ACCROISSEMENTS È

en mg

CONCENTRATION

de l'acide naphtyle acétique

Fic. 28. — Action de l’hétéroauxine sur la croissance des tissus de Crown Gall de Micotiana Tabacum.

Ces tissus prolifèrent intensément en l’absence d’hétéroauxine toutefois ils n’ont pas perdu toute sensibilité vis-à-vis des effets excito-formateurs de ce produit car celui-ci exerce une action stimulante très nette pour les concentrations comprises entre 5.10-% et 5.10-7 des doses plus élevées étant rapidement, toxiques.

spontanément des tumeurs, chaque fois que l’on produit une lésion quelconque sur la tige. Ces tumeurs résultent d’une exagération des processus cicatriciels. Lorsqu'on les ensemence sur des milieux sans hétéroauxine, elles prolifèrent sans peine d’une façon exubérante. Toutefois, cette espèce ne convient pas pour le but que nous proposions pour la culture des Virus, car on n’a pas étudié les réactions de ses tissus vis-à-vis de ces agente pathogènes.

C’est pourquoi nous avons cherché à obtenir des tumeurs du Mcotiana tabacum dont les réactions aux diflérents virus sont bien connues.

a. Caractères morphologiques et physiologiques. — Pour obtenir ces cultures, nous ! . . . S avons opéré de la même façon que sur l’Abutilon avicennae, c’est-à-dire que nous avons

RECHERCHES SUR LA CULTURE ASSOCIÉE DE PARASITES OBLIGATOIRES. fi,

piqué avec une aiguille souillée de Phytomonas tumefaciens, la tige ou le pétiole de jeunes plantes de tabac cultivées en serre. Nous avons utilisé pour cela, outre la souche A.6 de Rixer, la souche « Anthemis» provenant de l'Institut Pasteur. Les tumeurs se sont développées rapidement aux points d’inoculation et au bout de deux mois elles avaient atteint une dimension suffisante pour être mises en culture. Après les avoir stérilisées suivant la technique habituelle, nous avons ensemencé des fragments à la surface de milieux gélosés ne contenant pas d’hétéroauxine. Nous avons été surpris de constater que peu de cultures (un quart environ) étaient infectées par le Phytomonas ; les autres se développaient avec une très grande rapidité et en un mois et demi formaient d'énormes cals qui venaient s’écraser contre les parois du tube. Nous avons repiqué ces colonies pendant deux ans sur des milieux dépourvus d’hétéroauxine et elles ont continué à proliférer avec la même vigueur (pl. XIV, fig. B). Les tissus de Crown-Gall de Tabac paraissent donc capables de proliférer indéfiniment in wtro en l'absence de toute substance de croissance. Nous avons cependant cherché à savoir s’ils avaient réellement perdu toute sensibilité vis-à-vis du pouvoir excitoformateur de l’hétéroauxine et pour cela nous les avons repiqués sur des milieux dont la concentration variait de 10-° à 10-5 ainsi que sur des solutions témoins qui n’en contenaient pas. Des pesées de cultures faites deux mois plus tard nous ont montré que jusqu'à la concentration de 10-$, ce produit était sans action. Par contre, pour des concentrations comprises entre 5.108 et 5.10-7, il active notablement la croissance des tissus de tumeurs, car les accroissements moyens des cultures sont supérieurs d'environ 300 mg. à ceux des témoins (fig. 28). Des doses plus élevées deviennent rapidement toxiques.

Aïnsi, bien que les tissus de tumeur de Tabac soient susceptibles de proliférer indéfiniment, sans facteur de croissance, ils n’ont pas perdu toute sensibilité vis-à-vis de l’action excitoformative de l’hétéroauxine. Ils ne sont donc pas entièrement comparables à certains tissus accoutumés comme ceux de Vigne ou de Vigne-vierge où cette action est impossible à déceler. Par leur aspect extérieur ces cultures sont tout à fait semblables aux cultures de tissus accoutumé de Tabac, au point qu’il est impossible de les distinguer les unes des autres. Comme ces derniers, elles forment d’abondantes masses de parenchyme, régulièrement mamelonnées. Certaines produisent parfois des ébauches de bourgeons qui n’évoluent pas en tiges feuillées et cessent très tôt de se développer, mais n’émettent jamais de racines. La souche que nous avons isolée est âgée de deux ans et a subi 12 repiquages.

b. Structure anatomique. — L'examen superficiel de coupes pratiquées dans des colonies tumorales et dans des tissus accoutumés ne permet de déceler aucune différence de structure. Toutes deux sont formées d’un parenchyme renfermant de nombreux flots de cellules ligneuses. Toutefois un examen plus attentif permet de voir que dans les tissus accoutumés les cellules ligneuses sont entourées d'éléments libériens et forment des nodules cribrovasculaires, alors que dans les cultures tumorales les vaisseaux ne sont pas associés à des éléments criblés. Leur structure est donc en tous FRRE comparable à celle des cultures de tumeurs d’Abutilon.

Ces expériences montrent que, tandis qu'on éprouve la plus grande difficulté à cultiver les tissus normaux de Tabac, les tissus de Crown-Gall de cette espèce prolifèrent in vitro, avec la plus grande facilité. Cette transformation tumorale paraît donc avantageuse pour la culture des tissus de cette plante.