LE FIBRINFERMENT ET LES SELS DE CALCIUM
1° Le fibrinferment ne peut agir sur le fibrinogène qu’en présence d’un sel calcique.
Nous avons démontré, M. Pagès et moi, la nécessité d’un sel de calcium pour la formation du caséum; -mais nous avons également montré (Arch. de physiologie, 1890) que la caséine du lait pouvait être modifiée par le labferment en l’absence des sels calciques et qu'il suftisait d'ajouter à cette caséine modifiée un sel de calcium pour obtenir une précipitation de caséum. En est-il de même pour le sang? Le fibrinogène du sang décalcifié est-il modifié par le fibrmferment ?
Si, en l’absence des sels de calcium, le fibrinogène du sang décalcifié était transformé en un produit capable de se combiner à ces sels pour donner un composé insoluble, on obtiendrait une coagulation immédiate en ajoutant un sel de calcium au sang oxalaté, Or, il n’en est rien: 1l s'écoule toujours un temps appréciable entre le moment où l’on a ajouté le sel de calcium, et le momentoù apparait le coagulum, celui-ci se forme exactementcomme pour le sang sortant des vaisseaux.
Mais peut-être le fibrinogène du sang est-il seulement incomplètement transformé dans le sang oxalaté? — On peut démontrer que le fibrinogène n’a pas été modifié.
On peut préparer en partant du plasma oxalaté, par les procédés ordinaires un fibrogène identique dans toutes ses propriétés au fibrogène qu’on obtient en partant du plasma pur ou du plasma magnésien.
Par conséquent le fibrinferment n’agit pas sur lefibrinogène en l'absence des sels de calcium.
20 Le fibrinferment est nécessaire à la coagulation.
J'ai démontré la nécessité du sel de calcium pour la formation de la fibrine. On peut se demander si le sel de calcium ne suffit pas et s’il est nécessaire d'employer encore une autre matière, un ferment.
Il faut remarquer d’abord qu’on ne peut jamais faire coaguler un transsudat non spontanément coagulable par addition d’un sel de calcium.
Mais je suis parvenu à faire cette démonstration d’une façon beaucoup plus frappante.
J'ai pu débarrasser le plasma sanguin du fibrinferment qu'il contient, sans lui enlever complètement les générateurs de la fibrine. |
Du sang de cheval est reçu dans une solution d'oxalate de sodium à 2 0/0 ;le mélange renfermait 0, 25 0/0 du sel. En ajoutant ensuite à ce mélange une quantité de chlorure de calcium capable de précipiter tout
l'oxalate employé, je n’ai pas observé de coagulation à 400 au bout de 24 heures.
D Dé J'ai pu encore procéder de la façon suivante :
À du sang oxalaté contenant 0,1 0/0 d'oxalate de potassium, j'ajoute soit un oxalate, soit un fluorure alcalin de façon à porter laproportion de ces sels à 0,5 0/9 par exemple. Après avoir ajouté un excès de sel de calceium il ne se forme pas de coagulation.
Dans une expérience, j'ai déterminé la quantité minima de fluorure de sodium qu'il convient d'ajouter pouravoir un liquide qui ne coagule plus lorsqu'on ajoute un excès de sel de calcium. En partant du plasma de cheval oxalaté à 0,1 0/0 il a fallu ajouter du fluorure de sodium en quantité suffisante pour que la teneur du mélange en fluorure fût de 0,2 0/0.
L’addition d’un excès de chlorure de calcium détermine dans ces liqueurs un abondant précipité gélatineux entrainant beaucoup de substances organiques. On sépare très facilement ce précipité par le filtre.
On vérifie directement que le liquide filtré renferme du fibrinogène, de la substance fibrinoplastique et des sels de calcium. Or ce liquide ne coagule pas spontanément. Cette incoagulabilité ne tiendrait-elle pas à l'absence du ferment qui aurait été mécaniquement entrainé par le précipité d’oxalate ou de fluorure de calcium.
il suffit d'ajouter à ce liquide imcoagulable soit du sang, soit du plasma sanguin, soit du sérumsanguin, soit quelques gouttes d’une solution de fibrinferment de Schmidt ou de Hammarsten pour provoquer la formation d’un coagulum.
Par contre on peut ajouter à ce liquide soit un excès d’un sel de calcium quelconque, soit du fibrinogène, soit
Se un transsudat non spontanément coagulable, on n'obtient pas de coagulum.
Cette expérience montre la nécessité d’un ferment, comme Îles expériences citées précédemment montraient la nécessité d’un sel de calcium.
De ces faits résultent les conséquences suivantes :
Le fibrinferment étant entrainé mécaniquement par le précipité d’oxalate de calcium, 1l est avantageux de recevoir directement le sang dans la solution d'oxalate au sortir des vaisseaux. Dans ces conditionsen effet la quantité de fibrinferment libre est minima ; et après la précipitation caleique il s’en forme une grande quantité laquelle n’est pas amoindrie par la première précipitation.
Il faut en second lieu employer un excès d'oxalate aussi faible que possible afin que la 2° précipitation d'oxalate de calcium, produite par addition du chlorure de calcium entraîne le moins de fibrinferment possible.
On peut d’ailleurs empêther totalement cette précipitation. Il suffit pour cela d'ajouter au sang oxalaté un excès de sel de magnésium, puis une petite quantité d’un selde calcium ; on n’a pas de précipitation calcique en opérant ainsi : la liqueur reste donc aussi riche que possible en fibrinferment.
Tous les faits ci-dessus rapportés, relatifs au sang, ou au plasma sanguin permettent d’énoncer les propositions suivantes :
Le sang oxalaté ou fluoré est incoagulable parce qu'il est décalcifié. On peut rendre à ce sang sa coagulabilité par addition d’un sel de caleium,
Le sang peut encore êtrerenduincoagulable, lorsqu'on y détermine la formation d’un abondant précipité d'oxalate où de fluorure calciques, le fibrinferment est mécaniquement entraine.
Les sels de calcium et le fibrinferment sont nécessaires à la coagulation du sang.
On est ainsi amené à énoncer cette nouvelle théorie de la coagulation du sang :
Sous l'influence du fibrinferment et en présence des sels de calcium, le fibrinogène du sang subit une transformation chimique qui donne lieu à la production d'un composé calcique. la fibrine.
COAGULATION DES TRANSSUDATS.
Les auteurs qui se sont occupés de la question de la coagulation du sang ont étudié presque exclusivement la coagulation des transsudats, et celle des solutions de fibrinogène. — On a étudié les transsudats surtout parce qu'ils ne contiennent pas de fibrinferment, et qu'il est possible de les faire coaguler dans telle ou telle condition ; ou parce qu’on en peut facilement retirer du fibronogène débarrassé de fibrinferment. J'ai indiqué à la fin du chapitre précédent comment on peut en partant du plasma sanguin préparer un liquide débarrassé de fibrinferment et très analogue aux transsudats au point de vue de la coagulation.
J'ai vérifié pour les transsudats naturels, liquide d'hydrocèle, liquide séreux péritonéal du cheval tout ce que j'ai démontré pour le sang.
L’addition d’un sel de calcium quelconque ne peut déterminer de coagulation.
L'addition du sérum sanguin, de ferment de Al Schmidt détermine une coagulation.
Si on ajoute de l’oxalate de potassium (ou en général un oxalate ou un fluorure alcalin) de façon à avoir une li-
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queur renfermant de 0, 45 0/0 à 0, 2 0/0 du sel, on ne produit pas de coagulation par addition de sérum ou de fibrinferment de Schmidt, mais il suffit de précipiter l'excès d’oxalate par un sel de calcium en excès pour produire la coagulation.
Les sels de calcium et de strontium donnent des fibrines calcique et strontique dans les transsudats comme dans le sang; — les sels de baryum et de magnésium ne donnent rien (voir pour le sang le rôle des sels alcalino terreux au paragraphe VID.
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COAGULATION DU FIBRINOGÈNE.
J'ai préparé des solutions de fibrinogène par le procédé indiqué par Hammarsten, procédé permettant d'obtenir du fibrinogène débarrassé de paraglobuline.
En ajoutantà cefibrinogène du fibrinferment de Schmidt j'ai toujours déterminé la formation d’un coagulum sans addition de sel de calcium.
Mais j'ai toujours constaté aussi que le fibrinogène préparé suivant le procédé de Hammarsten renferme des sels de calcium dont on peut démontrer la présence par précipitation par un oxalate alcalin. Après cinq précipitations et redissolutions successives la présence des sels calciques était encore très évidente.
On pourrait espérer enlever complètement les sels calciques en ajoutant aux solutions de fibrinogène un grand excès d’oxalate, et filtrant sur porcelaine (la filtration sur papier ne permet pas de séparer à froid le fin précipité d’oxalate de calcium); mais dans ces conditions presque tout le fibrinogène est retenu par le filtre et la solution qui filtre est tellement pauvre en fibrinogène que le coagulum obtenu après addition de sel calcique est extrèmement petit.
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Quoi qu'il en soit, il est possible de répéter sur les solutions de fibrinogène toutes les expériences faites sur le plasma sanguin et sur lestranssudats. L’addition d’un petit excès d’oxalate ou de fluorure alealins rend la solution de fibrinogène incoagulable par le fibrinferment. Cette solution oxalatée ou fluorée de fibrinogèneredevient coagulable sion ajoute un sel de calcium ou de strontium.
Je me propose d'étudier avec tout le soin qu'ileonvient d'yapporter cette coagulation du fibrinogène dans l’examen critique des théories de la coagulation.
Quelle est la transformation chimique subiepar le fibrogène sous l'influence du fibrinferment? — Dans mes solutions de fibrinogène coagulées j'ai retrouvé la globuline signalée par Hammarsten, coagulable à 64° (Ueber den Faserstoff und seine Entstehung aus dem Fibrinogen. Pfluger's Archiv XXX), signalée également par Howell(The origin of the fibrinin the coagulation of blood. Studies from the biolog. Laborat. Hopkins University Baltimore. vol IT1).
Il n'entre pas dans le plan de ce travail de vérifier des faits établis par deux expérimentateurs. Il faut admettre l'existence de cette globuline et la considérer comme essentiellement différente de la fibrine dissoute,
