MATÉRIEL

Ainsi que nous venons de l'indiquer au cours du chapitre précédent, nos recherches sur la culture de divers parasites obligatoires nous ont amené à essayer d'obtenir le développement in vitro des tissus d’un grand nombre d'espèces de Dicotylédones. Avant d’exposer les résultats de nos recherches, il nous paraît utile de décrire le matériel que nous avons choisi, en indiquant les considérations qui ont guidé notre choix.

Nos premiers travaux ont porté sur la culture du Mildiou de la Vigne : Plasmopara viticola (Ben. et Curr.) Berz. et pe Ton, champignon de la famille des Péronosporacées qui attaque la Vigne et un certain nombre de plantes voisines. Pour tenter d'obtenir son développement, nous avons dû réaliser au préalable des cultures de tissus d’espèces de Vigne facilement attaquées par ce champignon, et pour cela, nous avons tout d’abord étudié trois cépages de notre Vigne indigène Vitis vimfera L. (49). Ge sont les variétés «Aramon» et « Carignan», cultivées surtout dans le Languedoc pour la production du vin et « Chasselas de Fontainebleau», qui fournit du raison de table. Désirant étudier ensuite la résistance au Mildiou des différentes espèces de Vins, nous avons tenté d’obtenir des cultures de Vignes exotiques présentant tous les degrés de résistance au parasite, depuis une extrême sensibilité jusqu’à l’immunité complète. Ce sont tout d’abord les espèces américaines : V. oulpina L., V. rupestris Soueze, V. riparia Micux, V. arizonica Exezr. et la variété « Noah» que l’on suppose être hybride entre V. ripariaet V. labrusca, puis deux espèces asiatiques V. Cosgnetiae Pianon. et V. David (Ramon) Foëx.

Les souches de tissn de Vitis vimfera L., que nous avons isolées au cours de nos premières recherches, nous ont ensuite servi à cultiver n vitro l’Oïdium de la Vigne : Uncinula necator (Scaw.) Burr., Ascomycète de la famille des Érysiphacées.

La facilité avec laquelle ces tissus se cultivent in witro nous ont incité à étudier d’autres plantes de la même famille, tout d’abord deux Parthenocissus : P. tricuspidata (Ses. et Zucc.) Prancu. et P. quinquefoha Pranou. que l’on cultive dans un but ornemental sous le nom de Vigne-vierge, puis deux Cissus : Cissus incisa (Ton. et Gr.) DEsmour. et Cissus discolor Wexr.

Toutes les espèces que nous venons de citer sont des lianes, c’est-à-dire des végétaux dont la tige s'accroît en longueur avec une très grande rapidité, tout en demeurant relativement mince, et est incapable de s’élever verticalement sans le secours de supports. Nous pensions alors qu'il pourrait y avoir une relation entre cette rapide élongation des tiges et la facilité avec laquelle leurs tissus prolifèrent 4n vitro; aussi, désirant étendre nos cultures de parasites obligatoires, nous avons tout naturellement cherché des espèces qui attaquent d’autres lianes.

Parmi ceux-ci, les Urédinales forment un groupe très homogène d’espèces étroitement spécialisées et strictement parasites, se développant sur les végétaux les plus variés, aussi nous n'avons pas eu de peine à trouver des lianes parasitées par ces champignons.

La famille des Rosacées renferme un certain nombre de plantes sarmenteuses réparties dans les genres Rubus et Rosa, qui répondent à ces conditions. Sur les tiges de Rubus

RECHERCHES SUR LA CULTURE ASSOCIÉE DE PARASITES OBLIGATOIRES. RE do

fruticosus L. apparaissent au printemps les pustules d’Urédospores de Kuehneola albida (Künn) Max. ; au cours de l'été, ses feuilles sont envahies par le Phragmidium violaceum Scnurz. et le Phragmidium rubi (Pers) Want. ; de même, sur les tiges et feuilles de divers rosiers se développent plusieurs autres Phragmidium. La grande vigueur de ces plantes et le fait que les parasites apparaissent sur des tissus qui, comme ceux de la tige, sont moins différenciés que ceux des feuilles, nous paraissaient réaliser des conditions favorables pour que nous tentions la culture associée de ces Urédinées sur des tissus vivants maintenus 2n vitro. Ceci nous a amené à réaliser des cultures de tissus de trois espèces de Rubus : R. fruticosus L., la Ronce indigène, R. reflezus Ken. plante du sud de la Chine et R. kinashi Lev. originaire du Japon, et d’un rosier Rosa wichuraïana Crépin var. « American pillar», que nous avions choisi à cause de sa grande vigueur.

La facilité avec laquelle nous avons obtenu des cultures de tissus de Ronce nous a incité à étudier d’autres Rosacées ligneuses, mais non sarmenteuses, également attaquées par des Urédinées; nous avons choisi l’Aubépine : Crataegus monopyna Jaco. et le Poirier : Pyrus communis L. var. « Conférence »,dont les tiges sont souvent attaquées et déformées par des Gymnosporangium. Le Gymnosporangium clavariaeforme (Jaca.) Ress. forme des écidies, non seulement sur les feuilles, mais encore sur d’autres organes comme la tige ou l'ovaire de l’aubépine. G. Sabinae (Dixs.) Winr. attaque le Poirier de la même manière.

Cherchant ensuite d’autres Urédinées faciles à inoculer, qui se développent également sur des tissus peu différenciés nous avons choisi la rouille du Muflier : Puccinia Antirrhini Dir. et Horway, qui attaque avec une grande violence presque tous les organes de cette plante, puis Puccinia Malvacearum Moxr. que l’on rencontre fréquemment au printemps sur les feuilles et les tiges de diverses Malvacées, Ceci nous a amené à essayer de réaliser des cultures de tissus de Muflier Antirrhinum maqus L. et de diverses Malvacées, notamment de la grande Mauve (Malva sylvestnis L.), de Guimauve (Alihea officinahs L.), de Guimauve de Thuringe (Alhea thuringiaca L.) et d’Abutilon d’Avicenne (Abutilon avicennae Gagrrn.). Nous avons enfin voulu étendre cette méthode de cultures associée aux virus,et notre choix a porté sur les mieux connus, c’est-à-dire le virus de la Mosaïque du Tabac, puis le Virus X et le virus Ÿ qui causent des maladies de dégénérescence de la Pomme de terre. Toutes les tentatives de culture de tissu de Pomme de terre effectuées jusqu'ici ont constamment échoué. Fort heureusement, il est possible de maintenir ces virus en les inoculant au Tabac et c’est en les associant aux tissus de cette plante que nous avons pu les cultiver; pour cela, nous avons tout d’abord réalisé des cultures de tissus de Tabac, Micotiana Tabacum L. et nous avons choisi la variété « White Burley», qui est souvent utilisée pour l'étude de ces virus.

Nous avons groupé toutes les espèces sur lesquelles nous avons travaillé dans le Tableau suivant, en mentionnant, pour chaque espèce, les organes utilisés pour nos cultures et les parasites étudiés :

NOMS LATINS. NOMS FAMILLE. ORGANE PARASITE ÉTUDIÉ. FRANÇAIS. EXPÉRIMENTÉ.

Vitis vinifera Le..." Vigne européenne. Ampélidées. Tige. Plasmopara viticola (Benx. el Diverses variélés. Curr.) Benz. et pe Tont.

Uncinula necator (Souw.) Burn.

Vitis vulpina L. = V, cor- Vigne américaine. Id. Id. Plasmopara viticole (Bsnk, et difolia Law. Curr.) Benz. et pe Toni.

Vitris rupestris Soneez... Id. Id. Id. Id.

, ANNALES DES ÉPIPHYTIES. 1