce de glycocollate de Cobalt GCb D = 10

Les essais sur milieu solide ont conduit de même aux résultats suivants :

À) Glycocollate de cuivre.

B) Slycocollate de cobalt,

CG) MHélanre (8 ce êe À + 2 ce de B),

TASLEAU XLVI

ACEop aéehnreptents, LD du g1 cocollate de cuivre

quantités intro- NUMERRATIONS APRES 06 HEURES a 57°C

duites en cms par tune =: À B C GCu &Cb GCb + GCu

0 témoin TN ETOO NE 1190 "Te 0,40 à D = 190 | 1104 1200 1220 0,75 " 900 1180 Fr en 1,90 L 148 1200 900 1,40 y 99 | 1140 : 150 OS 20 D Dis 1 ce HÉRQr ES 1100 (e) 0,40 Ë 0 849 | De 1,090 n 0 198 0

AOÛ

Ce tableau met bien en évidence la plus grande activité du cuivre comparée à celle du cobalt et le fait que l'association des deux désinfectants n'a pas d'effet favarable sur cette activité

En ce qui concerne l'association du” rlycocollate de cuivre et de zinc nous n'avons pas fait les essais corrélatifs à Ceux qui viennent d'être décrits.

A joutons avec la souche de aLAPhy1ocoqus an nous a servi dans tous les essais précédemment décrits que les comparaisons décrites ont été faites, et dans tous les cas, en opérant sur des cultures jeunes de 24 heures.

B - ACTION DU GLYCOCOLLATE DE CUIVRE SUR D'AUTRES BACTERIES QUE LE STAPHYLOCOQUE.

1) Action sur Escherichia Coli et Éebueeneene es à son action sur Staphylococcus aureus

Dans chacun des deux Cas, nous avons opéré sur une suspension dans l'eau pseptonée gélosée et additionnée de glycocollate de cuivre en quantités croissantes (Technique II) après mise

à l'étuve, des boites de FT on a obtenu les numérations suivantes :

TABLEAU XLVIXI . | Comparaison de l'activité du Glycocollate @e cuivre sur Escherichia Coli et Staphylococcus aureus

GCu D = 1 intro- |Numérations des colonies après 56 heures à +570C duit par bofte

STAPHYLOCOQUE DORE | E.COLI (indolorène) Zéro (témoin) 1.440 7.090 environ 0,20 cmô ; 840 5,000 0,40 " 245 2,700 " 0,60 | 25 . | AT EL EST 0,80 " 14 1,800 n 1,20 " Fi 0 1:500 1,60 " 0 | 1.500 Hi] 2,00 " | o 1,400 Ë 2,40 0 15200 2

s TOY -

| Donc le Colibacille est beaucoup moins sensible à l'action du glycocollate de cuivre que le staphylocoque. Cependant l'action antigénétique sur lui est bien nette dans l'intervalle de 56 neures.

Cette comparaison a été doublée plus tard avec une autre eau peptonée gélosée en utilisant la même technique IT et a conduit a des conclusions analogues, . "

ABLEAU XLVIIT

Com arai son de l'activité du Glycocollate de

cuivre sur Escherichia Co 1 ot Staphylococcus aureus

GCu D = 1 STAPHYLOCOQUE COLI O (témoin) ; - 8.060 | 1,680 0,1 cm8 | MAÉ : 12,820 PT ; 0 800 Da t 0 36 0:75 2 0 "26 1,00." ) 0

Un essai de désinfection dans l'eau peptonée (Technique III) que nous ne rapporterons pas en détail, a confirmé encore la conclusion précédente. En eau peptonée, nous ne sommes pas arrivés à la désinfection totale par addition @e 1,6 em de solution mère de glycocollate de cuivre sur le Colt baciile, alors que 0,2 cmS amène la stérilité sur le staphylocoque, toutes conditions égales d'ailleurs, à | otre

à Un nouvel essai par la technique III a été fait sur le. Colibacille, mais dispersé d'une part dans de l'eau peptonée, d'autre part dans du sérum ty dallisé, en rer ne 9 : 500 germes par tube. Aprés contact désinfectant de 48 heures, des prélèvements

ont 6té faits pour rechercher s r gélose, les concentrations bactéricides, Elles ont été du même ordre, soit :

0,40 cm5 GCu D = 1 dans le sérum

GTR" "dans l'eau peptonée.

2) Action du Slycocollate de cuivre sur Pseudomonas aeruginosa.

__ : Cet essai a été conduit dans des conditions identiques aux précédents par la technique III, mais la détermination de la densité microbienne a été omise sur les tubes témoins. Le contact désinfectant de 48 heures slest fait dans l'eau peptonée ou dans le sérum tyndallisé, Dans le sérum la concentration bactéricide

a été de 1,75 cm GCu D = 1. Dans l'eau peptonée- elle n'a pas été atteinte par 2 cmS de GCu D = 1.

Get. examen a êté repris sur eau peptonés gélosée (milieu solide) par la technique IT; le témoin contenait 5,500 germes par tube, ce nombre était le même quand la numération de chaque boite

avait été faite après 24 heures, 48 heures ou 96 heures d'étuvage

à +37°C, Maïs les résultats DePpArA Ie Sent que tardivement et quanc la concentration en désinfectant Ë] élève suffisamment dans chaque tube, Ainsi pour 0,75 cmS de GCu D = 11 là boite de Pétri présente 38 colonies après 24 heures d'étuve, ‘480 après 40 heures et 1450 après 96 heures, Cependant la désinfection a été obtenue quand on a atteint 1 cmS de GCu D = ], Alors aucune colonie n'est apparue sur la gélose nutritive quelle que soît la durée de l'étuvage :

24, 48 ou 96 heures,

$) Action du Glycocollate de cuivre sur Streptococcus pyogenes et désinfection au £lycocollate de cuivre -

Dans cet essai aussi nous avons procédé identiquement aux deux essais qui viennent d'étre décrits, en utilisant la même

j techniques 111. La concentration bactéricide a été de :

* 0,40 cm5 GCu D =.1 dans 10 cm5 d'eau peptonée ccet 0,76 A dans 10 cm de sérum tyndallisé,

Donc beaucoup plus faible dans le premier cas que dans . second, Ici non plus, la densité microbienne des tubes témoins n'a été l'objet d'une détermination numérique. Dans les essais précédents, sur le bacille pyocyanique et le streptocoque, la . comparaison simultanée avec le staphylocoque n'a pas été faite parce que l'action du cuivre s'est révélée nos moins Mare que lors des essais préliminaires.

17e Action du a nue de cuivre sur banthelte types.

“ Nous résumerons comme suit les essais que nous avons réalisés. Un premier essai a été effectué par la technique IIT par culture en eau peptonée contenant des concentrations LEE a bles en glycocollate de cuivre, d'un tube à l'autre. |

Il nous a fallu L cc de solution mère (GCu D = 1) pour 10 cc d'eau peptonée, pour arriver à l'effet bactéricide en 48 heu: res à +88°C., constaté à la fois par l'absence de toute turbidité et de culture et par repiquage sur eau peptonée gélosée,

Ceci correspond, en cuivre métal, à une concentration bactéricide de 250 millgr par litre. Cet essai a été Jen avec les mêmes résultats.

Nous avons ensuite opéré en milieu solide (eau peptonée gélosée) technique II permettant des numérations après un contact désinfectant de durée fixe (48 h, à +57°C) en présénce de concen- PeRcions en cuivre variables,

» $ s Nous avons ensemencé une suspension obtenue à partir d'une culture de 24 neures ans l'eau peptonée, | -

0,5 ce de cette culture convenablement diluée dans l'eau distillée D = 10.000 ont été ensemencés et soumis aux numérations après le contact désinfectant. |

TABLEAU XLIX Action désinfectante du Glycocollate de Cuivre sur E,.TYPEOSA Résultats obtenus Numérations après 48 H. à 97°C concentrations sur plaque de gélose en GCu D = 1 Témoin 0 | 1940 9,2 ce 1929 0,4 ce 1080 DEAD 1100 1, -0 1040 1,59 | 1120

Donc l'activité désinfectante du glycocollate de cuivre sur le baciile typhique végétant en milieu liquide existe, On peut atteindre l'effet bactéricids par le GCu en 48 neures à +58°C, en milieu nutritif avec des concentrations élevées en cuivre, soit : 250 millier/litre. | |

Mais à la surface du même milieu solidifié, on n'atteint pas d'effet bactéricide nême avec des concentrations beaucoup plus fortes, | | À

5) Action désinfectènte du Glycocollate de cuivre sur les spores dé Bacillus subtilis.

j > . Essai de désinfection par le GCu d'une eau peptonée gélosée apres avoir êté ensemencée par les spores du B. subtilis.

Pour réaliser une suspension de spores, nous avons opéré selon la méthode classique : culture sur gélose pendant 48 heures à +57°C, permettant la production de spores, ;

LA partir de cette culture, on effectue une suspension dans l'eau stérile présentant une turbidité égale au tube de Kingsbury a 0,2 gr d'albumine par litre,

Dans des tubes d'eau peptonée rélosée contenant des quantités variables de GCu, on introduit un volume égal de cette sus-

pension et on tue les formes vérétatives, sans détruire leurs 5pores, on chauffant les tubes pendant dix minutes au baîin-marie bouillant. Au bout de ce temps on verse le mélange de chaque ture dans une boîté de Pétri, on laisse refroidir et propose à la numération des colonies après 26 heures d'incubation à +720

On constate ainsi qu'avec un volume de 9,49 cmû de solution pure de elycocollate de cuivre; le pouvoir de sernination des spores a Su (soit une concentration de 190 mgr de Cu par litre de milieu),

TABLFAU L

Action âésinfectante ésinfectante du slycocollate de cuivre sur les spores & spores de Bacillus subtilis,

Glycocollate de cuivre Numération Témoin O0 ; 28 0,19 cc pur DER 7.

0,29 14 0,40 : 0 APS 1e 9

Dans cette expérience, on a constaté que los colonies s'étalaient très op ous de sorte que pour faire des numérations convenables, on n'a pu faire intervenir de nombreuses colonies. En résuné, le cuivre peut donc paralyser le développenent de spore dans les conditions indiquées.

C — INFLUENCE DU GLYCOCOLLATE DE CUIVRE : SUR L'ACTIVITE DES BACTERIOPHAGES,

Nous avons procédé à deux études, la première sur une souche d'Escherichia Coli et du phare correspondants la deuxième, .sur une souche de staphylocoque doré et du phage correspondent. Ces échantillons nous ayant été procurés par l'Institut Pasteur de Paris,

1) Etude du Coliphage -

A la réception, les échantillons ont été ravivéss le colibacille a été mis en culture dans l'eau peptonée, Au bout de 18 heures de poussée à. l'étuve, le phage a été introduit, puis après 6 heures a +57°C, on a opéré la filtration sur bougie Chamberland L5 destinée à séparer le phage du coli.

Le filtrat contenant le phage est transporté à nouveau sur une nouvelle culture âgée de 18 heures, et ainsi de suite,

Cet ensemble d'opérations est réalisé une fois par jour, et ainsi d'exalte le pouvoir lytique du phage en ensemençant & | chaque essai 0,20 cm5 de filtrat dans 10 cm5 de culture du coli:

Après une semaine de ces passages successifs, les culture: neuves de colibacille s'éclaircissent tres rapidement sous l'influei ée du phage; alors, on peut passer à l'essai qui constitue le but

des opérations. ;

ORGANISATION DE L'ESSAI en eau peptonée :

Tube N° 1 (témoin) - 10 cm5 d'eau peptonée ensemencée avec E.Coli - placé à l'étuve à +37°C,

Tube N° 2 - Comme le précédent, mais additionné en plus de 0,20 cm de filtrat de pnage.

Tube N° 3 - Comme le N° 2, reçoit en même temps que le phage, une quantité de glycocollate de cuivre telle qu'il représente une solution D = 150 par rapport à la solution mère,

Tube N° 4 - Représente une dilution en GCu D = 500.

=: Les 4 tubes amenés au même volume final avec de l'eau stérile, contiennent tous un cm® d'une culture jeune (18 heures) d'E, coli au départ de l'essai, Ils passent pendant 24 heures à l'étuve à +579C. | à