EXTENSION DES PRÉCÉDENTES RECHERCHES

Dans les études qui précèdent, nous avons limité nos essais à un champ de recnerches relativement étroit que nous voulions examiner en profondeur avant de penser à des extensions possibles : action du cuivre sous forme de glycocollate vis-à-vis d'un germe redoutable par la grande variété des affections qu'il détermine, par la diversité de ses moyens offensifs vis-à-vis de l'organisme humain : le staphylocoque, Nous avons voulu d'abord examiner les modalités de cette désinfection compte tenu des principaux facteurs qui peuvent intervenir dans sa réalisation.

11 nous a semblé en effet d'après les renseisnements bibliocrapniques dont nous disposions, que narmi les désinfectants internes d'origine métallique, le cuivre était un des plus intéressants à étudier scientifiquement en raison de sa toxicité modérée pour l'orsanisnme humain,

ais 11 était inévitable que la curiosité s'étende à des domaines situés à côté de celui où s'exercent les recherches principales,

Cfest pourquoi nous parlerons maintenant de recherches succinctes dans lesquelles nous avons examiné d'une part l'action de quelques autres glycocollates métalliques sur le staphylocoque, puis l'action du glycocollate de cuivre sur quelques gerrñües patnosènes pour l'homme autre que le staphylocoque, puis l'action du gliycocollate de cuivre sur l'activité du bactériophage et enfin l'action du #lycocollate de cuivre an association avec des antibiotiques,.

À - ACTIVITES BACT METALLT

ERICIDE OU BACTERIOSTATIQUE D'AUTRES LA CAPOMENNEE UES SUR ?STAPHYLOCOCCUS AUREUS

Parmi les 9olico-éléments existant dans les organismes vivants nous nc pouvions envisaser ques ceux donnant des ions à caractères métalliques qui ont révélé des propriétés inhibitrices à certaines concentrations, Mais 41 nous fallait aussi mettre en oeuvre äes glycocoïlatoes assez stables pour que leurs solutions résistent à L'hydroiyse aux températures de stérilisation nécessaires,

Ainsi une études préliminaire nous a-t- elle amenée à 6élimiaer lo fer, l'aluminium, et le manganèsa-divalent, pour retenir seu lement les slycocollates de cobalt, et de zinc,

ee G& -

Ce sont des solutions équivalentes à celle du glycocollate Ge cuivre (Su D = 1) que nous avons mises en oeuvre sous forme de solution isotoniîique avec le sérum sansuin,

Calcul de la composition à donner à une solution, pour la rendre

sensiblement isotonique avec le sérum sansuin,

Le calcul de solutions isotoniques se fait facilement à EE de la formule connue :!

At = Le RAP OORLTE (formule n° d}

où ? est le poids en gammes de la DnPEÈrse considérée, par litre äe solution.

M est le poids de la molécule de la même substance et i est un coefficient dépendant Gu degré d'ionisation de la substance dans les conditions considérées.

La valeur de 1 est fournie par des mesures électriques et veut être rrouvée dans des tables de constantes physiques.

De la formule n° 1 on tire :

L'abai ssement cryoscopique At en Gerrés centicrades due à chacune des substances dissoutes est de :

HE De (Sous 1

Pour les substances dont le degré d'ionisation est sensiblement nul on peut poser : i = 1.

Pour le chlorure de sodium, aux concentrations utilisées dans les solutions injectables, les mesures POUTALSAeRT rie 1, 0.

Pour s0,ha

Pour s9,Cu a à

Pour le glycocolle i = 1]

I1 est donc facile de calculer avec une approximation suffisante l'abaissement cryoscopique total fourni par une solution LES RRRLe c'est-à-dire :.

D.=1 At). + at (2) + At(s)

S'il s'arit de préparer, par exemple, une solution de glycocollate de nickel :

Après avoir préoaré le sel en question par double décomposition £ à partir du sulfate de nicxel et dissous une quantité équivalente à celle du glycocellate de cuivre dans la solution

mère, on ajoute les solutions salines Na0l ou 50,Na. destinées à réaliser un abaissement cryoscopique total ST'At == 0,584

Les trois métaux cuivre, cobalt et zinc sont tous les trois de puissants effacteurs d'enzymes, jouent à ce titre un rôle biologique importan:, de sorre quiil était tout-à-fait indiqué de les comparer dans le cas qui nous occupe.

Aussi, a-t-on réalisé des solutions ds 215 06001 Le ag de. Cobalt, de.Zinc ou de Kickel possédant la même concentration moléculaîire que le glycocoliate de cuivre GCu D = 1 à qui on doit les comparer, La chose est facile à partir des sulfates de compositions chimiques bien définies et de EYES

Nous parlerons donc de solutions GCb D'= 1} js: GZn D'=: Lei GNi D = 1, sur lesquelles nous pourrons opérer par les trois techniques décrites, pour définir : vitesse de désinfection et concentration bactéricide vis-a-Ÿis du germe étudié, Les essais suivants seront. résumés en nous servant des notations indiquées précédemment pour les techniques opératoires suivies : la densité bactérienne . réalisée, la concentration bactéricide, .

1) Activité du glycocollate de cobalt,

a) Etudiée par la technique III sur 8,4, 107 germes dispersés dans 10 cm5 de milieu liquide.

Effet Pots obtenu en 48 heures par 0,75 emS G6b D = æ ajouté.

b) Etudiée: par technique IT sur eau peptonée gélosée, 56 h. de culture =à +5700.

Boîte témoin (sans glycocollate de cobalt) 1600 colonies. Effet bactéricide obtenu avec 1 cmS GCb D = 1

c) Comparaison des deux glycocollates de cobalt et de cuivre comme activité bactéricide,

Désinfection d'une eau peptonée massivement: rente. LES du: staphylocoque (11,9 x 106 germes par tube).

Opérations menées en même temps et dans des conditions expérimentales identiques par la technique LET.

Résumé des résultats obtenus en 48 heures de Dotac titre te ?

2°) Avec le glycocollate de culvre : Effet bactéricide obtenu avec 0,75 cm GCu D= 10,

La combinaison cuivrique est donc beaucoup plus active.

5°) Un mélange des deux glycocollates s'eat montré d'une activité intermédiaire entre les deux Horse par cette technique * Lil.

Le même essai a été repris par la technique LT (utilisation : Au milieu gélosé) et a conduit à des conclusions tout à fait RLelpaues, c'est- à-dire à

19) Avec Le clycosollate de cobält : (aucune a apparus en 48 heures de culture) avec 1, 40 Cmé GCb D = 1.

2°) Avec le glycocollate de cuivre + avec 0,20 cm du mélanre Je contenant la même quantité équivalente que les précédents.

2) Activité du Glycocollate de’ zinc

Bien que. les sels de zinc soient fortement toxiques et bien que la solution de glycocollate de zinc précipite les albumines du Sérum à des concentrations où les sels de Cb et de Cu donnent des mélanges limpides, nous avons fait des essais correspondants à ceux décrits pour le glycocoliate de cobalt.

ler Essai :

Ainsi l'essai n° st par la téonntqus III s 0,5 cmS de suspension de staphylocoque dispersés dans 19 cms d'eau peptonée, Gzn ajouté en concentration croissante d'un tube à l'autre; contact désinfectant de 48 heures à +57°C et recherches de la concentration bactéricide ‘par numérations. Celle-ci a été obtenue par 0,75 cm GZn D = 1, tandis qu'un essai mené dans des conditions identiques mais avec le glycocollate de cuivre, a fourni. pour concentration bactéricide : 0,40 cm$ GCu D = 1. Résultats obtenus au départ avec la même densité microbienne de 1,600 germes par 0,5 cm dieRu peptonée contenue dans chaque ture,

2ème Essai :

at Dans une autre expérience en employant la techniaque IT Désinfection de 56 heures sur eau peptonée gélosée et avec divorses concentrations en désinfectant, puis numérations successives des bactéries survivantes, #ucune colonie avec à : 0,40 cms

CZn D = 1 et à 0,75 cmS GCu D = 1 par 10 cm2 d'eau peptonée gélosée

Essais sur le élycocoliete de nickel : Ils ont été abandonnés car a solution de glycocollate de nickel n'est pas stable en ampoules

et précipite à la stérilisation,

5) A Activité de drndocieties de glycocollate de cuivre et de cobalt