CHAPITRE II

Description des microorganismes.

Avant d’exposer nos recherches et nos observations, nous croyons plus simple de donner successivement ta description des espèces bactériennes que nous avons isolées et étudiées. Cela nous évitera des répétitions qui se seraient produites fatalement pour chaque cas.

§ 1 . — Microbes aérobies.

Gonocoque de Neisser (Ij. — Déjà après 24 heures de séjour à 37°, cet organisme apparaît sous la forme de petits points blancs transparents, humides, d’aspect muqueux, ressemblant parfois aux gouttelettes du pus qu’on a déposé à la surface du milieu. Les jours suivants, ces colonies grossissent, s’étalent mais restent plates, translucides. Lorsqu’on veut les prendre avec l’aiguille de platine, on constate qu’elles sont gluantes et filantes, mucoïdes; elles végètent par la périphérie. Les bords sont quelquefois finement dentelés ; le centre se dessèche et devient moins transparent. Elles sont peu adhérentes à la gélose et une goutte d’eau les enlève assez facilement. Lorsque l’ensemencement est discret, et les colonies bien séparées, elles peuvent acquérir plusieurs millimètres de diamètre ; lorsqu’elles sont très près les unes des autres, elles forment de petits points parfois confluents. Les' colonies quelquefois ne poussent pas toutes en même temps et on voit de toutes petites colonies apparaître un jour ou deux après les autres, ces dernières ayant déjà un certain volume.

(1) Nous donnons ici un peu longuement les caractères du gonocoque, surtout ses caractères de culture, parce que nos résultats diffèrent un peu de ceux donnés par quelques auteurs.

Sur plaque de gélose-sérum (procédé de Wertheim) ou sur plaque de gélose-ascite, ce microcoque donne au bout de vingt-quatre heures de fines colonies qui apparaissent comme de petits points blancgris. Examinées à un faible grossissement, ces colonies forment de petites taches finement granuleuses, jaunâtres, à bords légèrement ondulés, très fins ; le lendemain elles sont plus grosses, d’un brunjaunâtre, arrondies ou plus souvent ovales, lenticulaires ou irrégulières. Lorsque la colonie arrive à la surface de la gélose, elle devient tout à fait caractéristique. A l’œil nu, on voit une couche fine, très transparente. A un faible grossissement, on constate, au centre de la colonie, un point brun-jaunâtre, plus opaque, qui n’est autre chose que la partie de la colonie située dans l’épaisseur delà gélose ; tout autour on voit un nuage léger, très transparent, incolore, très mince et finement granuleux ; les bords sont tellement translucides qu’il est difficile de les délimiter. La partie profonde ne progresse pas, mais la colonie à la surface peut atteindre 1 à 2 millimètres de diamètre.

Ensemencé à la surface de tubes de gélose-ascite, ce coccus donne le long des stries de petites colonies plus ou moins confluentes qui ont les caractères identiques des colonies en surface décrites plus haut. Les cultures végètent par la périphérie et peuvent atteindre plusieurs millimètres quand le milieu est favorable.

Ce microcoque pousse facilement dans le bouillon ordinaire additionné d’un tiers de sérum d’ascite. Il trouble légèrement le milieu, forme une mince pellicule à la surface et un dépôt floconneux au fond des tubes.

Nous n’avons pas pu obtenir de culture appréciable dans le bouillon simple ordinaire, ni sur gélose à l’urine. Sur gélose ordinaire récemment faite, très humide, contenant encore de l’eau au fond du tube, on peut quelquefois obtenir une première culture maigre après ensemencement de pus, mais on ne peut que rarement faire des cultures successives sur ce milieu.

Les cultures ne se font qu’à l’étuve à par conséquent on

ne peut faire de culture sur gélatine solide. Nous avons fait des cultures à 37“ dans un mélange de gélatine et de liquide d’ascite ; ce

HalLK a

^mici’ocoque y pousse comme dans le mélange de bouillon et de sé rum. Si après un séjour de quarante-huit heures et plus à l’étuve, on retire ces cultures sur gélatine, on voit le milieu, qui était liquide, faire prise en se refroidissant ; le gonocoque n’avait donc pas liquéfié la gélatine.

Les cultures meurent assez facilement et on doit les réensemencer tous les huit jours. On arrive ainsi à garder vivants pendant des mois des échantillons de. gonocoques.

Dans les milieux rigoureusement privés d’oxygène, ce microbe ne se développe pas ; nous avons essayé sur gélose-ascite et sur bouillon-ascite des cultures anaérobies, jamais nous n’avons vu de développement appréciable. Il est facile de se rendre compte de ce besoin d’oxygène par une expérience très simple. Dans des tubes contenant de la gélose-ascite en couche profonde (10 centimètres de hauteur), on ensemence pendant que le milieu est liquide un peu de ce microcoque. On fait prendre rapidement la gélose par l’eau froide et on met à l’étuve. On voit que la culture se fait exclusivement à la surface et à 1 millimètre au plus de profondeur dans l’épaisseur du milieu. Toutes les parties profondes restent stériles.

Une contre-expérience permet d’arriver à une conclusion identique. Si dans un des tubes ainsi préparés et où le gonocoque s’est développé seulement à la surface, on plonge une large pipette stérilisée et que par aspiration on enlève un cylindre d’agar-ascite, on voit sur tout le pourtour du cylindre creux qui en résulte et autour de la perte d’agar, se développer des colonies de gonocoque, sur plusieurs millimètres d’épaisseur. Il suffit donc d’introduire de l’air au contact des organismes ensemencés pour obtenir leur pullulation (1).

La morphologie d-u gonocoque en culture est analogue à celle qu’il présente dans le pus, cependant il y a quelques différences. Qu’il soit en coccus isolé ou en diplocoque, il a ce caractère d’être irrégulier comme grosseur et comme forme. En effet, dans la môme préparation on trouve des éléments plus petits que les cocci observés

(1) On voit que nos résultats sont différents de ceux de Wertheim. Cet aueur considère en effet le gonocoque, comme un microbe facultativement anaérobie.

dans le pus et tout à côté des éléments plus gros. D’autre part, si on les examine à un fort grossissement, on voit que beaucoup de ces microcoques ne sont pas parfaitement ronds, ils ressemblent plutôt à de petits cubes à angles arrondis, beaucoup, surtout les gros, sont en voie de division. Placés les uns à côté des autres, ils ne paraissent pas se toucher ; ils ne sont ni en grappes comme les staphylocoques, ni en chaînettes comme les streptocoques. Ces caractères se retrouvent identiques dans les coupes.

Les gonocoques se colorent facilement par les couleurs d’aniline avec les procédés ordinaires. Ils ne se colorent pas par la méthode de Gram.

De nombreuses cultures de cet organisme ont été inoculées à différents animaux, à doses assez considérables, sans effet pathogène appréciable. De fortes doses inoculées dans le péritoine de souris ont causé quelquefois la mort avec péritonite. On retrouvait alors le gonocoque vivant à l’intérieur des leucocytes et des cellules endothéliales.

Maintes fois nous avons comparé les cultures de gonocoques retirées de sources différentes ; nous avons toujours constaté la complète identité des divers échantillons. Jamais nous n’avons trouvé d’organismes méritant ni par leurs caractères de culture, ni par leurs propriétés tinctoriales la dénomination de pseudo-gonocoques.

Le gonocoque paraît donc être une espèce particulièrement fixe.

Bacille pseudo-diphtérique. — Ce bacille a été obtenu sur les tubes de gélose ordinaire, de gélose ascite et surtout sur les tubes de sérum de bœuf.

Sur la surface du sérum, après vingt-quatre heures de séjour à l’étuve, les colonies apparaissent comme de petits points blancs, opaques ; elles sont surélevées, assez adhérentes à la gélose, et simulent absolument les colonies de bacilles diphtériques provenant de l’ensemencement direct d’une angine. Cependant, au bout de quarante-huit heures, les colonies de ce pseudo-diphtérique se distinguent de ces dernières en ce qu’elles restent plus aplaties, plus sèches, plus adhérentes au milieu, moins opaques.

Sur gélose-ascite, ce bacille donne des colonies blanches assez épais^

ses et opaques, poussant rapidement. Il se développe de même sur gélose ordinaire.

Il pousse rapidement dans le bouillon alcalin ou même légèrement acide ; il le trouble les premiers jours, et forme ensuite un dépôt blanc, épais, au fond du tube, dépôt plus lié, presque glaireux, moins sablonneux que celui formé par le bacille de Lœffler. Il y a aussi parfois un dépôt sur les parois du tube et un léger voile à la surface.

Sur pomme de terre, à 37°, il donne un enduit blanchâtre peu épais, sec, à bord sinueux; après plusieurs jours la culture devient gris sale.

Sur gélatine, il donne, en strie, un enduit blanc, épais, opaque ; en piqûre, le long du trait d’ensemencement on voit se développer de petites masses rondes, blanches, opaques, plus ou moins confluentes. Le milieu n’est pas liquéfié.

C’est un bacille de taille assez variable, rappelant les formes courtes du bacille de la diphtérie. Les bouts sont arrondis, parfois renflés. Il est immobile. Il se colore par les couleurs d’aniline et par la méthode de Gram. Il se développe aussi bien à l’abri de l’oxygène qu’à l’air libre. Il ne fait fermenter ni la maltose, ni la lactose, mais il attaque la glycose.

Les inoculations à la souris, au cobaye, au lapin, faites à maintes reprises, à doses variables et dans des conditions différentes ont montré que ce microbe n’avait aucun pouvoir pathogène pour ces animaux.

Bacille en massue de Weeks. — Ce bacille pousse, comme le précédent, sur les tubes de gélose, de gélose-ascite et surtout de sérum.

Sur la surface du sérum de bœuf, il donne au bout de vingt-quatre heures des colonies blanches semblables à celle du bacille précédent et qui, elles aussi, simulent les colonies du bacille diphtérique ; les jours suivants, elles s’en différencient par une plus grande sécheresse, elles restent plus minces, deviennent cassantes, à bords légèrement sinueux.

Sur gélose-ascite, on obtient après vingt-quatre heures, de petites colonies blanches, beaucoup moins épaisses que celles du pseudodiphtérique précédent, elles se développent plus lentement et sont toujours moins opaques.

Sur gélose ordinaire, les colonies sont bien différentes. D’abord identiques à celles du streptocoque pyogène, elles sont très fines et transparentes. Elles poussent lentement et deviennent ensuite grisâtres, très sèches, fendillées ; les bords sont alors très dentelés, presque dendritiques.

Sur gélatine à 20° il ne pousse pas, à 24° on obtient très lentement de petits points blancs à peine visibles et qui restent extrêmement petits.

Il ne trouble pas le bouillon, mais donne un fin précipité poussiéreux, peu abondant, qui tombe au fond du tube.

Fig. 1. — Bacille en massue de Weeks (culture pure). Obj. 1/12. Ocul. 4.

On ne voit pas de développement appréciable sur pomme de terre.

Au microscope on constate un bacille immobile, détaillé variable, analogue au bacille pseudo-diphtérique, mais présentant, d’une façon à peu près constante, une extrémité renflée en massue. Dans la même colonie les bacilles sont très inégaux ; on voit souvent des bacille en ! .

Il se colore par toutes les couleurs ordinaires et par la méthode de Gram.

11 est exclusivement aérobie et ne fait fermenter, ni la maltose, ni la lactose, ni la glycose.

II n’est pathogène ni pour la souris, ni pour le cobaye, ni pour le lapin.

Ce bacille est identique au bacille en massue que Weeks (1) a trouvé sur la conjonctive saine et malade, bacille que Morax (2) a retrouvé et parfaitement décrit.

Nous avons appelé ces deux bacilles « pseudo-diphtériques » parce que lorsqu’on ensemence du pus de la vulve sur sérum on obtient, en vingt-quatre heures, par le développement de leurs colonies un aspect tout à fait semblable à celui qu’on voit sur les tubes de sérum ensemencés avec l’exsudât d’une angine diphtérique. Un examen plus sérieux permet de voir que non seulement ces deux microbes sont différents l’un de l’autre, mais qu’aussi ils ne peuvent être confondus avec le bacille diphtérique.

Ce n’est donc que par quelques caractères assez grossiers qu’ils se ressemblent entre eux et ressemblent au bacille de Lœffler. Cependant l’existence fréquente de ces bacilles sur la vulve et la conjonctive est très importante à connaître pour éviter un diagnostic erroné de diphtérie (3).

Streptocoques. — Streptocoque pyogène. — Nous ne décrirons pas cet organisme ; toutes les fois que nous l’avons rencontré,

(t) Weeks, Archiv. of. ophtalmology, vol. XV, 1886.

(2) Morax, Recherches bactériologiques sur l'étiologie des conjonctivites aiguës et sur l'asepsie dans la chirurgie oculaire. Thèse Paris, 1894.

(3) Nous avons ensemencé pendant notre internat chez M. Brun un grand nombre de conjonctivites de nature très différentes. Nous avons pu ainsi nous rendre compte que ces deux bacilles étaient des hôtes normaux et presque constants de la conjonctive saine ou malade, que la ressemblance des colonies de ces deux organismes avec les colonies du bacille de Lôffler sur sérum après 24 heures pouvait amener à faire faire bactériologiquement des diagnostics de diphtérie oculaire dans des cas où la diphtérie est absolument étrangère. L’inoculation à l’animal peut permettre de savoir si le bacille isolé de la conjonctive est ou n’est pas diphtérique. Mais par contre les caractères de culture sur différents milieux des bacilles pseudo-diphtériques précédemment décrits peuvent, croyons-nous, trancher également la question. Il y a donc toujours intérêt à ne pas ensemencer seulement une sécrétion oculaire sur le sérum seul, mais au moins en même temps, sur l’agar ordinaire, et Tagar ascite pour différencier les espèces et obtenir s’il y a lieu le gonocoque.

Ces considérations sont absolument applicables aux autres muqueuses, nasale, buccale, vaginale, utérine.

il s’est montré avec ses caractères habituels. 11 avait toujours un certain degré de virulence, variable il est vrai, mais donnait au moins un abcès local à la cuisse de la souris, un érysipèle à l’oreille du lapin, etc...

Jamais, il n’a donné de culture sur pomme de terre.

Streptocoque non pathogène. — (Streptocoque brevis de Lingelsheim ?) (Streptocoque de la salive. Veillon.) Cet organisme a été isolé sur les tubes de gélose ordinaire ou de gélose ascite, où il donne de petites colonies blanchâtres, peu épaisses^ transparentes, légèrement bleutées ; elles restent toujours plus petites, et moins épaisses que celles du streptocoque de l’érysipèle.

Dans le bouillon, il pousse facilement en le troublant peu ou pas, et en donnant un dépôt floconneux.

Sur gélatine à 20°, nous n’avons pas eu de culture.

Sur pommes de terre, on obtient un développement lent, les colonies y sont très petites, d’un blanc crémeux et très discrètes. Il est exceptionnel de trouver plus de quelques colonies sur le même tube de pommes de terre. Il se développe lentement, 8 ou 10 jours au minimum. Les colonies poussées sur pommes de terre montrent sur lamelles des formes un peu spéciales. Au lieu de chaînettes courtes, on a souvent sur pommes de terre des grains ovoïdes, rappelant un peu l’aspect d’un véritable strepto-bacille en courtes chaînettes. Mais repris sur agar. bouillon, etc., ce streptocoque reprend tous les caractères propres aux streptocoques.

Pour avoir des colonies sur pommes de terre, il faut avoir soin de faire des ensemencements abondants, et de tenir le tube bouché avec un capuchon de caoutchouc pour éviter la dessiccation du milieu.

Ce streptocoque forme des chaînettes plus ou moins longues, mais il est caractérisé par l’inégalité de ses grains, qui sont les uns très petits et les autres plus gros que ceux du streptocoque pyogène. On voit aussi souvent dans les cultures, des formes involutives géantes.

Ce streptocoque se colore facilement par les méthodes ordinaires et reste coloré par la méthode de Gram.

Il n’a donné aucune lésion appréciable à la souris, ni au lapin, ni au cobaye, soit en injection sous-cutanée, soit en injection intra-vei-

neuse, bien que nous ayons inoculé de nombreux animaux avec des doses très variées.

Get organisme est identique à celui que Veillon (1) a décrit et qu’il a trouvé dans la bouche des personnes saines, ou atteintes d’angine ; il est analogue à une des espèces que V. Lingelsheim (2) a décrite sous le nom de streptococcus brevis. Il paraît également se rapporter à la description du streptocoque poussant sur pomme de terre que Marot (3) a décrit dans sa thèse.

Streptocoque tenüis (Veillon). — Nous avons isolé dans un nombre assez restreint de cas , une espèce de streptocoque différente des précédentes et qui répond exactement à une petite espèce décrite également par Veillon.

Cet organisme est formé de cellules très fines , beaucoup plus petites que celles du streptocoque non pathogène, décrit plus haut. Les éléments ne sont seulement franchement arrondis que dans le bouillon et le liquide du fond des tubes. Dans les colonies, il forme des chaînettes d’éléments ovoïdes, presque bacillaires, chaînettes toujours courtes. Il ressemble beaucoup parfois au pneumocoque.

Il se colore facilement par les couleurs d’aniline, reste coloré après la méthode de Gram.

Sur gélose, cet organisme forme des colonies très fines, très translucides , à peine visibles à l’œil nu ; plus petites que celles du pneumocoque. On ne les voit que sur les tubes d’agar très transparent.

Il trouble peu le bouillon, donnant un très léger dépôt floconneux. Il ne pousse pas sur gélatine, car il ne se développe qu’à l’étuve à 37®. Aux caractères précédents donnés par Veillon, nous en avons ajouté quelques autres en étudiant les propriétés des échantillons isolés par nous.

Cet organisme se développe beaucoup mieux que les autres streptocoques, sur les milieux additionnés de liquide ascitique ; ses colo-

(1) Veillon, Thèse de Doctorat, Paris, 1894.

(2) Von Lingelsheim, Zeit. füi' Hygiene, Bd X, 189'f et 1892.

(3) Marot, Sur un streptocoque, Thèse de Paris, 1893.

nies peuvent alors prendre un développement assez considérable, qu’elles n’ont jamais sur agar ordinaire.

Le streptocoque tennis est un organisme aérobie forcé. Nous avons plusieurs fois étudié ses propriétés à ce sujet ; jamais nous n’avons observé de développement à l’abri de l’air.

Inoculé aux animaux, souris, lapin, cobaye, il ne s’est jamais montré pathogène dans aucun cas.

Cet organisme peut donc être différencié du pneumocoque , par l’ensemble de ses caractères de culture, et ses propriétés biologiques.

Staphylococcus epidermitis albus. — Cet organisme est un gros microcoque, qui pousSe abondamment sur gélose en donnant des colonies blanches et épaisses. Il pousse sur gélatine qu’il liquéfie très lentement et très imparfaitement.

Il se colore par la méthode de Gram.

Nous n’avons jamais obtenu avec lui d’effet pathogène, ni en inoculation intra-veineuse, ni en inoculation sous-cutanée. Cet organisme est identique à celui que l’on trouve communément sur la peau, et que Bodin, Sabouraud, etc., désignent sous le nom de micrococcus cutis communis (1).

Nous décrirons encore les caractères d’un organisme que nous avons rencontré assez souvent dans le canal génital de la femme, dans le pus des bartholinites et le col de l’utérus.

C’est un bacille assez long, fin, assez facile à colorer, qui tantôt se présente en amas, tantôt par deux. Les éléments accolés s’effilent souvent à l’autre extrémité.

Cet organisme reste coloré après la méthode de Gram.

Il ne se développe jamais en culture abondante.

Sur agar ordinaire très humide, il pousse en donnant des colonies à peine visibles, qui rappellent celles du pneumocoque. Il se développe beaucoup mieux sur sérum, et surtout sur agar ascite.

(1) Sabouraud, Etude clinique et expérimentale sur les origines de la pelade. Ann. üermat. et Syphilig . ,

Il trouble le bouillon ordinaire d’une façon très légère, et pousse mal dans ce milieu.

Il ne pousse pas sur pomme de terre, ni sur gélatine.

Il a été inoculé plusieurs fois sans rien amener d’anormal au point d’inoculation.

§ S. — microbes anaérobies.

Micrococcus fœtidus (Veillon). — Cet organisme a été rencontré dans le vagin, à l’état sain, dans l’exsudât de rétentions placentaires, dans le pus des bartholinites.

11 se présente dans le pus sous la forme de cocci isolés ou de diplocoques. Il a le même aspect dans les différents milieux. Dans le bouillon, il forme en outre de véritables chaînettes, courtes il est vrai, de quatre à cinq éléments ; aussi le nom de streptocoque lui conviendrait-il aussi bien.

Les grains des chaînettes nous ont toujours paru identiques.

Jamais nous n’avons constaté de mouvement propre.

La taille de ce coccus est à peu près celle du streptocoque pyogène, mais il varie un peu de taille suivant les échantillons.

11 se colore facilement par toutes les couleurs d’aniline, moins bien cependant que le streptocoque pyogène. Comme les streptocoques, il reste coloré par la méthode de Gram.

Cultures. — Nous n’avons pu obtenir des cultures de cet organisme sur milieu aérobie en surface.

Ce coccus paraît bien être un anaérobie obligé.

Sur agar sucré profond, il forme des colonies un peu variables de taille, blanchâtres, n’ayant aucun caractère bien spécial ; qui se développent habituellement après 48 heures ou même parfois 24 heures. Les colonies s’arrêtent à un ou deux centimètres de la surface du tube.

Sur agar sucré ascite, en tubes profonds, il se développe abondamment.

Sur gélatine sucrée, pas de colonie à la température de la chambre.

Sur agar sucré, acidifié par l’acide lactique, il ne se développe pas.

Sur bouillon sucré dans le vide, il se développe à la naanière des streptocoques ; il forme de petits grains assez volumineux, de taille variable, nageant dans le liquide, sans que celui-ci soit notablement troublé. Au repos, ces grains se réunissent dans le fond et le bouillon devient clair. Ce caractère de ne pas troubler le bouillon persiste dans la suite.

Ce coccus ne se développe qu’à la température de l’étuve.

Les cultures de cet organisme répandent une odeur désagréable, assez pénétrante.

Rarement, il y a développement de gaz.

Rôle pathogène. — Nous n’avons inoculé que des cultures pures, le plus souvent avec une partie de l’agar du tube.

Les résultats de ces inoculations ont été assez variables.

Nousn’avonsrien obtenuen inoculant une fois uneculture pure sur bouillon dans la veine de l’oreille d’un lapin. Deux fois les inoculations au cobaye sous la peau ont été négatives ; une fois en inoculant une culture sur bouillon ; l’autre fois, il s’est produit une induration locale qui a guéri.

Sept fois, il s’est produit des abcès par inoculation sous la peau du cobaye, après un temps variant de quelques jours à un mois. Le pus de ces abcès était crémeux, épais, caséeux même dans les abcès anciens. Ces collections guérissaient, soit le plus souvent par ouverture spontanée, soit parfois par résorption lente. Le pus n’avait pas de caractère fétide.

Le coccus inoculé se retrouvait à l’état de pureté sur lamelles et en culture dans le pus des abcès expérimentaux.

Dans un autre cas, il s’est produit une large gangrène sèche qui a gagné toute la face ventrale de l’animal qui a succombé en quatre Jours. Les coupes histologiques d’un fragment de tissu prélevé au niveau des parties de la gangrène en voie d’extension montrent sous le microscope, un coccus gardant le Gram, existant à l’état de pureté, infiltrant les tissus, contenu dans les petits vaisseaux et identique au microbe inoculé.

Nous avons tenté de reproduire plus sûrement ces gangrènes en

associant au coccus précédent, soit le staphylocoque doré, soit le coli-bacille, soit 1e gonocoque.

Nos expériences n’ont réussi qu’avec le staphylocoque doré. Nous avions choisi un staphylocoque doré de virulence connu, donnant de petits abcès au cobaye.

L’organisme auquel nous donnons le nom de micrococcus fœtidus nous paraît identique à celui rencontré par Veillon dans trois cas de suppuration fétide (Angine de Ludwig, phlegmon périnéphrétique, et bartholinite) (1). 11 est possible qu’il soit 1e même que celui rencontré par Menge et Krônig (2) dans le vagin et qu’ils décrivent sous le nom de streptocoque. Cependant nous n’avons jamais observé les formes en longues chaînettes.

Bacillus funduliformis. — Cet organisme a été trouvé dans le vagin, à l’état sain, dans l’exsudât des rétentions placentaires, dans le pus des bartholinites.

Fig. 2. — Bacillus funduliformis. Forme commune et formes géantes plus rares.

Ce bacille se présente dans le pus de provenance humaine, et dans les sécrétions d’où il a été isolé, sous la forme d’un bâtonnet généralement un peu incurvé.

(1) Veillon, Sur un microcoque anaérobie trouvé dans des suppurations fétides. Société de Biologie, 29 juillet 189il.

(2) Menge et Krônig, loc. cit.

Dans le pus, on le trouve, soit dans les leucocytes où il forme de petits amas ; soit disséminé entre les cellules ; dans les cas où il existait seul dans le pus, il n’était jamais très abondant.

Cet organisme nous a toujours paru immobile.

Ce bacille présente des aspects morphologiques qui méritent d’être signalés. Dans le pus, il se montre sous la forme d’un bâtonnet assez fin. Mais il est, généralement, légèrement incurvé ; il prend mal le

Fig. 3. — Bacillus funduliformis. Formes ramifiées (rares).

couleurs, quelquefois ses extrémités sont mieux colorées que le centre.

En culture pure, sa forme est très variable, et dans nos premières cultures, nous avons longtemps cru à des impuretés, quand nous étions en présence des formes si différentes qu’il peut prendre. Nous avons pu cependant nous assurer qu’il s’agissait bien d’une seule espèce.

Tandis que souvent, il offre l’aspect qu’il a dans le pus, souvent aussi à coté des bacilles incurvés mal colorés, on trouve dans la même colonie des formes beaucoup plus volumineuses, mais se rattachant aux précédentes par toute une série d’intermédiaires. Le bacille s’al-

longe, devient tortueux, se renfle aux extrémités, ou bien s’élargit, devient trapu, et prend des aspects de massues ou de larmes. On voit aussi des sortes de boules non colorées qui ne sont cependant pas des spores (fig. 4).

D’autres fois, ce microbe prend en culture la forme de longs filaments flexueux, parfois bifurqués ne laissant pas voir de spores dans l’intérieur du protoplasma : il se renfle souvent en un point, et à ce niveau il se colore beaucoup plus fortement.

Quelquefois, il atteint un développement extrême : ses extrémités s’allongent, se bifurquent, sedilatentensuite pour se réunir par defins tractus. Ces formes branchues, ramifiées très élégantes sont vivaces.

Fig. 4. — Bacillus funduliformis . Formes en boules.

se reproduisent un certain temps en culture successive, sans que rien dans le milieu nutritif, la durée de séjour à l’étuve, etc. nous ait permis de prévoir telle ou telle forme. Toujours, on retrouve dans les colonies à éléments branchus des formes franchement bacillaires.

Dans les cas où les colonies renferment des variétés ramifiées, rien n’est changé à l’aspect macroscopique des colonies.

Quand on inocule ces variétés, on ne les retrouve pas dans le pus des abcès que l’on provoque, mais on voit seulement les formes intermédiaires allongées ou à renflement.

Nous avons désigné cet organisme sous le nom de bacillus funduliformis à cause de ces renflements en forme de boudin.

Le bacille est difficile à colorer; aucune substance ne nous a

donné de très bons résultats. Il ne reste pas coloré après la méthode de Gram.

Cultures. — Nous n’avons jamais pu avoir de culture de cet organisme en milieu aérobie (agar, agar Wertheim, agar Pfeiffer, etc...)

Tout nous a montré qu’il s’agissait d’un organisme anaérobie strict. Il ne pousse qu’en présence d’un milieu réducteur, ou à l’abri de l’air.

En agar sucré profond, il se développe assez lentement, surtout s’il vient du pus (6 jours dans un cas). Dans les réensemencements, il pousse plus vite ; et ses colonies sont déjà souvent visibles au bout de deux jours. Jamais, même séparées, elles n’atteignent un gros développement.

A l’œil nu, elles sont blanc-jaunâtre.

Sous le microscope, elles sont jaunâtres à un faible grossissement, à bord net, d’aspect lisse, arrondies ou lenticulaires et rappellent assez les colonies du gonocoque poussées dans les plaques d’agar audessous de la surface.

La culture du bacillus funduliformis s’arrête à 1 ou 2 centimètres au-dessous de la surface des tubes sucrés profonds. Les colonies les plus superficielles sont souvent un peu plus volumineuses que celles de la profondeur.

Nous avons assez souvent noté des développements de gaz, surtout dans les cultures abondantes.

Ces gaz ainsi que les cultures répandent une odeur fétide.

Les cultures sur agar ascite sucré profond sont remarquables par le beau développement des colonies.

Sur agar sucré profond, additionné pour l’acidifier d’un peu d’acide lactique nous n’avons pas eu de développement.

Ce bacille ne pousse pas sur yélaline sucrée à la température de la chambre

Sur bouillon sucré dans le vide, cet organisme donne un léger trouble au bout de trois jours. A ce trouble s’ajoute un fin précipité d’abord visible sur la paroi du tube (IQe jour environ) et qui forme ensuite un dépôt au fond des tubes, laissant le bouillon à peu près limpide.

Les cultures sur bouillon ont une odeur fétide.

Nous n’avons jamais obtenu de culture qu’à la température de l’étuve (37°).

Rôle pathogène. — Les expériences pour étudier le rôle pathogène aux animaux, de l’organisme que nous venons de décrire, ne nous ont pas donné des résultats constants ; ni faciles à expliquer par les questions de dose ou de provenance.

Nous n’avons inoculé que des cultures pures, de source différente. L’inoculation dans le sang du lapin par la veine de l’oreille d’une culture sur bouillon, n’a été suivie d’aucun accident morbide appréciable.

L’inoculation dans le péritoine du cobaye, faite une fois, a été négative.

L’inoculation sous la peau du même animal a donné les résultats suivants :

Sauf dans un cas, où l’inoculation a été faite avec une culture sur bouillon, dans tous les cas, il s’est fait une collection purulente :

Une fois, cette collection s’est résorbée sans s'abcéder.

Quatre fois, il s’est formé des abcès volumineux.

Une fois, l’abcès s’est compliqué de gangrène. L’eschare présentait à sa face profonde un pus épais et comme caséeux. Le cohaye a fini par guérir.

Dans trois autres cas, les désordres ont été beaucoup plus graves. Il s’est produit des abcès énormes, véritables gangrènes à marche envahissante, sans collection nette en aucun point. Le ventre, puis la peau du sternum, le cou, la racine des membres ont été envahis par un œdème dur, véritable plastron, où la gangrène apparaissait. Une fois, le cobaye est mort en quatre jours de cette gangrène foudroyante. Les deux autres fois, il a fini par guérir, après avoir présenté des abcès multiples.

Dans les cas d’abcès ou de gangrène expérimentale, nous avons pu retrouver l’organisme inoculé.

Cet organisme est probablement très voisin d’un bacille strictement anaérobie décrit par A. Veillon et Zuber (1) et trouvé chez un enfant atteint d’ostéo-arthrite purulente.

(1) A. Veillon et A. Zuber, Sur quelques microbes strictement anaérobies et leur rôle dans la pathologie humaine. Société biologie, mars 1897.

Bacillus nebulosus. — Cet organisme a été isolé du canal génital de la femme et dans le pus des bartholinites.

Cet organisme se présente avec un aspect à peu près toujours le même, soit dans le pus de provenance humaine, soit dans les cultures, soit dans les abcès qu’il provoque à l’animal. Ce caractère le distingue du bacille précédent, qui présente des aspects très variés.

C’est un bacille assez fin, tantôt allongé, rappelant un peu le bacille de la septicémie des souris ou du rouget, tantôt plus volumineux ; affectant rarement des formes incurvées, souvent renflé un peu à son centre, un peu effilé aux extrémités.

Nous ne lui avons jamais constaté de mouvements propres.

Il se colore assez bien par toutes les couleurs d’aniline.

Il se décolore par la méthode de Gram.

Nous ne lui avons jamais vu ni formes géantes, ni spores, ni figures d’involution. Son aspect est identique dans les vieilles, comme dans les jeunes cultures.

Cultures. — Nous n’avons jamais obtenu de culture en milieu aérobie.

Cet organisme paraît être un anaérobie obligé.

Ses cultures sont très remarquables en agar sucré profond et permettent de le distinguer des organismes précédemment décrits.

Il se développe assez lentement ; et seulement après trois ou quatre jours d’étuve apparaissent de petits flocons, à peine visibles, à limites indécises. Les flocons grandissent, forment des boules nuageuses, rappelant des fleurs de chardon.

Ces colonies sont assez transparentes, inégales de taille, et de forme variable. Quand l’ensemencement est très peu abondant, et qu’il n’existe que quatre ou cinq colonies dans un tube, celles-ci peuvent atteindre parfois près d’un centimètre de diamètre et forment des boules élégantes au milieu de la gélose. Quand l’ensemencement a été plus abondant, elles sont plus petites, inégales ; les unes sont arrondies, les autres de forme variable, mais toujours transparentes, quoiqu’elles laissent passer inégalement bien la lumière.

Au microscope, à un faible grossissement, elles montrent un cen-

Hallé

tre brunâtre un peu plus coloré, autour une zone d’extension à limite indécise.

Les colonies s’arrêtent généralement à 2 centimètres de la surface de l’agar profond sucré.

Ce bacille ne se développe pas à la température de la chambre, il ne pousse pas dans les milieux acides, et ne donne pas lieu à un dégagement de gaz appréciable.

Rôle pathogène. — Les résultats des inoculations n’ont pas été constants.

Fig. 5. — Bacillus nebulosus. Aspect dans un pus de bartholinite.

Dans un cas, l’animal n’a rien présenté d’anormal.

Dans six cas, il s’est produit des abcès.

Dans ces six cas, une fois, l’abcès s’est résorbé et a guéri spontanément sans s’ouvrir.

Dans les cinq autres cas, il s’est produit, deux fois des abcès volumineux, de pus épais, qui ont fini par s’ouvrir spontanément et guérir. Dans trois cas, il s’est produit des gangrènes très étendues. Une fois l’animal est mort en cinq jours, la gangrène avait envahi tout l’abdomen, et les quatre membres; et l’animal a succombé quand l’eschare sèche a envahi le cou et la tête. Seul le dos n’était pasgan-

gréné. Dans les deux autres cas, le processus fut moins rapide, il se fit des abcès locaux et l’animal a fini par guérir.

Une fois, nous avons inoculé en même temps que ce bacille 1 centimètre cube de culture de staphylocoque doré, de virulence connue, et donnant un abcès local au cobaye. Nous avons reproduit une gangrène très étendue ; mais l’animal a fini par guérir.

Nous avons toujours pu retrouver l’organisme inoculé sur lamelles et en culture dans les abcès et les gangrènes expérimentales.

Bacillus caducus. — Cet organisme a été isolé dans le col utérin, le vagin, l’exsudât de rétentions placentaires, un abcès péri-utér in.

Nous n’avons pu que assez rarement l’obtenir en culture pure; Dans les autres cas, il était mélangé avec des espèces dont nous n’a vons pu le séparer.

C’est un bacille à peu prés de la taille du précédent, facile à colorer, qui garde le Gram très fortement et conserve sa forme dans les cultures.

Il est exclusivement anaérobie ; donne de très fines colonies qui apparaissent comme des points blancs dans la profondeur de l’agar sucré.

Les cultures ne sont restées vivaces que pendant trois ou quatre jours ; aussi l’étude de cet organisme a-t elle été très incomplète.