RAPPEL DE QUELQUES GENERALITES SUR LE PROCESSUS DE DÉSINFECTION

Pour étudier l'activité antibactérienne d'une substance, i1 y a lieu de prendre en considération de très nombreux facteurs dont chacun peut intervenir pour sa part. On peut classer comme suit ces divers facteurs : |

erme infectant

1°) Facteurs dépendant dus Nature du germe, de ses toxines, importance de l'inoculet dans le milieu de culture choisi, |

2°) Facteurs dépe

ndant des moyens de défense de l'organisme SPAS va Te

à Activité de la diapédèse, de la phagocytose par les polynucléaires ou les macropnages, par les phages de d'Hérelle; pouvoir neutralisant des anticorps sécrétés vis-à-vis des toxines du germe infectant,. :

50) Facteurs dépen

dant du médicament injecté

; Le Concentration dans l'organisme en fonction du temps écoulé après l'injection. Activateurs ou inhibiteurs qu'il trouve dans l'organisue injecté,

Les médicaments chimio-tnérapeutiques destinés à l'utili-

sation interne sont désignés par des termes divers : antigénétiques antibiotiques, bactériostatiques, inhibiteurs, antiin ectieux,e6etc.,

M. Tiffeneau (28) a précisé les définitions suivantes dans son traité de pharmacodynamie : "Les antiseptiques sont considérés comme désinfectants avant tout externes, et les médicaments Chimiothérapiques comme des désinfectants internes, étant entendu dit J'auteur, qu'entre les deux catégories 11 n'y a aucune diffé” rence essentielle. Les mêmes substances pouvant être suivant les doses antiseptiques ou désinfectantes, ou infertilisantes.

Os e.

Avèc plus de précision, indépendemment des conditions d'application du médicament, on peut distinguer actuellement d'une part une activité "bactéricide" qui consiste dans la suppression définitive .de la vie des micro-organismes, lesquels ne peuvent plus cultiver même s'ils sont transportés sur de ren favorable, et d'autre part une activité "antigénétique" u"bactériostatique" qui consiste simplement dans Hd de la ta li tion bactérienne, Le temps intervenant, il n! a a pas de solution de continuité entre ces catégories.

Dans l'étude thérapeutique de tels médicaments, 11 ya lieu, comme 11 vient d'être indiqué de préciser lies différentes va riables qui interviennent : en particulier les doses (c'est-à-dire les concentrations dans l'organisme), ia nature de l'agent infectant, et l'importance de l'inocubat, la durée d'action du médicament (compte tenu de son élimination et de sa destruction dans le temps). La question se présente sous un aspect dynamique et non statique et c'est le résultat d'ensemble que les essais thérapeutiques constatent dans la pratique.

Ë,. Tiffeneau définit "dose antipénétique ou bactériostatique": la concentration juste suffisante pour empêcher le développement des microorganismes dans un milieu de culture approprié, bien défini, et à la température optima. La ose "antibiotique" ou “bactéricide" d'une substance est la quantité juste suffisante pour que les microorganismes placés à son contact pendant un temps limité et relativement court, ne puissent plus se développer à nouveau

lorsqu'on les transporte dans un milieu favorable et à la températu-

re optima. Le terme "antibiotique" est réservé généralement aux substances issues d'organismes vivants bien que leur action se borne le plus souvent à une bactériostase.

S. Lambin ayant, avec J. Régnier, étudié particulièrement les conditions des Techniques d'Essai des substances antiseptiques et notamment l'importance de la concentration en germes, a montré la nécessité de définir avec précision les conditions utilisées. PORE. définir la dose bactériostatique et la dose bactéricide lorsqu'on les détermine par la métnods des dilutions, Il faut, en effet, pouvoir comparer directement ces deux doses pour juger de la validité des résultats obtenus; sinon on sie d'obtenir des valeurs erronées.

Les définitions suivantes ont été adoptées par ces auteurs :. | | ;

Dose antigénétique ou bactériostatique : Dose minima de la substance étudiée qu'il faut introduire dans un litre de bouillon peptoné salé pour y empêcher le développement de germes ensemenchs à raison de aix millions par contimétre cube (cette dose est exprimée en grammes pour mille centimètres cubes).

Dose bactéricide ou antibiotique : La dose minima (exprimée en grammes par Iître) qui, laissée en contact pendant 15 minutes avec une suspension contenant 500 millions de germes par CMS,

ne

et dans un milieu donné, empéche ces germes ds donner une suoculture lorsqu'on transporte un dixième de cm du mélange dans 5 cmd de vouillon nutritif,

D'autres conditions peuvent être adoptées selon le problème particulier qui se pose.

Mais il était utile de rappeler leur nécessité, car certaîns autours emploient dans "un sens imprécis les termes mentionnés Nous nous garderons d'utiliser le terme "antibiotique" maintenant adopté en général pour une @ésignation particulière et parlerons seulement. d'action “antigénétique" ou "bactériostatique" et d'action "bactéricide".

Résistance naturelle de l'organisme :

Nous remarquerons maintenant que la dose antigénétique “in vivo" doit être généralement considérée comme inférieure à ce qu'elle est "in vitro" sur un milieu de culture approprié. En effet dans un organisme vivant, quand la vitesse de multiplication d'un germe plus ou moîns virulent s'abaisse sous l'influence de doses

“ convenables d'un désinfectant, les réactions de défense naturelles de l'organisme interviennent aussi à côté pour faire rétrogradèr l'invasion microbienne, Inversement, quand l'époque du recul de l'invasion primitive est arrivée, il faut encore tenir compte d'un phénomène actuellement bien connu, celui de la possibilité de réinfection secondaire tardive. |

Parmi les germes envahissants, il en est qui devenus de plus en plus résistants les uns que les autres à l'action de l'antigénétique employé, peuvent se réfugier dans certains organes où 11s sont comme à l'abri du médicament. La rate en particulier parait apte a fournir de ces refuges constituant des foyers permanents d'ou peuvent repartir quand les circonstances sont redevenues favorables, de nouvelles infections consécutives. A. Boivin et A. Delaunay (1} ont montré que des "infections occultes" peuvent être mises en évidence par ensemencement aseptique des organes ainsi infectés. Cela explique aussi que certains antigénétiques trés actifs se montrentdans certains cas, vis-à-vis d'un ferme donné, des médicaments moîns efficaces que d'autres,

Dans le même ordre d'idées, nous rappellerons que dans la lutte antisyphilitique, la pénicilline, aprés s'être révélée comme étant aux premiéres injections d'une activité foudroyante vis-à-vis du tréponème ne donne pas de résultats décisifs, et que des récidives de la maladie apparaissent qui aménent alors le médecin à revenir aux vieux traitements classiques. Les bismuthiques vont compléter l'action de la pénicilline dans la syphilis, comme 1° cuivre complète son action dans le traitement des staphyloccoe-. cies. | | os

Les traitements actuels des maladies infectieuses tendent

vers une Combinaison fjudicieuse des moyens connus, ordonnés dans le temps et compte tenu des constatations cliniques et des épreuves

ali

de Loire sur la résistance FN germes infectants aux antigénétiques proposés.

De nos jours la liste des antibiotiques dtorigine fongtque proposés s'accroît sans arrêt. |

Aussi la thérapeutique a-t-elle fort à faire pour choisir entre eux et déterminer le: plus indiqué pour chadue cas particulier, Bien’ des facteurs interviennent alors selon la nsture st l'abondance des germes et la lésion qu'ils ont créée, À la période empirique a succédé une période scientifique utilisant les essais de laboratoire dans la conduite des opérations. Il arrive augsi que dans les lésions observées, plusieurs fermes apparaissent consécutivement et doivent étre combattus par des moyens distincts et rapidement sélectionnés.

La question apparait complexe à la lumière des faits actuellement connus et 11 y a tout lieu de penser que nous ne sommes encore qu'à l'aurore de l'étude scientifique de la désinfection rationnelle,

Cependant dès 1949, dans un très remarquable travail d'ensemble R, äartin et ses Collaborateurs formulaient quelques précautions à observer dans l'utilisation des antibiotiques. La résistance progressivement croissante. d'un germe à l'antibiotique entraine la nécessité de mesurer cette résistance sur le germe infectant, l'adaptation de la dose active à la limite des doses tolérées, et le dosage du médicament pour suivre la concentration de celui-ci dans, les liquides de l'organisme. On est souvent conduit maintenant à utiliser l'association de plusieurs AASANEARES ques,

La désinfection naturelle spontanée d'un organisme par l'activité

es phases de d'Hérelle ou par l'activité phagocytaire :

I1 nous semble ici devoir rappeler d'abord un très important travail d'André Raîiga qui a remis en mémoire les travaux de d'£ lérelle et de ses successeurs (21),

| Pour cet auteur les phages de d'Hérelle fourniraient la défense naturelle et décisive dans la lutte des,organismes contre la plupart des germes pathosènes envahisseurs mais 11 existe aussi des antiphages antagonistes contre lesquels du reste il est possible de RE par. 1'autohémotnérapie.

- La bactériostase obtenue par les produits fongiques sulfanidos ou tous autres antibiotiques n'aboutirait à la guérison que si la bactériophagie naturelle intervient en fin de compte.

En ce qui concerne la part des: phagocytes dans lé stéri- lisation de l'organisme malade, elle aurait été probablement surestimée. Lors des guérisons, les numérations globulaires fournissent des résultats contradictoires. En effet, on observe des guérisons ‘avec des leucocytoses basses comme avec des leucocytoses élevées,

Enfin dans les épidémies, on ne peut guère concevoir la HAEtoA collective d'une population ainsi expliquée.

Dans cette remarquable critique, André Raiga met en balance tous les éléments connus qui entrent en ligne de compte dans la défense antiinfectieuse.

11 rappelle aussi les précautions à prendre dans l'utilisation des antibiotiques : choix de l'agent actif, faits de Nrésistance" des germes, faits d'intolérance des organismes infectés vis-

à-vis de l'antibiotique utilisé, faits d'annihilation des défenses naturelles dues aux phages sous l'action des antibiotiques développement de propriétés "antiphages"

En denors de l'intervention des phages et des divers phagocytes dans la destruction naturelle spontanée des bactéries infectantes, il y a lieu de parler aussi de la défense contre les toxines. des bactéries, laquelle ressort, on s'accorde généralement

a l'admettre, de l'immunité humorale.

L'organisme infecté leur oppose les anticorps qu'il élabore et qui neutralisent le caractère toxique des antigènes bactériens anticorps dont la nature globulinique n'est plus discutée. Divers organes chargés de sécrétions actives : moelle osseuse, cortico-surrénales, foie, jouent sans doute aussi un rôle important dans la lutte antiinfectieuse (6).

Tels sont les divers facteurs qui peuvent être sollicités dans la thérapeutique des ARE ENCE C'est un domaine immense dont le présent travail n'examine qu'une: partie nettement délimitée.

Parmi tous ces facteurs, en effet, 11 est bien probable que selon le cas clinique, celui qui intervient avec le plus d'efficacité dans une infection quelconque varie et doit varier d'un cas à l'autre, Il est possible qu'il y ait entre eux interférence ou synergie. 11 séraît particulièrement intéressant de connaître la part des pnages et la part des phagocytes dans l'évolution des procédés de désinfection.

Ceci nous amène à parler à. présent de considérations récemment mises en avant dans les milieux médicaux et qui ont résulté Ans Diereattes très étendue des antibiotiques fongiques

n. vivo

‘Sur les appréhensions que suscite l'emploi des antibiotiques dens

la lutte antiinfectieuse :

Depuis quelque temps en effet l'emploi Asso et insuffisamment contrôlé des antibiotiques a fait jeter. quelques cris d'alarme tant dans le domaîne de la médecine même que dans celui de la médecine vétérinaire,

à On sait, par exemple, que le lait offert à la consommation contient assez souvent de la pénicilline car le paysant utilise couramment celle-ci à présent dans le traitement de la mammite des vaches laitières. Or il ne faut pas oublier que l'on est loin de connaftre encore les conséquences que pourraient avoir sur l'organisme des intoxications occultes trop souvent répétées.

L, Duchon (5) souligne que les phénomènes de base de l'immunité, la phagocytose et la pnagocytolyse bactéricide paraîssent compromise par l'introduction des antibiotiques. Ceci résulte pour lui de la mesure de ce qu'il désigne sous le nom “d'indice d'activité cellulaire" qui se trouve très généralement abaissé par des traitements et ceci d'une facon durable. De cet affaissement des éléments nobles, chargés de la défense antimicrobienne peut résulter selon lui une extension des épidémies qui expliquerait certaines épizooties récentes (par exemple fièvre aphteuse), La conséquence générale de l'antibiothérapeutique mal conduite étant précisément l'extension des microorganîismes restant dans les êtres vivants.

Velu (5) a présenté une parfaite mise au point des différents aspects de ce problème, |

B - CINETIQUE DE LA MULTIPLICATION DES BACTERIES SUR UN MILIEU DE CULTURE DE VOLUME LIMITE,

I1 existe trois types de techniques générales utilisées. pour suivre cette multiplication des bactéries :

- La première utilise des numérations successives sur lames des bactéries présentes dans des prélèvements effectués à différents temps de la culture.

- La deuxième mesure (grâce à des népnélomètres à cellules photo-électriques) Ifaugmentation de la turbidité résultant de la multiplication des bactéries dans un milieu choisi, Elle suppose la connaissance préàlable du rapport entre le nombre de bactéries en suspension dans le milieu observé et la turbidité produits, Les deux méthodes précédentes ont ce caractère commun Ge mesurer le nombre total des bactéries (vivantes ou mortes) en suspension ans le mi-

lieu.

- La troisième méthode utilise des numérations successives

sur milieu solide (retour à la méthode de KO0H). Elle consiste à prélever à intervalles donnés, dans le milieu où s'effectue la culture, le matériel des numérations à accomplir et à rechercher le nombre de bactéries capables de donner des colonies, Les résultats diffèrent des précédentes par défaut, car ils ne font intervenir

que les seules bactéries vivantes et FPS de se multiplier sur un milieu neuf,

Chacune de ces métnodes présente son intérêt PEAR