INSTRUCTION POUR LA NUMÉRATION DES GLOBULES DU SANG
Prendre, à l'aide de la grosse pipette {fig. 2, A), 500 millimètres cubes de sérum artificiel et y. ajouter, à l'aide de la petite (%. 2, B), 2 millimètres cubes de sanp:. On obtient le sang chez Thomme en faisant une légère piqûre avec une lancette au milieu de la pulpe du doigt. Le sang sort désqu'on comprime légèrement le bout du doigt cl oh l'aspire au fur et à mesure avant qu'il ait le lemps do s'épaissir à l'air.
Comme sérum artilicicl on peut employer le liquide amniotique iodé, en ayant soin délaisser évaporer l'excès d'iode avant de s'en servir.
Agiter le mélange avec la petite palette en faisant rouler celle ci entre les doigts de façon à lui imprimer un mouvement rapide de va-et-vient {fig, 3).
Déposer une grosse goutte du mélange au milieu de la cellule, et placer immédiatement la lamelle en la laissant tomber doucement et d'aplomb sur la goutte {ûg. 1). Puis humecter avec un peu de salive deux des bords opposés de la lamelle et appuyer légèrement sur les quatre coins de cette lamelle de manière à ce que la salive, en pénétrant par capillarité,, forme une couche aussi mince que possible. Il est important dans cette opération de n imprimer aucun mouvement de glissement à la lamelle.
La préparation est réussie : 1° lorsque la goutte de sang dilué, transformée ainsi en une nappe de liquide à surfaces parallèles, est entourée d'un anneau d'air complet, et 2° quand
PECHEnciiES SUR l'anatomie normale et pathologique du sano. 13
il n'existe aucune parcelle importante de poussière entre les deux plaques de verre dans Tespace humecté de salive.
Le tube rentrant du microscope ayant été enfoncé jusqu'au trait d'affleurement (c'est-à-dire jusqu'au point, déterminé d'avance, où le côlé du carré gravé dans l'oculaire couvre 20 centièmes du micromètre objectif), on compte dans cinq ou six endroits différents de la préparation tous les globules rouges circonscrits par le grand carré (soit par les 16 petits), en ayant soin de ne tenir compte que de la moitié des globules à cheval sur la ligne extérieure du grand carré (%. 4).
On prend la moyenne des chiffres trouvés et, en multipliant cette moyenne par 31 000, on obtient le nombre des globules rouges contenus dans 1 millimètre cube de sang pur.
Voici l'explication du numérateur 31 000.
La grosse pipette ayant en général 6 millimètres cubes de mouillage, les 500 millimètres cubes de liquide pris avec cette pipette n'en fournissent que 494, auxquels on ajoute 2 miUimètres cubes de sang. Le volume total étant de 496 millimètres cubes dont 2 de sang, la dilution est au 2i8°. Or, comme il y a 125 cubes de 1/5 dans un millimètre cube, le numérateur doit être :
Si Ton prenait 4 millimètres cubes de sang, au lieu de 2, le numérateur deviendrait 15562,5.
Pour faire la numération des globules blancs on note tous ceux qu'on trouve dans l'étendue de deux bandes réciproquement perpendiculaires et occupant toute l'étendue de la goutte.
Pour exécuter cette partie de l'opération, on place la préparation de façon à ce que un des bords de la goutte de sang soit sous-tendu par le grand carré, par le bord gauche, par exemple, du grand carré; puis, après avoir noté l'absence ou la présence de globules blancs, on déplace la préparation de façon à ce que les globules rouges à ^cheval sur le bord droit du grand carré soient vus à cheval sur le bord opposé, c'est-à-dire sur le gauche. On a fait ainsi parcourir à la préparation l'étendue d'un carré.
14 RBCHERCHES SUR L'aNATOUIB NORMALE ET PATHOLOGIQUE DU SANO.
On examine de la sorte tous les carrés successifs contenus dans une bande transversale et on répète la même manœuvre, d'ailleurs facile à exécuter, pour une bande perpendiculaire à la première. On obtient ainsi le nombre des globules blancs contenus dans une soixantaine de carrés, ce qui donne, par un calcul analogue au précédent, le nombre des globules blancs par millimètre cube.
Exemple : soit 165 la moyenne trouvée pour les globules rouges, le nombre des, rouges, sera de :
Soit 9 le nombre des globules blancs renfermés dans 58 carrés, la moyenne sera 9/58, soit 0,155 qui, multiplié par 31 000, donne 4 805 globules blancs ' .
Le tableau suivant permet de trouver rapidement le nombre des hémateis.
Tableau pour les dilations à 2 mUlimètres cubes de sang
sur 494 de sérum.
Globules contenus
dans le carré.
Nombre
des globules
par millimètre
cube.
Globules contenus
dans le carré.
Nombre
des globules
par millimètre
cube.
Oi««a-» •••
< La pipette qui sert à prendre le sérum artificiel doit être nettoyée avec de l'eau distillée. Celle avec laquelle on recueille le sang doit être nettoyée successivement avec une solution do soude ou de potasse, de Peau distillée, puis de l'alcool, et séchéo avec soin.
Globales contenus
dans le carré.
Nombre
des globules
par millimètre
cube.
Globules contenus
dans le carré.
Nombre
des globules
par millimètre
cube.
5 092 000 4 423 000 4 154 000 4 185 000 4 216 000 4 247 000 4 278 000 4 309 000 4 340 000 4 371 000 4 402 000 4 433 000 4 464 OOÔ 4 495 000 4 526 000 4 557 000 4 588 000 4 619 000 4 650 000 4 684 000 4 712 000 4 743 000 4.774 000 4 805 000 4 836 000 4 897 000 4 898 000 4 929 000
IG
RECHERCHES SUR I.'aNATOMIE NORMALE ET PATHOLOGIQUE DU SANO.
Globules coDtenus
dans le carré.
no.
Nombre
des globules
par millimètre
cube.
5 022 000 5 053 000 5 084 000 5 il5 000 5 146 000 5 177 000 5 208 000 5 239 000 5 270 000 5 301 000 5 332 000 5 363 000 5 394 000 5 425 000 5 456 000 5 487 000 5 518 000 5 549 000 5 580 000
Globules conlepus
dans le carré.
X oXjt .....
Nombre
des globules
par millimètre
cube.
Pour faire le calcul des globules blancs, on peut utiliser le tableau suivant.
Supposons qu'on ait compté 7 globules blancs dans 50 carrés, le nombre des globules blancs par millimèlre cube se trouve à l'intersection des deux colonnes 7 et 50, soit 4,340. Dans le cas ou Ton trouverait, par exemple, 11 globules blancs dans 50 carrés, on ajouterait au nombre correspondant à 10 globules dans la colonne 50, soit à 6200, celui qui correspond à 1 dans la même colonne, c'est-à-dire G20; le nombre cherché serait donc 6820. Quand on comptera 12, 14, 16 globules, etc., il suffira de multiplier par 2 les chiffres qui correspondent à 6, 7, 8 globules.
