I. PAiniE DESCRIPTIVE

Chez tous les animaux que j’ai étudiés, l’ovule jeune, au sein de l’ovaire encore peu développé, se présente sous la forme d’une simple cellule. Souvent celle cellule est isolée, individualisée dès le moment où l’on peut dire avec certitude qu’elle appartient à l’ovaire; tel est le cas des Pléropodes el des Hétéropodes. Les cellules de l’ovaire se multiplient par division avant de commencer cà subir les modifications propres au développement de l’ovule. Chacune se compose d’un protoplasme parfaitement transparent et d’un noyau relativement très-gros. L’accumulation de prololécilhe dans le protoplasme, qui prend ainsi les caractères

i5i;cm-:iu:m:s suis i..\ !'fico.M)A i ion

d’un vilelliiS;, ne commence qn’assez longlemf)s îipi ès (jiie Tovnle i\ cessé (le se multiplier pai' division. C’est vers la même cpo(jiie (jne la laclie gei'minative se montre chez les Mollusques en question.

D’autres fois, le sommet de l’ovaire jeune est occupé par un amas de jn'otoplasme transparent dans lequel sont suspendus des noyaux, et ce cœnosarque ne se scinde que plus lard en cellules distinctes dont chacune est munie de l’un des noyaux [iréexislants. Tel paraît être le cas chez de jeunes exemplaires de Sagilla. Je dois dire loulefois que les jeunes ovules n’étant pas entourés d’une mendjrane, il est bien difficile de discerner leurs limites, tant qu’ils sont pressés les uns contre les autres. L’on pourrait donc se croire en présence d’un cœnosarque, à un moment où les cellules seraient déjà physiologiquement distinctes. Je me borne à exprimerjTies doutes sur ce point que je n’ai pas approfondi.

Une fois isolés, les ovules jeunes présentent bien tous les caractères distinctifs d’une cellule et rappellent surtout les cellules des tissus embryonnaires. La vésicule germinative répond incontestahlernenl à un noyau cellulaire et le vitellus jeune ressemble absolument an protoplasme de l’une de ces cellules. Si les auteurs plus anciens ont cru que la vésicule germinative apparaissait la première et s’entourait ensuite d’un vitellus, c’est que le protoplasme transparent qui l’entoure dès l’origine avait échappé à leur observation; ils ne réussissaient à l’apercevoir qu’au moment où ce protoplasme commence à se charger de globules lécithiques On verra plus loin que cette appréciation se fonde sur les propres paroles des auteurs dont je parle.

Une autre hypothèse, d’après laquelle l’ovule ne serait pas morphologiquement comparable à une cellule, a été émise du temps où l’on n’avait pas encore de notions exactes sur l’origine de l’ovule et surtout de son protoplasme. La vésicule germinative fut considérée comme un élément histologique dont la tache germinative serait le noyau; le vitellus devint conformément à cette hypothèse une masse de substance nutritive destinée à être absorbée par les cellules embryonnaires que l’on faisait descendre de la vésicule germinative. Une connaissance plus approfondie

El 1,E COMJlENCIiMENT DE l/llÈNOElf^ME.

du mode de loi’mation de l’ovule cl du développement embryogénique de l’œuf lirenl bienlôl oublier celle hypothèse sans fondement. Encore dernièremenl, il esl vrai, M, Villot (voyez index, N» exxv) a cru devoir rééditer ces idées sans en indiquer l’origine; mais ce nouveau produit d’un point de vue suranné n’a pu un seul instant ébranler la théorie maintenant solidement établie de la nature cellulaire de l’ovule.

L’ovule déjà constitué, mais encore très-jeune, présente en général dans le règne animal et, en particulier, chez les animaux qui ont fait l’objet de mes études, une grande similitude de composition. Une grande vésicule germinative est entourée d’une couche relativement assez mince de protoplasme transparent. Dans l’intérieur de la vésicule s’étend un réticulum de filaments sarcodiques, auquel esl attachée la tache germinative généralement unique. Nous rencontrons cependant quelquefois des structures qui s’écartent de ce schéma. Ainsi, quoique le vilellus soit en général à celle époque homogène jusqu’à sa surface meme, il présente chez les Gastéropodes, déjà à ce moment précoce, une couche superficielle plus transparente, plus homogène que le reste du vilellus. Celte couche n’est, du reste, pas encore séparée du vilellus par une ligne nette. Chez les Gastéropodes, celle couche limitante se redissoul plus tard dans le vilellus, tandis que chez les Lamellibranches elle se sépare de la surface de l’ovule et constitue tantôt une membrane résistante à double contour, tantôt une couche d’apparence albumineuse et durcie à la surface. Je me borne à rappeler ces faits; ils sont déjà connus.

La tache germinative est presque toujours présente; elle peut être simple ou multiple et possède souvent une ou plusieurs vacuoles dans son intérieur; cependant le nucléole de l’ovule peut faire défaut. Chez une Sagitla, tout au moins, je l’ai vainement cherché tant chez les ovules jeunes que chez des ovules plus avancés.

Je signale en passant ces phénomènes remarquables de formation endogène de cellules que présente le vilellus des Ascidies dans celte période de développement. Ces cellules voyagent jusqu’à la surface et constituent

lîECIIEnCHES SI' Il I.A rÈCONDATION

le soi tlisanl l'ülliciile ovarien. Je n’insisie pas davantage ici sur ce cas particulier qui sera l’objet d’un mémoire spécial.

A mesure que l’ovule approche de la maturité, son vitellus devient de pins en plus considérable, tandis que la vésicule germinative ne croît pas en proportion. Le protoplasme devient de pins en plus granuleux et les substances chimiques qu’il élabore, en les puisant par absorption dans les liquides nourriciers (]ui l’entourent, se séparent sous forme de granules et de globules lécithiques. L’on sait cà quel point ce protolécithe varie tant par l’aspect des globules que par leur grosseur, leur forme et autres caractères. L’on sait que chez divers animaux, particulièrement chez les Araignées, il se forme dans le vitellus un corps compacte qui a reçu à tort le nom de noyau vitellin et qui n’est, selon toute vraisemblance, qu’une accumulation de protolécithe. La composition chimique du protolécithe n’est encore connue que bien imparfaitement et pour un petit nombre d’animaux. J’insisterai seulement sur les différences considérables que présentent les globules lécithiques chez les animaux qui font l’objet de la présente étude. Chez les Oursins et les Étoiles de mer, les globules sont nombreux, mais très-petits et peu réfringents; le vitellus a l’aspect d’un protoplasme très-granuleux. Chez les Gastéropodes, ces globules sont en général réfringents et souvent colorés. Chez les Ilétéropodes, ils sont parfaitement incolores, comme c’est généralement le cas des animaux pélagiques; chez les Firoloïdes, les globules lécilliiques sont non-seulement incolores, mais encore peu réfringents et se touchent pour ainsi dire, ce qui donne h l’œnf un aspect particulièrement homogène et transparent. De la sorte l’œuf plongé dans l’eau échappe plus facilement au regard; c’est une conséquence de l’adaptation au milieu ambiant, lœs mômes caractères distinguent aussi les œufs de Sagiüa, de Doliolum, de beaucoup de Cœlentérés nageants et d’une foule d’autres animaux pélagi([ues. J’ignore, du reste, quelles sont les particularités chimiques ou physiques qui accompagnent des propriétés optiques si dilférentes de celles que présente le protolécithe des autres

animaux.

ET LE COMMENCEMENT DE l’hCNOGÈNIE.

Arrivé à parfaite malurilé, l’ovule commence à présenter une métamorphose régressive de quelques-unes de ses parties, à savoir de la tache et de la vésicule germinatives. J’aborde ici un sujet très-controversé. Plusieurs observateurs ont vu ces éléments disparaître du vitellus non fécondé; d’autres plus nombreux n’ont constaté cette disparition qu’après la fécondation; d’autres enfin ont maintenu que la vésicule continuait à exister malgré la maturation, malgré la fécondation, et donnait directement naissance aux noyaux de fractionnement. L’on trouvera plus loin le résumé des principales opinions sur ce sujet. Je n’insiste donc pas et je continue la description des faits que j’ai observés.

ün Stelléride assez commun à Messine, Y Aslerias qlacialis {O -Y . Mül- 1er), a fait les frais de la majeure partie de mes expériences. Cette espèce est désignée, par les auteurs récents, sous le nom d'Asteracanthion glaciale, inauguré par Müller et Troschel ; j’adopte sans hésiter le nom générique (VAslerias que E. Perrier a remis à si bon droit en honneur dans ses (( Stellérides du Muséum. » Cette Astérie est extrêmement propice aux recherches d’embryogénie. J'ajoute que la plupart des autres Stellérides que j’ai eues entre les mains le seraient tout autant, si elles étaient assez communes pour répondre aux besoins de l’embryogéniste expérimentateur.

De meme que les Oursins, l’Astn ias giacialis paraît se reproduire par intermittence plutôt que par sai‘^on. J’ai lencontré des individus arrivés à maturité sexuelle pendant tout le temjis de mes éludes, depuis l’automne jusqu’au printemps, mais je ne possède pas d’observations faites en été. La période de reproduction est en tous cas très-prolongée ; mais les individus n’arrivent pas tous en même temps à maturité. J’ai cru remarquer une certaine périodicité, analogue à celle des Oursins, dans l’évacuation des produits sexuels chez notre espèce; mais cette périodicité est loin d’être aussi marquée et aussi facile à vérifier que chez les Oursins. Il me paraît indubitable que chez celte Astérie les produits sexuels mettent au moins deux mois à se former et à mûrii‘; l’évacuation ne peut donc être mensuelle comme chez l’Oursin.

HliCniïHCIlES SUE LA FÉCONDATION

L’ovule mûr de noire Aslerias esl composé pi incipalemenl d’un vitellus granuleux mais transparent et d’une teinte variant du rose au brun très-pâle; vus en niasse^ les œufs présentent une teinte uniforme qui varie suivant les individus du rose pâle au vermillon le plus vif. Indépendamment du degré de maturité qui influe aussi sur le degré de coloration, ces nuances dépendent de l’individualité à tel point que l’on trouve difficilement deux femelles dont l’ovaire présente exactement la même teinte. Ces dilîérences sont en général parallèles aux variations si grandes de coloration des téguments que montre celle espèce.

La partie superticielle du vilellus est généralement un peu plus transparente et moins gi’anuleuse que la partie centrale, sans qu’il y ait lieu de distinguer deux substances vitellines, comme le fait v. Beneden (cxx) pour y Aslerias rubens.

Une grande vésicule germinative, renfermant une tache germinative, occupe dans le vilellus une position presque toujours excentrique, surtout à l’époque de la maturité. La vésicule, que je nommerai aussi le nucléus de l'ovule, est limitée par une couche dilîérenle de la substance vitelline et qui pourra s’appeler la couche iimilante ou la membrane plastique de la vésicule germinative. A l’état vivant, celle couche ne se distingue guèi'e du protoplasme environnant. Peut-être serait-elle visible si elle se ti’ouvail à la surface du vitellus, mais plongée comme elle l’est dans la profondeur d’une substance granuleuse, il n’est pas étonnant (jue le microscope ne puisse nous révéiei’ clairement son existence. Si l’on comprime l’ovule au [)oinl de l’écraser, l’on voit son noyau se frayer lentement un chemin à travers la substance vitelline et en sortir tout entier. Il se présente alors sous la forme d’une goutte de liquide parfaitement transparent et jiossédanl sensiblement les mêmes propriétés optiques que l’eau environnante. Il esl entouré d’une couche également hyaline et extrêmement mince, beaucoup plus mince que celle que l’on trouve à l’aide des réactifs autour de la vésicule. Celle couche limitante esl éminemment élastique, comme l’on peut s’en assurer en observant la manière dont elle se comporte [lendanl la sortie du noyau et après sa

ET LE COMMENCEMENT DE l’HÉNOGËNIE.

sortie lorsqu’on le soumet à des compressions et des rotations variées. Le noyau peut, dans ces circonstances, se scinder en deux ou plusieurs gouttes qui se détachent entièrement du vilellus et qui pourtant sont entourées d’une couche limitante close de toutes parts. Au bout de quelques minutes de contact avec l’eau de mer, cette membrane plastique crève et le liquide de la goutte se mêle aussitôt à l’eau de mer dont il est impossible de le distinguer. Ce liquide n’avait donc aucune cohésion par lui-même; il n’était retenu que par la couche limitante. Quant à cette dernière, ses propriétés, telles que je viens de les décrire, indiquent qu’elle a une consistance visqueuse. Or cette couche visqueuse n’est autre que la prétendue membrane de la vésicule germinative; car les réactifs qui mettent en évidence ladite membrane chez un ovule encore intact ne décèlent aucun reste de membrane dans la substance d’un vitellus dont la vésicule a été expulsée avant la coagulation. Nous pouvons donc conclure de ces faits que la partie liquide du noyau est entourée d’une couche visqueuse, un peu différente de la substance vitelline, mais qui ne mérite pas le nom de membrane dans le sens ordinaire du mot. Nous verrons bientôt que cette manière de voir s’appuye, non-seulement sur l’expérimentation, mais encore sur l’observation des phénomènes qui se succèdent dans l’œuf vivant.

Si l’on traite par l’alcool absolu ou par les acides (acétique, formique, chlorhydrique, picriqueou chromique)un ovule ovarien arrivé à maturité, et qu’on l’éclaircisse ensuite par la glycérine, l’on voit que la partie liquide de son noyau est entourée d’une membrane assez nette et présentant un double contour. Devons-nous conclure de là à l’existence d’une membrane à l’état de vie ? Une telle conclusion serait assurément peu logique. Nous sommes simplement autorisés à dire que la vésicule est limitée par une couche qui a la propriété de se coaguler d’une manière différente de la substance vitelline. Cette couche est, il est vrai, maintenant durcie; mais si l’on fait fendre par compression le vitellus coagulé, l’on voit la solution de continuité s’étendre aussi à la membrane du noyau. Nous savons que le vitellus s’est durci par l’action des réactifs mais qu’il est

visqueux à l’étal vivant; aussi ne sommes-nous nullement étonnés d’apprendre que la couche limitante du noyau qui se présente à l’état solide chez l’œuf coagulé n’était à l’étal de vie qu’une couche semi-fluide et visqueuse. Son peu d’épaisseur, comparée à son étendue, est la seule propriété qui puisse expliquer pourquoi on lui a donné le nom de memhrane.

L’on a soulevé la question de savoir si la couche limitante du noyau cellulaire en général et du noyau de l’ovule en particulier appartient à proprement parler au noyau ou au protoplasme qui l’environne. La discussion de ce point me paraît futile; néanmoins je dois indiquer le point de vue auquel je me place, ne fût-ce que pour motiver le jugement que je viens de porter. Dans un noyau tout formé la question est une simple alîaire d’appréciation personnelle; les seuls renseignements utiles sont ceux que peut fournir l’histoire de l’origine et du développement du noyau. L’ovule se prêle peu à celte recherche, puisque l’origine première de son noyau se perd dans l’histoire du développement de l’individu. Mais il est d’autres noyaux dont la formation peut se suivre pas à pas; tel est par exemple le pronucléus femelle qui possède, lorsqu’il a atteint tout son développement, une membrane limitante bien nette. Or ce pronucléus se forme au milieu et aux dépens de la substance vitelline dont il lire aussi bien son contenu liquide que son enveloppe visqueuse; l’origine de ces deux parties est donc la même, et si la couche limitante appartient au vitellus, son contenu liquide lui appartient exactement au même litre. Le débat est, comme on le voit, singulièrement oiseux. Pour ma part, je n’hésite pas, après comme avant les longues et savantes dissertations d’Auerbach (civ et cxi) sur ce point, à comprendre sous le nom de noyau tout l’ensemble du contenu et de l’enveloppe.

Le contenu de la vésicule germinative n’est pas liquide comme la simple observation d’œufs écrasés pourivût le faire croire; outre la tache germinative, l’on y distingue un réseau de filaments de sarcode. Ce réseau se voit sans trop de peine chez des ovules jeunes dont le vitellus est peu épais et assez transparent; il présente dans ce cas l’aspect qui a été dé-

ET LE COMMENCEMENT DE l’HÈNOGÉNIE. Il

cril el figuré par Flemming (cxni), par O. Herlwig (cxv), par E. van Beneden (cxvi), pour ne parler que des auteurs les plus récents. C’est un sarcode hyalin, tenant en suspension des granules pâles et clair-semés, de grosseurs très-diverses, et qui tapisse intérieurement l’enveloppe du noyau et extérieurement le nucléole. Des filaments peu nombreux de ce même sarcode relient entre elles ces deux couches continues et présentent un aspect qui rappelle vivement celui des pseudopodes étendus des Radiolaires. L’action des réactifs fait apparaître un grand nombre de filaments plus petits qui relient les grands courants de sarcode, visibles dans Tovule frais, et complètent le réseau. Celui-ci présente alors des mailles irrégulières mais de grandeurs presque uniformes, séparées par des trabécules bien délimités.

Dans l’ovule mûr, ce réseau serait sans doute visible sans l’emploi des réactifs, si la position du noyau au milieu du vitellus granuleux n’était aussi défavorable à l’observation de fins détails. Il est très-évident sur des préparations récentes faites avec l’acide picrique ou osmique, mais il paraît s’altérer à la longue dans des préparations à la glycérine. Chez des ovules dont la vésicule germinative va disparaître le réseau ne se retrouve plus même avec l’emploi des réactifs. C’est une preuve de plus ajoutée à celles que Flemming a fournies (cxxiii), que nous n’avons pas affaire ici à des produits artificiels.

La tache germinative, ou nucléole de l’ovule, est fortement réfringente et renferme en général une vacuole, quelquefois plusieurs. Elle est, du reste, transparente, dépourvue de granulations, et ne paraît être entourée d’aucune membrane, d’aucune couche différente du reste de sa substance.

Le vitellus, encore renfermé dans l’ovaire, est entouré d’une couche molle que je désigne du nom de couche muqueuse ou mucilagineuse et qui acquiert une épaisseur notable au moment où l’ovule arrive à maturité. Cette couche est parfaitement transparente et incolore et présente une structure radiaire bien évidente. A l’état frais, l’on distingue des stries accompagnées de lignes pointillées très-fines. Ces stries et ces

HECHEllCHES SUR LA FÉCONDATION

lignes sont visibles surtout à la limite inlerne de la couche el se perdent pour la plupart avant d’alteindre sa surface externe; elles sont toules dirigées suivant le rayon de l’œuf, c’est-à-dire perpendiculairement à la couche elle-même. Les acides, rendent plus apparentes les lignes pointillées. La structure radiaire de cette couche devient surtout très-apparente chez des œufs plongés dans l’acide osmique et que l’on a ensuite laissés dans une solution de bichromate de potasse additionnée de quelques gouttes de glycérine; la couche mucilagineuse se gonfle alors considérablement et il s’y produit des fentes perpendiculaires à la surface du vitellus. Cette structure peut provenir de la présence de canalicules admis par E. van Beneden (cxx), ou simplement d’une alternance de lignes radiaires décompositions différentes. Je ne me prononce pas sur ce point.

Pour apprendre à connaître expérimentalement la texture de cette couche à l’état de vie, j’ai placé des œufs dans un liquide qui fourmillait de vibrions et j’ai remarqué qu’ils s’implantaient tous dans le mucilage dans une direction perpendiculaire à la surface du vitellus; nous verrons qu’il en est de même des zoospermes. Celte observation est favorable à l’hypothèse des canalicules, qui peut encore s’appuyer sur l’analogie avec la même couche de l’œuf des Holothuries où les pores sont bien évidents.

L’on ne peut étudier cette couche superficielle de l’œuf des Astéries sans songer à la « zone pellucide » de l’œuf des Mammifères; aussi la comparaison a-t-elle été déjà faite par E. van Beneden (cxx). Je pense comme ce savant que la comparaison morphologique ne saurait être tentée avant que nous connaissions le mode de formation de l’une et de l’autre; mais l’analogie physiologique est frappante. Je n’hésiterais pas à donner à l’enveloppe de l’œuf d’Astérie le nom de Zone pellucide^ si ce terme n’était pas aussi mal choisi. Pourquoi ne pas revenir à la désignation proposée par v. Baer qui a le double avantage de la priorité et de la clarté? Je propose de remettre ce terme en honneur et de nommer cette enveloppe, tant chez les Mammifères que chez les Échinodermes : l’Oolème pellucide (Oolema pellucidum^ v. Baer).

Dans le sein de Tovaire, roolèrne pellucide est entouré d’une membrane, d’épaisseur irrégulière, mais présentant partout un double contour (PI. I, fig. 1, Ec). Si l’on traite par les acides et que l’on isole avec des aiguilles cette dernière membrane, l’on peut s’assurer facilement qu’elle présente des noyaux ovales régulièrement espacés (PI. II, fig. 20, iV). Vue de profil, cette membrane montre des épaississements lenticulaires dont chacun répond à un noyau aplati entouré d’une certaine quantité de protoplasme. En lavant cà l’eau douce et traitant ensuite par le nitrate d’argent, l’on fait apparaître des lignes irrégulièrement polygonales qui divisent la membrane en champs, au milieu de chacun desquels se trouve un noyau. Nous avons donc affaire, non pas à une membrane anhiste, mais à un véritable épithélium pavimenteux. Le plus souvent, cet épithélium est encore accompagné de fibres, ou plutôt de cellules fusiformes très-allongées, qui lui sont accolées extérieurement. Ces cellules appartiennent au tissu conjonctif qui constitue l’enveloppe et les mailles très-écartées du stroma de l’ovaire. Si ces cellules conjonctives sont comparables à un stroma, l’épithélium qui entoure l’ovule devra être comparé à l’épithélium d’un follicule ovarien.

Les œufs d’Astéries, prêts à être pondus, sont détachés et libres dans le sein de l’ovaire; ils remplissent l’oviducte, où l’on est sûr de ne trouver que des œufs mûrs. Mais même en entamant l’ovaire d’individus arrivés à parfaite maturité et recueillant les produits qui s’écoulent sans pression, l’on se procure des œufs qui se développent ensuite d’une façon parfaitement normale.

A l’état de liberté la femelle évacue simplement ses produits sexuels dans la mer, et, si j’en juge par ce que j’ai observé dans mes aquariums, celte évacuation a lieu en plusieurs fois. Chaque évacuation est assez prompte et comprend des quantités d’œufs extrêmement considérables. Nous ne faisons donc qu’imiter la nature lorsque nous arrachons à la mère ses œufs mûrs et que nous les plaçons aussitôt dans une quantité suffisante d’eau de mer fraîche.

Au moment oû l’on prend les œufs, ils ne possèdent plus pour la plu-

KECHERCHES SUR LA FÉCONDATION

part une couche continue de cellules épithéliales à leur surface; cet épithélium est plus ou moins déchiré (PI. I, fig. 1, £c). Dans l’eau de mer, il se détache promptement en lambeaux et tombe complètement. L’oolème pellucide se gonfle et augmente considérablement d’épaisseur. Ce gonflement s’adresse surtout à la partie superficielle qui devient irrégulière et ne présente plus de contours visibles, à moins qu’elle ne vienne à être salie par les particules qui peuvent y adhérer.

Le séjour des œufs dans l’eau de mer provoque dans leur intérieur d’autres modifications plus importantes, à savoir la métamorphose delà vésicule germinative. Nous avons vu que ce noyau occupe dans le vitellus une position excentrique. 11 se rapproche maintenant de la partie de la surface dont il était auparavant le plus voisin. Au bout de peu de minutes, il commence à se flétrir, à se ratatiner (voyez fig. 1).

Fig. 1.

Le vitellus cl’Asterias a^ji-ès quelques minutes de séjour dans l’eau de mer. La vésicule germinative se ratatine, sa membrane se plisse. Les enveloppes de l’œuf ont été laissées de côté, ainsi que la moitié nutritive du vitellus.

La vésicule perd d’abord sa rondeur, ses contours deviennent moins réguliers et moins nets, et bientôt il sera impossible de les discerner (PI. I, fig. 2, 3, 4 et 5, iVo). Cependant, si l’on traite à ce moment par les acides, l’on voit encore apparaître une membrane à double contour, plus ou moins plissée. Chez l’Œ*uf vivant, je n’ai pu apercevoir cette membrane repliée.

Les changements d’aspect de la vésicule s’accentuent de plus en plus. Ses bords se fondent avec le vitellus granuleux de telle façon qu’au lieu d’une vésicule, l’on ne voit plus qu’une tache claire, qu’une lacune dont

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÉNIE.

les changements de forme sont assez prompts pour être très-perceptibles pendant le temps qu’il faut pour en projeter le contour à la chambre claire (PI. I, fig. 2, 3, 4). Si variable et irrégulière que soit celle forme, elle est toujours déprimée; si nous tournons le vitellus de telle façon que la portion qui renferme le reste de la vésicule soit dirigé vers le bas, nous remarquons que la place claire est plus large que haute.

Pendant que la vésicule se modifie, la tache germinative subit aussi line série de changements. D’abord elle devient moins réfringente, ses contours paraissent moins marqués (PI. I, fig. 2, wo); puis elle change de forme et semble pétrie en sens divers (Fig. 3 et 4, no). Enfin elle devient si pâle et si irrégulière que l’on a grand’peine rà la distinguer (voyez fig. 2).

Fig. 2.

L’hémisphère formatif du vitellus au moment où la vésicule germinative se disperse.

La tache germinative, de forme très-irrégulière, est à peine visible.

C’est vers ce moment que la lacune, provenant de la dissolution de la vésicule germinative, prend une forme aplatie. Dans une série d’observations, j’ai vu assez constamment la substance granuleuse du vitellus s’avancer dans la lacune surtout du côté le plus rapproché de la surface de l’ovule et cette substance vitelline, apparemment un peu diluée par l’absorption du liquide de la lacune, semblait englober le reste de la tache germinative que je perdais alors de vue. Dans d’autres séries d’observations, j’ai vu le reste de la tache germinative se rapprocher de la partie périphérique de la lacune, mais sans pénétrer dans la substance vitelline. Parfois enfin la position des restes de la tache paraissait ne suivre aucune loi. Ces observations sont du reste fort incertaines, à cause de la diffî-

cullé que l’on îi de discerner les restes du nucléole, au milieu des figures irrégulières qui résultent du mélange de la substance vitelline avec le liquide de la vacuole; aussi je ne les donne que pour ce qu’elles peuvent valoir. Pour arriver à des notions plus précises sur la disposition de ces parties, il faut avoir recours aux réactifs.

Chez des œufs coagulés par les acides et éclaircis par la glycérine au moment où la vésicule germinative n’existe plus que comme une lacune déprimée, la membrane devient encore visible, mais elle est repliée sur elle-même et plissée en tous sens. Il est dès lors impossible de s’assurer qu’elle soit entière; elle pourrait être crevée en plus d’un endroit sans que l’on pût s’en apercevoir. Nous verrons que bientôt après elle commence en effet à se dissoudre et à tomber en morceaux. Mais, que la membrane soit entière ou non, elle forme toujours la limite entre la substance claire et la substance granuleuse du vitellus. Elle n’expulse point son contenu, comme E. v. Beneden l’a cru par erreur.

La tache germinative, pendant la môme période, subit une décomposition non moins marquée. Déjà très-paie au moment où nous l’avons laissée, elle était cependant encore entière et son volume n’était pas sensiblement diminué (PI. 1, fig. 2, no). Traitée par les acides, elle a cependant déjà la propriété de se scinder en un certain nombre d’agglomérations arrondies (PI. II, fig. 1, nog). Ces agglomérations sont arrangées en sphère creuse autour d’un corps central d’apparence plus homogène et sont entourées d’une couche continue formant une sorte de membrane. Cette structui'e, qui n’est encore visible qu’à l’aide des réactifs, a bientôt pour conséquence une dissolution du nucléole visible chez l’œuf vivant. En effet, la tache germinative devient de plus en plus pâle et prend les formes les plus diverses (PI. I, fig. 4, no), tandis que des morceaux se détachent de sa périphérie (PI. II, fig. 2, nog). Enfin elle cesse entièrement d’être visible, tandis qu’une figure étoilée apparaît dans le protoplasme vitellin qui sépare la lacune de la surface de l’ovule (PI. II, fig. 5 et 6, ar). llecourons encore aux réactifs et nous retrouverons les agglomérations de la phase précédente, mais disjointes cette fois, sans

ET LE COMMENCEMENT DE l’iiENOGÉNIE.

enveloppe commune, et formant un groupe irrégulier (PI. Il, fig. 2, nog) dans la partie de la lacune qui avoisine la surface de l’ovule, ou bien déjà plongées dans la substance vitelline qui envahit cette région. Audessous de ce groupe de fragments, on distingue une figure étoilée.

Je propose de donner le nom d’«5/crà ces étoiles, maintenant bien connues, mais dont la nature réelle nous échappe encore et ne peut être que conjecturée. Deux de ces étoiles reliées entre elles prendront pour moi le nom d'amphiaster; quatre étoiles reliées formeront un telrasler. J’ai choisi ce nom d’aster, qui pouria au premier abord sembler peu caractéristique, précisément parce qu’il ne préjuge rien quant à la nature de ces phénomènes.

L’aster donc que l’on voit au-dessous des fragments du nucléole (PI. II, fig. 2, ar) est très-petit, comparé à ceux qui se montreront pendant la fécondation et le fractionnement. Ses rayons vont en divergeant dans la substance vitelline, où ils se perdent aussitôt. Mais quelques-uns de ces rayons, réunis en un faisceau fusiforme, s’étendent du centre de l’aster jusqu’au point où sont réunis les fragments du nucléole, au milieu desquels ils se perdent. La disposition que je viens de décrire est très-fréquente, mais elle n’est pas absolument constante. Il y a d’abord des variations individuelles très-grandes, en sorte que l’on ne rencontre pas deux œufs présentant exactement le même arrangement des parties; puis il y a des variations qui semblent affecter le type même de l’arrangement. Ainsi, l’on trouve des œufs où la tache germinative s’est divisée en quelques gros fragments, ou en fragments très-inégaux et dispersés dans différentes régions de la vésicule germinative, au lieu d’être réunis dans le voisinage de l’aster naissant.

Vu sans l’aide des réactifs, l’aster est très-marqué. Son centre est formé par une tache claire qu’un pédoncule, également dépourvu de granulations, relie à la lacune qui résulte de la métamorphose régressive de la vésicule germinative (PI. I, fig. 6, ar). L’aster se rapproche de la surface, le pédoncule s’allonge et bientôt nous le voyons se séparer entièrement de la lacune. Au lieu d’une seule tache claire en forme de T nous

RECIlEnCHES SUR LA FÉCONDATION

avons mainlenant deux lâches, dont l’une, ovoïde, louche à la surface à laquelle son grand axe esl perpendiculaire, landis que l’aulre, Iransversale, répond au dernier resle de la lacune. Aulour de la lâche ovoïde, les granules vilellins sont arrangés en lignes divergentes (PI. I, fig. 7, no el ai)', mais ces rayons ne sont pas régulièrement disposés anlour de deux cenli’es dislincls. Dans l’intérieur de la tache on distingue des lignes parallèles à son axe longitudinal et qui semblent formées d’un protoplasme plus réfringent que le milieu dans lequel il esl plongé (Pig. 7, F).

Si nous étudions celle phase à l’aide des réactifs, nous voyons les contours de la vésicule germinative reparaître vaguement, la membrane n’exislanl plus que par fragments (1^1. II, fig. 3, 4, 5, EN). Elle manque toujours dans la portion voisine des figures étoilées.

l^a substance de la vésicule diffère du vilellus par une granulation beaucoup plus fine. Près de la surface se trouve un amphiasler très-petit chez lequel les deux asters sont à peine visibles, tandis que le corps oblong qui se trouve entre les deux esl fort bien mai’qué (PI. Il, fig. 3, 4 el 5, Àr'). Ce corps esl strié en long; on pourrait le comparer à un fuseau dont les deux pointes seraient tronquées. Il esl toujours dirigé d’une façon plus ou moins oblique, parfois môme tout à fait horizontale. Cbez d’autres œufs un peu pius avancés, les derniers restes de la membrane de la vésicule germinative ont disparu, mais une tache de substance finement pointillée indique encore la place de la vésicule germinative (PI. II, fig. 6 el 8, No). Chez d’autres encore, celle tache a disparu à son tour el, au lieu d’un amphiaster, je ne vis plus qu’un corpuscule à bords dentelés, renfermant des vacuoles dans son intérieur (PI. II,

Ar'). De celle dernière phase, je ne possède que des préparations à l’acide osmique; je ne suis pas fixé sur la signification qu’il convient de lui assigner. Faut-il considérer ce corps comme résultant de la concentration de la substance de l’amphiasler aulour d’un des asters, tandis que l’autre disparaîtrait? Faut-il admettre une disparition des deux asters pour former une masse qui se changera bientôt en un nouvel

ET LE COMMENCEMENT OE L’iiïiNOGÈNlE.

amphiasler? Ou bien devons-nous croire à une période d’inactivité pendant laquelle ramphiaster se ramasserait sans cesser d’exister? Dans cette dernière supposition qui paraît plus plausible, par analogie avec ce qui se passe chez d’autres animaux, il faudrait admettre que le corps compacte et à bords étoilés que j’ai décrit ne serait en réalité qu’un ampbiaster peu accentué et défiguré par l’action de l’acide osmique. C’est celte supposition qui s’accorde le mieux avec les faits observés chez les autres animaux et que je considère comme la plus naturelle. En effet, les préparations faites avec les acides nous montrent bientôt de nouveau un anifthiaster complet et dirigé à peu près perpendiculairement à la surface de l’ovule. C’est le premier amphiaster de rebut (PI. II, fig. 9). Mais avant de décrire la formation des globules polaires, je dois encore rapporter ce que j’ai pu observer sur le sort de la tache germinative.

Nous avons vu qu’au moment où le premier aster se montre au-dessous de la vésicule germinative qui disparaît, plusieurs rayons de cet aster vont se perdre au milieu d’un amas de fragments de la tache germinative (PI. II, fig. 2), en sorte que l’on ne sait trop s’il n’y a pas un second aster au milieu de ces fragments. Mais cette disposition est loin d’être constante; dans les cas où les fragments du nucléole sont dispersés, l’on peut s’assurer qu’il n’y a d’abord qu’un seul aster et non un amphiaster. Un peu plus tard l’on trouve un amphiaster indubitable dans une position à peu près horizontale (PI. II, fig. 3-6, Ar'). A ce moment, la plupart des fragments de la tache germinative ont disparu et ceux qui restent (PI. II, fig. 3, 4, 5 et 8, nog) sont généralement assez éloignés de l’amphiaster de rebut. Ces fragments sont souvent gros, toujours arrondis et présentent souvent de petites vacuoles dans leur intérieur (Fig. 4 et 8, nog). Rarement j’ai obtenu des images, dans lesquelles un reste de la tache germinative était relié à l’un des asters de l’ampbiaster de rebut, par un fdament de substance assez réfringente. Dans l’un de ces cas le fragment de nucléole avait une forme de fer à cheval et le filament connectif était très-évident (PI. II, fig, 3).

KECMliUCHES SUll l.A FECONDATION

Si, d’une part, les images les plus fréquentes, qui montrent les fragments du nucléole dispersé, parlent pour la formation de l’amphiaster de rebut sans participation de la tache germinative, les images plus rares que je viens de décrire indiquent que cet élément pourrait contribuer dans une proportion minime à sa formation. Il s’agit ici du reste de choses si délicates qu’une erreur d’observation est toujours possible, et je n’ai pas consacré à cette question tout le temps qu’elle aurait réclamé. Je préfère donc considérer la participation delà tache germinative à la formation de l’amphiaster de rebut comme improbable, mais sans oser la nier absolument.il est certain, en tous cas, que la majeure partie de cette tache se dissout simplement dans la substance de la vésicule germinative.

Quant à la couche limitante ou membrane de la vésicule, il n’est pas possible de douter que sa presque totalité ne disparaisse à l’endroit même où elle se trouve, par simple dissolution dans la substance environnante du vitellus. Sur les figures 2, 3, 4, 5 et 6 de la planche II nous voyons cette couche se réduire en fragments et ses fragments disparaître sans changer de place. Il ne reste une incertitude qu’au sujet de la portion de cette membrane qui touche à l’amphiaster de rebut. En effet, au moment où la membrane de la vésicule se dissout, l’amphiaster de rebut (PI. II, fig. 8, Fc) présente dans son plan neutre un renflement au milieu de chacun des filaments bipolaires. A quelque distance de cet amphiaster l’on voit les restes du nucléole plongés dans la substance finement granuleuse de la vésicule germinative. Souvent j’ai vu à ce moment les filaments bipolaires s’écarter comme un double éventail vers l’intérieur de la vésicule, et dans le plan neutre de ces filaments déviés se trouvaient des corps de formes irrégulières, angulaires et assez foncés (Fig. 3, page 21). Ces corps proviennent-ils de la tache' germinative ou d’un fragment de la membrane de la vésicule? Je ne sais. Mais leur aspect ferait plutôt penser à un fragment de la membrane. Ces observations sont insuffisantes, comme on le voit; je ne les rapporte en détail que pour éveiller l’attention sur toute une série de problèmes à résoudre.

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÈNOGÈNIE.

Fig. 3.

Petite portion d’un vitelliis renfermant l’amphiaster de rebut avec les varicosités de Bütschli et un corps irrégulier dans son plan neutre. Un peu plus haut se voit une partie finement granuleuse où se trouvait la vésicule germinative et un corpuscule rond, dernier reste de la tache germinative. Préparation à l’acide picrique. Grossissement

Reprenons maintenant l’ovule au moment où il ne présente plus de vésicule germinative, mais seulement une tache ovoïde perpendiculaire à la surface (PI. I, fig. 8, Ar') et dans laquelle les acides font voir clairement un amphiaster complet (PI. II, fig. 9, F). De la vésicule germinative et de sa tache il ne reste plus aucune trace. Le centre de l’aster extérieur touche à la surface, en sorte qu’il ne reste guère qu’une moitié de ses rayons. L’aster intérieur est complet, et, entre les deux, se trouve un ensemble fusiforme de filaments bipolaires, sans renflements, qui se perdent à leurs deux extrémités. Bientôt la surface commence à se soulever devant l’aster périphérique et forme une bosse qui est parfaitement transparente dans des préparations vivantes (PI. I, fig. 9, Cr' ). La substance transparente occupe encore un espace ovoïde. Autour de l’extrémité interne de cet ovoïde, les granulations vitellines sont arrangées en lignes divergentes, laissant entre elles des rayons de sarcode régulièrement distribués. Les acides font voir en ce moment un amphiaster bien net (PI. II, fig. 10, Ar' ). L’aster extérieur n’est plus qu’un demi-aster, puisque son centre touche au sommet de la protubérance. Les filaments bipolaires présentent des renflements peu accentués.

KKCHEHCHES SOU LA FÉCONDATION

Lu protubérance s’allonge de plus en plus et les lilamenls bipolaires deviennent visibles meme sans l’emploi d’aucun réactif (PI. tig. 10 et 11, F). Pu is la protubérance commence à s’arrondir au sommet, tout en se resserrant à la base (PI. I, tig. 11 et 13, Cr'). Les réactifs montrent que la moitié interne seulement de l’ampliiaster est restée dans le vitellus, tandis que sa moitié extérieure constitue la protubérance en train de se détacher (PI. II, fig. 11, Cr' ). Dans l’intérieur de cette protubérance l’on voit souvent encore les restes des rayons bipolaires (Fig. 4-); on les voit même souvent très-bien sur des préparations

Fig. 4.

Petite portion iPuii vitellus avec son enveloppe muqueuse et la première sphérule de rebut en train de se détacher. L’amphiaster de rebut est divisé en deux moitiés, dont l’une constitue le globule polaire et n’est plus reconnaissable que par une série de grains verticaux, et l’autre, encore complète, reste dans le vitellus. Préparation à l’acide picrique.

vivantes (PI. I, fig. 11 et 14, Fc). D’autres fois cette moitié externe de l’amphiaster disparaît promptement et se résout en des corpuscules irréguliers (PI. II, fig. 11, Cr' ). La moitié interne de l’amphiaster conserve par contre sa structure intacte et l’on voit, en particulier, fort bien un renllement allongé sur chacun des filaments bipolaires.

La protubérance se détache maintenant du vitellus, pour constituer le premier globule polaire. Le procédé de séparation diffère de celui qui s’observe dans la plupart des divisions cellulaires, ou dans le fractionnement de l’ceuf, par plusieurs détails qui ont quelque importance. D’abord nous ne voyons pas le globule s’arrondir au point de ne toucher le vitellus que par une surface extrêmement petite, et s’affaisser, une fois la division

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÈNOGÉNIE. 23

opéréC;, comme c’est le cas dans le fractionnement ordinaire. Le globule reste accolé au vitellus par une surface relativement large et la séparation n’a lieu que très-lentement, par un processus presque impossible à observer directement. En second lieu nous ne voyons pas les rayons de l’amphiaster coupé en deux se retirer aussitôt vers les centres des asters respectifs, pour contribuer à la formation des noyaux des deux nouvelles cellules. Les rayons qui font partie du globule polaire restent longtemps distincts et les renflements des rayonsbipolaires, que j’ai nommés les granules de Bütschli, persistent quelque temps après que la division est accomplie (PI, II, fig, 13, Fc). Plus lard, nous trouvons dans le globule polaire des granules et des vacuoles, présentant des formes et des arrangements irréguliers et inconstants (PI. II, fig. 14, Cr' et fig. 16, Cr"). Longtemps après la constitution du globule polaire, ces parties s’arrangent de façon à former un noyau relativement très-gros et entouré d’une couche de sarcode; encore cette constitution du noyau n’est-elle pas absolument constante (PI. II, fig. 19). La moitié de l’amphiaster qui reste dans le vitellus ne se ramasse pas non plus immédiatement sous forme de noyau ; loin de là, elle se transforme directement en un nouvel amphiaster.

Enfin, et c’est encore une différence notable, l’aster extérieur de l’amphiaster ne se trouve pas dans l’intérieur de la protubérance ou du globule polaire qui est en train de se détacher. Il se trouve au sommet de la protubérance, de telle façon que le centre de l’aster se trouve à l’extrémité de la bosse et que les rayons ne s’étendent que sur un des côtés de ce centre. Ces particularités s’expliquent par la nature et le rôle physiologique de ces globules polaires, rôle qui leur a fait donner le nom de sphérules de rebut.

La moitié de l’amphiaster restée dans le vitellus se raccourcit et passe par une période de repos assez brève. Sa disposition reste la même que pendant la formation du premier globule polaire, mais s’efface momentanément un peu. Puis elle devient de nouveau plus nette, au moment où le travail d’expulsion recommence; les filaments bipolaires s’allongent.

l’asler devient pins grand, plus marqué et s’éloigne de la surface. Les filaments bipolaires allongés forment de nouveau un faisceau fusiforme, dont l’extrémité intérieure répond au centre de Taster, tandis que l’extrémité extérieure {aé) se trouve à la surface du vitellus (PI. II, fig. 12, Ar"). Ce point de convergence externe n’est pas encore entouré de rayons; mais bientôt nous voyons les rayons unipolaires naître autour de lui, en sorte que nous obtenons exactement la même image qu’au moment où le premier globule polaire allait se former (PI. II, fig. 13, Ar"). L’aster extérieur de ce second amphiaster se trouve rarement en face du premier globule polaire. Il est presque toujours à côté du point de contact du vitellus avec ce dernier, et l’axe de l’amphiaslor est presque toujours oblique (PI. II, fig. 12 et 13). Le mode de formation de la seconde sphérule de rebut est exactement pareil à celui de la première sphérule. Ce second globule se place tantôt à côté du premier, tantôt il le repousse et se place alors plus ou moins directement au-dessus de lui.

La moitié du second ampbiaster de rebut qui reste dans le vitellus se comporte tout autrement que la moitié interne du premier amphiaster, elle se ramasse sous forme de noyau ainsi que j’aurai à le décrire plus loin.

Les sphérules de rebut doivent, en sortant, se trouver en rapport avec la couche superficielle ou limitante du vitellus; et l’observation exacte de ce point spécial est d’un grand intéiêt pour l’idée que nous devons nous faire des propriétés de cette couche. Au moment où la protubérance de rebut commence à se montrer, l’on peut encore distinguer cà grand’peine, à son bord, une mince couche, de même aspect que la couche superficielle du vitellus, avec laquelle elle est en continuité, mais très-amincie, surtout au sommet du globule. Cette couche est très-difficile à distinguer de la substance transparente qu’elle recouvre; et si j’ai parfois cru reconnaître une limite entre les deux, je l’ai souvent aussi cherchée en vain. Quoi qu’il en soit, cette distinction cesse d’être possible aussitôt que la protubérance est un peu accentuée (PLI, fig. 9 à 11); les acides même no font pas apparaître une ligne de démarcation. Faut-il ad-

ET LE COMMENGEiMENT DE l’HÈNOGÈNIE.

meltre pour cela que la couche limilanle du vitellus ne se continue pas sur la surface du globule polaire et que celui-ci en sortant ne fasse que percer cette couche? Je ne le pense pas, car la manière lente et progressive dont les sphérules de rebut poussent et se détachent exclut l’idée d’une couche résistante qui se percerait pour laisser échapper une substance semi-liquide. De plus il ne faut pas perdre de vue que la couche limitante, qui est hyaline et transparente, doit être bien difticile à distinguer de la substance, également transparente et de même pouvoir réfringent, qui entoure l’amphiaster de rebut, et cela surtout dans un endroit où cette couche se trouve amincie. Dès que la sphérule de rebut est détachée, les acides font apparaître à sa surface une couche hyaline, plus mince de moitié que la couche limitante du vitellus (PI. lî, fig. 11- 13, Ecr) \ celle couche pourrait, il est vrai, s’être différenciée au moment de la séparation, mais il serait plus naturel d’admettre qu’elle était préexistante. Au surplus, la manière dont se comporte la couche limitante du vitellus, au moment où la division s’achève, me paraît trancher la question.

Tant que la sphérule de rebut est attenante au vitellus de façon à n’en être qu’un appendice (PI. 1, fig. 9, Cr), la surfacedu vitellus reste lisse et régulièrement arrondie. Mais lorsque le pédoncule de la sphérule de rebut se met à se rétrécir et à s’étrangler, le vitellus présente autour de ce pédoncule un enfoncement circulaire, une dépression de peu d’étendue qu’entoure un système de plis radiaires (PI. I, fig. 12, P). Ces plis ont tous le pédoncule pourcenlre, quoiqu’aucund’euxn’arrive jusqu’à lui. A la périphérie, ils s’abaissent petit à petit et s’effacent bientôt complètement. Le point où ils alleignenl la plus grande élévation est voisin de la dépression centrale (voy. fig. 5, p. 26). Ces plis, et naturellement aussi les sillons qui les séparent, deviennent de plus en plus marqués, Jusqu’au moment où la sphérule de rebut achève de se détacher (PI. ï, fig. 12), après quoi ils s’effacent lentement et disparaissent. Ces phénomènes se reproduisent exactement les mêmes lors de la sortie du second globule polaire (PI. II, fi g. 22). Ce plissement n’est pas un phénomène isolé; nous le

î’ig. 5.

Partie formative du vitcllusavec sou enveloppe muqueuse, la première spliérule de rebut achevant de se détacher et les plis radiaires formés par la surface du vitellus et sa couche limitante. Qiluf vivant.

lelrouvons, quoique moins accenlué dans le fraclionnement de divers œufs. Il semble indiquer en général la présence d’une couche superficielle plus inerle, moins vivante que le protoplasme qu’elle entoure, mais attenante à ce protoplasme de façon à ne s’en détacher que difficilement. Dans les cas cependant où celle couche conslilue une véritable membrane, elle finit toujours, quelque élastique qu’elle puisse être, par se détacher du vitellus pour revenir tà sa position première; c’est ce qu’elle fait instantanément sous Fintluenco des réactifs acides, comme nous le verrons bientôt à propos du fraclionnement chez l’Oursin. Dans les cas où celle couche n’est pas encore une véritable membrane, comme par exemple dans la formation des globules polaires chez l’ovule de l’Astérie, elle suit la division du protoplasme, forme une enveloppe autour de chacun de ses fiagments et ne reprend jamais sa position première, même si l’on fait agir des acides avant que la division soit opérée. Jamais l’on ne voit celle couche s’étendre sans interruption d’une sphérule à l’autre en passant par-dessus le sillon, et jamais l’on ne voit le protoplasme se diviser sans que celte enveloppe se divise en même temps.

Une fois les sphérules de rebut constituées, leur couche superficielle se différencie en une membrane véritable, formant autour de chacune d’elles une enveloppe complète; et quoique les deux sphérules soient attenantes l’une à l’autre et à la surface du vitellus par ces membranes qui restent adhérentes entre elles, elles ne sont pourtant jamais reliées

ET LE COMMENCEMENT DE l/lIÈNOGÉNlE. 27

au vilellus par une membrane commune, si l’on fait abstraction de la couclie mucilagineuse.

J’en reviens aux choses qui se passent dans le vitellus pendant que les sphérules de rebut achèvent de s’individualiser. Après la formation de la seconde de ces sphérules, il ne reste dans le vitellus que la moitié du second amphiaster de rebut, avec ses rayons unipolaires et les demirayons bipolaires munis chacun de son renflement (PI. II, fig. 15 ai et PI. I, fig. 17 Ar"). Aucun autre centre formatif ne se montre dans toute l’étendue du vitellus qui est parfaitement homogène, sauf la couche superficielle continue dont les propriétés optiques sont les mêmes qu’auparavant. Les divers rayons de l’aster se ramassent et disparaissent comme tels; mais leur substance réunie, celle surtout des filaments bipolaires, forme un petit corpuscule qui est très-difficile à distinguer à l’état de vie. Il apparaît alors comme une petite tache transparente, que les acides et surtout l’acide osmique suivi de carmin rendent très-apparente. Cette tache claire (PI. I, fig. 18 ai) reste d’abord immobile tout en augmentant graduellement de volume ; elle se déplace, lentement d’abord, puis de plus en plus vite de la périphérie vers le centre du vitellus (PI. I, fig. 19, 20 et 23 V et PI. II, fig. 16 à 19 v). A côté de cette première tache pâle, l’on voit apparaître d’autres taches d’abord très-petites, qui grossissent rapidement et se rapprochent de la première (voyez fig. 6); elles la suivent dans son mouvement centripète et finissent toujours, tôt ou tard, par se

Fig. 6.

Les globules polaires et la partie avoisinante du vitellus d’Asterias glacialis au moment où les globules polaires sont tout à fait détachés et où Paster interne du second amphiaster de rebut se change en de petites taches qui ont l’aspect de petits noyaux irréguliers. Préparation à l’acide picrique.

5K(JiE!’.CHES SI' 54 LA FLCONLATiOX

l'usioiiiier avec elle. Ces ladies claires sont enlomées d’im sysième de rayons divergents qui augmentent rapidement d’étendue pendant la croissance des taches (PI. 1, fsg. 19-21) et disparaîtront lorsijue le pronucléus sera devenu stationnaire (PI. f, fig. 23 v). La disposition des taches n’a rien de constant, comme le montrent les nguies; elle varie d’un œuf à l’antre. Les acides suivis de glycérine donnent à ces espaces clairs l’aspect de petits noyaux et les font ressortir en foncé sur la substance plus claire du vitellus (PI. îl, fig. 10-19 v). L’on y distingue alors une couche enveloppante très-irrégulière et d’autant plus épaisse relativement que le noyau est plus petit. Dans l’intérieur de ces petits noyaux l’on discerne un ou plusieurs nucléoles qui croissent en même temps que le noyau qui les renferme (PI. Il, fig. 19 vw).

De la réunion de tous ces amas de substance nucléaire résulte un noyau qui va encore en croissant un peu pendant que son mouvement se ralentit. Il s’arrête à peu près au tiers du diamètre du vitellus, soit aux deux tiers du rayon (voyez fig. 7); les lignes divergentes qui l’entouraient

Fig. 7.

L’ovule entier, sans ses enveloppes, avec ses globules polaires, retenus par une mince pellicule, et son pronucléus femelle achevant sa croissance et encore entouré de stries radiaires peu nettes. Œuf vivant. ®°°/i.

persistent encore tant que continue sa croissance. Puis ces lignes s’effacent et finissent par disparaître et l’ovule entre dans une période d’inac-

ET lÆ COMMENCEMENT DE l’hÈNOGENI E. 29

livilé iibsoluc. Le noyau doiU il esl muni est, comme nous le venons clans le cliapilre snivanl, un pronncléus femelle.

Tonies les modifications cme Tovnle a éprouvées jusqu’ici ont été occasionnées par le simple contact de l’eau de mer sans fécondation préalable. Chez des omfs fécondés avant la sortie des globules polaires, les phénomènes que j’ai décrits se retrouvent exactement les mômes à un seul détail près. Comme la membrane vitelline se détache du vitellus et se durcit au moment de la fécondation, il en résulte que les globules polaires sont en dehors de la membrane chez des œufs fécondés avant la sortie de ces globules et en dedans de cette membrane lorsque la fécondation a été faite plus tard. Abstraction faite de ce détail, les phénomènes décrits sont les mêmes dans les deux cas, mais ils sont en général un peu plus rapides chez les œufs fécondés.

Chez les Oursins que j’ai plus particulièrement étudiés, à savoir le Sphœrechinus brevispinosus et le Toxopneustes lividiis, la structure de l’ovule est, à première vue, bien différente de celle des Astéries. Le Sphœrechinus esciilentus et X Echinocidaris œquiluberculatus m’ont paru se comporter de la même façon, quoique je ne les aie pas examinés avec le même soin. Ma description se rapporte donc aux deux premières espèces citées, toutes les fois que le contraire ne sera pas expressément indiqué.

L’ovule mûr, tel que nous le rencontrons au moment de la ponte, ou même tel qu’il se trouve remplissant en nombre immense les ovaires arrivés à parfaite maturité, se compose d’un vitellus uniformément granuleux, présentant à sa surface une couche limitante, et, dans son intérieur, un noyau qui ressemble parfaitement au pronucléus femelle de l’Astérie. Cet ovule est encore entouré d’une couche gélatineuse ou mucilagineuse, à structure radiaire. Les recherches les plus assidues ne révèlent pas à sa surface la moindre trace de globules polaires.

L’ovule avant la maturité présente un aspect très-différent et ressemble beaucoup à l’ovule de l’Astérie au moment de la ponte (PI. V, fig. 1). Une grande vésicule germinative de 0,054 millimètre occupe tout le

HECllliUCnES SUE LA Ff<:CON DATION

milieu du vilelliis dans luîe posiliou plus ou moius exceiilri([ue. Le couteuu de la vésicule esl séparé de la subslance vilelline par une couclie limilaule ou rnembraue plastique à double contour (EN). L’intérieur de la vésicule est occupé par un réticulum de filaments de sarcode suspendu dans un liquide (PI. V, fig. 1, Nor). Si l’on soumet un de ces ovules, cà l’état frais, à une compression suffisante pour expulser la vésicule, l’on voit le contenu de celle-ci, où le réticulum a disparu, se comporter comme un liquide presque aussi clair que de l’eau; la membrane de la vésicule se comporte comme une couche éminemment élastique et même plastique. Je peux renvoyer à cet égard cà ce que j’ai dit à propos de l’ovule pondu de l’Astérie.

Dans l’intérieur de la vésicule se trouve la tache germinative trèsapparente, très-réfringente et mesurant 0,011 millimètre en diamètre (PI. V, fig. 1, no). Ce nucléole renferme, le plus souvent, des vacuoles irrégulières (nov).

La couche superficielle du vitellus (Ev) esl plus nettement séparée de la substance vitelline que ce n’est le cas chez le même ovule arrivé à maturité. Néanmoins celte couche est, comme nous allons le voir, assez molle pour n’opposer aucune résistance à la sortie des sphérulesderehul. Elle esl enveloppée à son tour d’une couche mucilagineuse mince (PI. V, lig. 3, Æ'm) qui se gonfle dès que l’ovule est mis dans l’eau et présente aussitôt la structure radiaire. Je n’ai pas observé d’épithélium autour de celte couche qui est évidemment l’homologue de l’oolème pellucide de l’œuf d’Astérie, mais je n’oserais affirmer que cet épithélium folliculaire n’existe pas.

Quoique je n’aie pas fait rentrer la formation première des ovules dans le cadre de mes recherches, je dois noter que les ovules jeunes tapissent à la manière d’un épithélium la face interne delà paroi |de l’ovaire. Ils restent longtemps attachés à celle paroi et, lorsque le vitellus approche de la grandeurnormale, la subslance vilelline fournit souvent un prolongement dont l’extrémité adhère à la paroi ovarienne. Ce pédoncule traverse l’oolème pellucide en un point où ce dernier présente une solution de conli-

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÈNOGÉNIE.

nuilé. Chez des ovules plus avancés dans leur développement et devenus libres dans la cavité de l’ovaire, l’on trouve souvent un reste de ce prolongement vitellin et de l’ouverture qui lui répond dans la couche mucilagineuse (PI. V, fig. 4, Les ovules qui présentent celte particularité sont très-fréquents dans les partis d’œufs obtenus par dilacération de l’ovaire imparfaitement mûr. Le prolongement se présente alors sous forme d’une protubérance conique composée de la substance granuleuse du vilellus et recouverte parla substance limitante. Les dimensions et l’aspect de ce cône sont très-variables; il rentre dans le vilellus déjà avant la parfaite maturité et disparaît ainsi que l’orifice de la couche gélatineuse.

Ainsi donc, l’ovule ovarien de l’Oursin arrivé à maturité, répond trèsexactement à l’ovule de l’Astérie qui a séjourné plusieurs heures dans l’eau de mer, et l’ovule de l’Oursin avant sa maturité répond à celui de l’Astérie arrivé au point où il est évacué par la mère. Il me paraissait donc probable que l’ovule de l’Oursin parcourait dans le sein de l’ovaire les mêmes phases que parcourt celui de l’Astérie lorsqu’on l’a plongé dans l’eau de mer. Mais il était avant tout indispensable de retrouver ces phases et je rencontrai dans celle recherche des dilficullés que je ne pus surmonter qu’à force de patience. Il était d’autant plus nécessaire d’éclaircir ce point que les deux auteurs qui se sont le plus particulièrement occupés du premier développement de l’Oursin, Derbès et O. Herlwig, arrivent tous deux à la conclusion que le noyau de l’ovule mûr n’est que le nucléole de l’ovule avant sa maturité. Derbès, il est vrai, n’admet celle identité du pronucléus femelle et du nucléole qu’à litre de supposition plausible. Mais d’après O. Herlwig, la vésicule germinative .se porterait vers la surface du vilellus et serait éliminée dans son entier. La tache germinative seule resterait dans le vilellus et deviendrait le pronucléus femelle. Je renvoie le lecteur pour plus de détails à la partie bibliographique de ce chapitre.

Les observations de Herlwig ayant été faites sur des ovules placés dans le liquide qui remplit la cavité du corps de l’Oursin, j’employai d’abord celle méthode avec un résultat tout dilférent de celui qu’avait obtenu mon

prédécesseur. Je mis donc les ovules frais dans ce liquide el m’attachai à observer les exemplaires, en général très-clair-semés^ qui possédaient encore leur vésicule germinative. La plupart de ces œufs se décomposèrent après trois ou quatre heures de séjour dans le liquide; je décrirai plus loin ces phénomènes de décomposition. Mais après plusieurs essais infructueux, je finis par rencontrer quelques ovules dont la vésicule et la tache germinative disparurent de la même manière à peu près que chez l’Astérie el firent place à un amphiaster bien accentué et relativement beaucoup plus grand que chez l’Étoile de mer (PI. V, fig. 5, Àr). Puis j’ai vu cet amphiaster donner naissance à un globule (PI. V, fig. 7, Cr) exactement comme chez l’Astérie, avec cette seule différence que ce globule est bien plus gros, compai'alivemenl à la grosseur de l’ovule qui lui donne naissance. Une fois j’ai vu nettement une rangée de granules de Bütschli dans l’intérieur de celle sphérule de rebut, près de son extrémité attenante au vitellus, et d’autres petits grains à son extrémité opposée (PI. V, fig. 8, Fc). Aucun des ovules observés ne put dépasser ce point; tous se décomposèrent, par suite, sans doute, de la décomposition inévitable du liquide, dans lequel ils étaient plongés. Mais les faits recueillis suffisent h montrer que dans les conditions de celle expérience, les ovules passent par les mêmes processus de maturation que ceux de l’Astérie placés dans l’eau de mer.

Ceux des ovules mal mûrs qui se décomposent passent souvent par une phase que je crois devoir décrire. Chez ces œufs, la vésicule germinative se ratatine el sa membrane se replie sur elle-même encore bien plus que dans le cas normal (PI. V, fig. 4, EN); et malgré celle réduction, malgré cette absorption du liquide de la vésicule par la substance vitelline, la membrane reste en apparence à peu près intacte; elle peut être déchirée, mais elle ne se dissout pas. Le nucléole se trouve tantôt dans la membrane repliée, tantôt en dehors de celle membrane qui, dans ce cas, doit avoir subi une déchirure; il est séparé du vitellus granuleux par une certaine épaisseur de substance transparente provenant sans doute de rinléi iem* du noyau de l’ovule (PI. V, fig. 3, el 4, no).

Eï LE COMMENCEMENT DE l’hÈNOGÈNIE. 33

Mais ce nucléole ne sort pas du viteîlus, pas plus que le résidu de la vésicule germinative.

Les résultats de O. liertwig restaient donc inexplicables pour moi, lorsque, ayant mis des œufs ma! mûrs dans un compresseur, je vis la vésicule germinative se transporter à la surface et crever à l’extérieur; mais, vérification faite, il se trouva que ces œufs étaient un peu pressés par le couvre-objet du compresseur. J’ai retrouvé depuis les mêmes faits en plaçant d’autres partis d’œufs dans les mêmes conditions. Cette évacuation du contenu de la vésicule germinative, tandis que le nucléole reste généralement dans le viteîlus, ne doit pas être confondue avec la conséquence d’une compression, d’un écrasement rapide de l’œuf. C’est moins un phénomène physique qu’un phénomène pathologique provoqué artificiellement; il ne semble pas que ce soit le résultat direct de l’action mécanique. Le processus d’expulsion est trop lent pour admettre cette dernière explication et surtout il est accompagné de mouvements amiboïdes du viteîlus, ce qui n’est pas le cas chez un œuf simplement écrasé. Ce n’est pas que je considère les mouvements amiboïdes comme une preuve certaine de vitalité normale. J’ai au contraire la conviction que ce genre de mouvements est beaucoup plus rare qu’on ne l’admet généralement et que la plupart des phénomènes de ce genre décrits, ces dernières années, chez diverses eellules des animaux supérieurs, ne sont en réalité que des processus morbides attribuables aux conditions dans lesquelles ces cellules ont dû être placées pour rendre l’observation possible. L’on a cru voir des cellules pleines de vie là où il n’y avait en réalité que des cellules agonisantes. Tel est cei tainement le cas des mouvements de ces ovules d’Oursins, tirés de l’ovaire avant leur maturité et dont la vésicule germinative vient erever à la surface.

Une question restait encore à résoudre. Je savais que l’ovule de l’Oursin, placé dans le liquide du corps, pouvait se comporter comme celui de l’Astérie placé dans l’eau de mer; mais il n’en résultait pas nécessairement que le processus de maturation de l’ovule dans le sein de l’ovaire fût bien le même. 11 y avait sans doute une forte présomption en

HIXHERCHES SE R LA FÉCONDATION

faveur de celle supposilion, mais pour changer celle présomplion en cerlilude, il fallail relrouver dans l’ovaire les phases si caraclérisliques de la formalion des globules polaires. Dans ce bul je plongeai dans les acides des ovaires enliers de l’Oursin, les déchirai promplemenl afin d’oblenir une coagulalion inslanlanée el passai ensuile en revue, dans de la giycérinoélendue ou dans de l’alcool dilué, les ovules oblenus en dilacéranl les ovaires durcis de la sorte. L’on ne peut rien imaginer de plus fastidieux ni de plus décourageant que celte recherche. Des milliers d’œufs furent examinés; mais Ions étaient ou mal mûrs ou déjà trop mûrs; tous avaient, soit la vésicule germinative, soit le pronucléus femelle. Lufin je m’avisai de prendre les Oursins peu de temps apres l’évacuation des produits sexuels mûrs, c’est-à-dire pendant le dernier quartier de lune. Choisissant les exemplaires dont l’ovaire, encore très-petit, semblait commencer à se remplir, tout en présentant encore une coloration très-pâle, j’en trouvai dont les ovules possédant encore la vésicule germinative el les ovules déjà munis du pronucléus femelle étaient à peu près en nombres égaux. Ces ovaires-là, traités de la manière ci-dessus indiquée, me donnèrent un bon nombre de phases de maturation, montrant l’amphiasler de rebut el la sortie d’une sphérule de rebut. J’ai représenté, sur les fig. 6 el 7 de la planche V, deux des phases ainsi obtenues. L’une montre un grand amphiaster de rebut, l’autre un globule polaire en train de soi tir et un système de rayons très-accentués autour de l’aster intérieur de l’amphiaster. Le nombre et la clarté des préparations que j’ai obtenues ne me permettent plus de douter (pie ces phases ne répondent bien réellement au processus normal de la maturation dans l’ovaire de l’Oursin.

Pour obtenir ces préparations je recommande, outre les précautions indiquées ci-dessus, de durcir l’ovaire, rapidement déchiré en morceaux, pendant peu de minutes dans de l’acide osmique à 1 puis de laver avec de l’eau de mer les fragments el les œufs répandus el de les laisser dans une solution de bichromate de potasse; entin de les teindre faiblement au carmin avant de les mettre dans la glycérine.

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÉNIE.

Gliez Sagilla, in maliirnlion de l’oviile présenle quelques parliculari' lés iuléressanles que je vais esquisser. L’espèce qui a servi à mes études n’a pas encore de nom dans la science, quoiqu’elle ail été décrite d’une manière reconnaissable par Gegenbaur (lxx, p. 5). 11 s’agit de la première des deux espèces nouvelles brièvement décrites par cet auteur qui les a laissées innommées. Je propose de la désigner du nom de Sagilla Gegenhauri en adoptant le diagnostic donné par Gegenbaur et qui me paraît suffisant; elle est très-abondante dans le port de Messine pendant les mois d’hiver,

Chez celle espèce, la tache germinative fait défaut non-seulement chez les ovules mûrs, mais même chez des ovules très-jeunes. Celte parlicularilé n’est pas caractéristique du genre Sagitia, car je connais d’autres espèces où l’ovule possède un nucléole; j’ignore si elle est limitée à l’espèce que j’ai étudiée, ou si elle se retrouve chez d’autres espèces du même genre. Quoi qu’il en soit, l’importance de ce fait subsiste, car il montre clairement que le rôle joué parle nucléole dans le développement de l’ovule ne peut pas être de premier ordre.

L’ovule à peu près mûr se compose d’un vitellus considérable renfermant une grande vésicule germinative. A la surface se trouve une couche limitante, assez mince et peu nette, autour de laquelle l’on découvre encore une enveloppe, assez mince tant qu'elle se trouve dans l’ovaire, mais qui se gonfle dans l’eau oû elle devient invisible; sa présence ne peut être alors reconnue que par les corps étrangers qui viennent à s’y fixer. Le vilellusse compose de globules lécithiques relativement gros et d’un stroma de sarcode, qui les enveloppe et les lient en suspension. Malgré leur différence de composition chimique, ces deux suhstances ont un pouvoir de réfraction tellement semblable qu’il est extrêmement difficile de les distinguer et surtout de distinguer la ligne de démarcation autour de chaque globule. L’une et l’autre sont parfaitement incolores et transparentes en sorte que l’œuf échappe facilement à l’observation. C’est un phénomène d’adaptation au milieu ambiant fort commun chez les animaux pélagiques. Levilellus est, du reste, extrêmement aqueux; l’on

RF.aiEUCMES Sl'îl LA FÉCONDATION

s’en ;i perçoit ;iussitôl (joe S’on cherclic à !e lr;iiler par les i'éadi!‘s,c;ir il se lalalitîc dans des solutions qui n’allèi'ent en rien la rormc des œufs d’Écliinodermcs. il ne m’a pas été jiossiblc de coaguler, sans les dél’ormcr, les œufs de Saijitla même en employant des solutions trèsétendues.

La vésicule germinative des ovules presijue mûrs se jirésente sous la l'orme d’une grande vacuole ronde, pleine d’un liquide moins réfringent que le vitellus. Je n’ai pas de raisons de croire que la couche limitante de cette vésicule soit absente, car, pour les raisons indiquées, je ne me suis pas attaché à étudier des œufs coagulés qui ne m’auraient donné que des résultats peu satisfaisants. Pour le môme motif,jeneme hasarderai pas . à nier l’existence d’un réseau de sarcode, dans l’intérieur de la vésicule germinative, quoique je ne l’aie pas obsei'vée chez l’ovule vivant. L’on sait en efl'et que ce réseau de sarcode de même que la couche limitante de la vésicule, ne sont guère visibles chez les ovules vivants d’Échinodermes qui sont cependant bien plus favorables, en ce sens qu’on les étudie isolés, tandis que l’on est obligé d’étudier les ovules de Sagitta dans l’intérieur du corps de l’animal, à travers ses téguments.

L’ovule, tel que je viens de le décrire, se rencontre en général tà la partie supérieure de l’oviducte. A mesure qu’il se rapproche de l’orifice de ce canal, il subit des modifications qui l’amènent à l’état de parfaite maturité. La vésicule germinative diminue de volume et finit par disparaître. Il semble au premier abord qu’il ne reste plus après cette dissolution qu’un vitellus uniforme dans toute son étendue. Mais un examen attentif fait découvrir, vers le point où la vésicule a disparu, un peu plus près de la surface du vitellus, un corpuscule compacte, à bords étoilés; ce corpuscule devient surtout bien visible chez des œufs traités successivement par des solutions très-faibles d’acide osmique et de bichromate de potasse. L’on distingue alors, dans son intérieur, une rangée verticale de petits grains réfringents qui ne sont que la coupe optique d’un plan formé par l’ensemble de tous ces grains (PI. X, fig. 1, Fc). Ce corpuscule ressemble beaucoup à celui que j’ai trouvé à une certaine phase de

ET LE COiMMENEEMENT DE l’!I(< NOGÈME. 37

la maluraliüi) de Tovule de l’Astérie et que j’avais mis en évidence par les mêmes réactifs.

L’ovule de notie Sagilla est ariivé maintenant au point où il est lejeté au dehors; il ne paraît pas subir d’autres modifications dans l’intérieur de l’oviducte.

La ponte a lieu invariablement vers le moment du coucher du soleil i c’est un autre désavantage sérieux pour ces œufs qui sont du reste si admirablement appropriés à l’étude des phénomènes intimes. L’on ne peut donc examiner leur développement normal qu’à la lumière de la lampe, l’on ne peut, à cause de leur grosseur, leur appliquer de forts objectifs et il est bien difficile de fixer les phases à l’aide des réactifs sans les défigurer.

Il est très-difficile d’oblenir des œufs pondus à terme qui ne soient pas en même temps fécondés, car les poches séminales s’ouvrent à côté des orifices des oviductes. Je coupai à quelques individus l’extrémité postérieure du corps, à l’heure de la ponte, enlevant avec soin les poches séminales et, malgré la mortification progressive qui gagne les animaux mutilés, je pus parfois obtenir des œ.ufs qui remplissaient les conditions requises.

L’eau de mer fait d’abord gonfler l’enveloppe muqueuse; puis elle détermine un changement dans la position du corpuscule qui reste après la disparition de la vésicule germinative. Ce corpuscule devient rond, arrive à la surface du vitellus et se met à sortir (PI. X, fig. 4, Cr). Sa forme est ellipsoïde, son aspect, très-réfringent et parfaitement distinct du protoplasme environnant, sa structure, fibreuse. L’on discerne sans peine les filaments dont les plus extérieurs sont courbés en arc de cercle, tandis que ceux du milieu sont à peu près droits. Tous convergent aux deux pôles du corpuscule. La structure radiaire du vitellus autour de ces pôles est ici moins accentuée que chez l’Étoile de mer. Au milieu de chacun des filaments bipolaires l’on peut souvent distinguer un renflement situé dans un même plan transversal que les renflements voisins (PI. X, fig. 4, Fc). Je n’ai pas suivi en délail le procédé de formation des

lUiCHEUCHKS SUU LA Ff' CONDATION

spliéniles de lebul, car la pelilessc extrême de ces spliériiles et de l’ampliiasler qui leur donne naissance, comparée à la grosseur du vitellus, est une circonstance trop défavorable à l’observation. Cependant les images que j’ai obtenues sur le bourgeonnement des globules polaires (PI. X, lig. 2 et 3 Cr) concordent assez exactement avec celles que présente Asierias. Lesdeux sphérules apparaissent successivement et le pronucléus femelle prend naissance en dedans du point de la surface où elles sont encore adhérentes.

Tous ces processus sont d’une lenteur extrême chez l’œuf non fécondé et n’ont souvent pas le temps de s’achever avant la mort du vitellus. Celle lenteur n’est du reste que compaialive, par rapport à l’extrême rapidilé des phénomènes qui se déroulent chez l’œuf fécondé; ainsi la sortie des sphérules de rebut eut lieu, dans un cas, dans l’espace de deux heures, dans un autre cas dans un espace de temps inférieur à trois heures. J’attache peu d’importance à ces chitfres qui portent sur nu trop petit nombre d’observations pour faire autorité. L’important est de savoir (pie les globules polaires peuvent sortir aussi chez Sagilta sans fécondalion préalable.

Normalement l’œuf pondu est fécondé au moment de la ponte, et la pénétration a lieu, sans doute, peu d’inslanls après. Je n’ai pas réussi à observer directement la pénétration chez celle espèce ; mais elle doit différer bien peu de celles que nous connaissons déjà. En effet le vitellus fécondé se trouve aussitôt entouré d’une membrane vitelline distincte quoique accolée au vitellus dans toute son étendue. Les sphérules de rebut venant à se former, se trouvent aplaties contre le vitellus par cette membrane qu’elles ne réussissent pas à traverser. Au moment de leur formation, ne pouvant faire saillie à l’extérieur, elles sont repoussées contre le vitellus dans la surface duquel elles produisent une dépression, une fossette (PI. X, fig. 4, Cr) au milieu de laquelle se trouve la saillie formée par les sphérules en voie de bourgeonnement. Chez l’œuf non fécondé, elles se détachent, au contraire, librement, et ne sont retenues que par l’enveloppe mucilagineuse.

ET LE COMMENCEMENT DE l’hENOGÉNIE.

Dans rembranchement des Mollusques, je me suis adressé presque exclusivement aux Héléropodes du genre Plerolrachœa dont les avantages pour l’observateur m’étaient déjà connus par mes études antérieures. J’ai recueilli indifféremment les œufs des deux espèces les plus communes à Messine, à savoir P ter olrachœa mulica elFriderici Les., qui diffèrent si peu l’une de l’autre que je les soupçonne de n’être que des variétés d’une même espèce. Je cherchai d’abord à les trier dans mes bocaux afin de n’étudier qu’une seule espèce, mais je dus bientôt renoncer à ce dessein, vu le nombre des individus que je ne savais où classer. Les œufs de ces deux espèces ou variétés sont identiques et leurs dimensions ne varient pas plus d’une espèce à l’autre qu’entre les chaînes pondues successivement par un même individu. Les œufs d’une même chaîne étant pondus à des intervalles très-rapprochés, offrent toutes les gradations qui mènent insensiblement d’une phase à la phase suivante.

Il est difficile de séparer ici les phénomènes de maturation de ceux de la fécondation, parce que les œufs sont tous fécondés avant la ponte, et que ces deux ordr es de phénomènes sont en majeure partie simultanés. Je ne serais donc nullement autorisé à ti'aiter de la sortie des matières der'ebutet des suites de la fécondation dans deux chapitres distincts, si ce n’était par analogie avec d’autres Mollusques. Nous savons en effet que chez le Dentale, dont on peut facilement obtenir des œufs pondus et non fécondés, les globules polaires effectuent leur sortie comrue chez un œuf fécond. Il est donc bien permis de cr’oire que les Gastéropodes se comporteraient de même, si l’on pouvait en obtenir des œufs, munis de ces enveloppes qrri paraissent indispensables à leur développement, sans qu’ils fussent fécondés. Je vais donc décrire dans ce chapitre tous les processus qui mènent à la formation du pronucléus femelle, réservant pour le second chapitre la formation du pronucléus mâle et sa r’éunion à l’autre noyau.

Je ne m’étends pas ici sur la formation de l’ovule dans le sein de l’ovaire; c’est un sujet qui a été soitveni étudié chez d’autr’es Gastér’opodes et qrri ne présente chez les Ilétér'opodes attcime parliettlarilé rœmar-

qiiable. L’ovule mûr présente une grande vésicule et une tache germinative arrondie. Le vitellus est incolore, mais troublé par les globules du protolécithe qui sont gros et très-réfringents. Ces globules ont un contour plus ou moins polyédrique, quoiqu’ils ne se louchent pas et soient séparés les uns des autres par le sarcode vilellin. La surface du vitellus est formée par une couche distincte, hyaline, à double contour, et que l’on considère, peut-êti'e avec raison, comme une membrane.

Je réserve mon jugement sur ce point, car je n’ai pas élucidé par des expériences les propriétés physiques et chimiques de celle couche; tout ce que je puis dire, c’est qu’elle a bien, chez des ovules jeunes, l’aspect d’une membrane, tandis que son contour interne devient moins net chez les ovules mûrs. Après la ponte, elle n’existe plus, soit qu’elle se soit résorbée, soit qu’elle se soit simplement mélangée de nouveau au sarcode vilellin; l’on ne distingue plus, à la surface du vitellus, qu’une couche limitante, plus compacte à la sinface, mais passant sans interruption au protoplasme vilellin dont elle fait partie.

L’œuf pondu com[>rend, outre le viîellus, une enveloppe albumineuse (Oa) et une coque élasliiiue, hyaline, continue, à double contour et sans orifice d’aucune sorte (PI. VII, lig. L2, Om).

Dans un travail antérieur (cxxii) j’avais laissé indécise la question de l’identité du noyau de l’œuf au moment de la ponte avec le noyau de l’ovule. Ayant maintenant étudié des œufs coagulés dans roviductc au moment de leur descente, je puis affirmer celte identité.

Au moment de la ponte, la vésicule germinative se présente chez l’œuf vivant sous la forme d’une tache claire qui occupe le centre du vitellus granuleux. Au bout de quelques minutes, celle tache disparaît, et toute la partie centrale du vitellus prend un aspect plus homogène; l’on y distingue cependant, en étudiant la coupe optique de l’œuf, une figure rayonnée formée par les globules lécilbiques arrangés en lignes divergentes. C’est la phase du premier amphiaster de rebut que les réactifs font apparaître dans toute sa netteté. La sui'face môme du vitellus continue à être formée d’une couche mince et uniforme de prolo-

ET LE COMMENCElVJENT DE l’hEiNOGENIE. 41

plasme qui se coniinue entre les globules du protolécilhe (PI. VIII, fig. \,Ev).

Au bout d’une demi-heure environ (en février) apparaît sur un côté du vitellus un espace clair, louchant à la surface par une base large et se continuant en forme de cône vers l’intérieur; le centre même du vitellus est devenu obscur. Cet espace clair, uniquement composé de protoplasme, sans mélange de protolécilhe, croit assez rapidement et autour de lui les globules lécilhiques prennent un arrangement radiaire, visible surtout pour les globules de la surface. Le centre du système semble répondre au milieu de l’espace clair qui se voit au bord du vitellus. Au bout d’une heure et demie, le milieu de l’espace clair s’élève en forme de protubérance conique (PI. VIII, fig. 1, Cr); c’est le premier globule polaire, qui ne larde pas à se détacher de la même manière que chez l’Astérie. Dans son intérieur, l’on distingue avec une grande netteté, sans l’emploi d’aucun réactif, les filaments bipolaires et les rendements de ces filaments (PI. VIII, fig. 2, Fc).

Jusqu’à présent le vitellus était resté sphérique tout en présentant de légères déformations, tantôt dans un sens, tantôt dans l’autre. Sa surface est toujours formée par la même couche de sarcode mince et égale (PI. VIII, fig. 2, Ev). Deux heures et quarante-cinq minutes environ après la ponte, le premier globule polaire est entièrement détaché et la disposition rayonnée des globules lécilhiques indique la formation du second amphiaster de rebut; en ce moment l’on voit apparaître une protubérance volumineuse au pôle nutritif du vitellus, à l’opposé du point qu’occupe le globule polaire (PL VÎÎI, fig. 3, Vp). Cette bosse est composée à la fois de sarcode et de protolécilhe; cependant les globules lécilhiques y sont plus clair-semés que dans le reste du vitellus. La surface de la protubérance est formée par la couche superficielle de sarcode qui atteint ici une assez grande épaisseur (PI. VIII, fig. 3, Ev').

A la troisième heure le second globule polaire apparaît de la même façon que le premier (fig. 3, Or”) et se détache de même. La protubérance du pôle nuli'itif diminue de hauteur et disparaît entièrement

lŒCIlERCIIES SUR EA FÈCONDA'nON

pendant ([lie la seconde sphérnle de rebut achève de se détaclier. Au bout de trois heures et demie, cette sphérnle est entièrement détachée et présente dans son intérieur les mêmes lilaments rpie la première. Peu de minutes après, l’on voit deux taches claires partii* de la surlace du vilellus, runedu pôle formatif, près des globules polaires, l’autre généralement du voisinage du pcMe opposé. Autour de ces deux pôles, la surface du vilellus est encore formée d’une couche de sarcode plus épaisse que sur le reste de la périphérie. Les deux espaces clairs et arrondis marchent à la rencontre l’un de l’autre en croissant rapidement et se confondent au centre du vilellus en une tache claire unique. La signification de tous ces processus ressortira clairement de la suite de ma description; je fais exception pour la grande pi'otuhérance du pôle nutritif dont la raison d’être m’échappe. Souvent l’on voit des prolongements naître à la surface de cette bosse, ce sont des trabécules résultant du retrait de l’albumen de l’œuf coagulé. Ils n’appartiennent donc pas au vilellus (PI. VIII, fig. 9).

Pour obtenir des renseignements sur le détail de ces phénomènes, il faut avoir recours aux réactifs, dont deux seulement, à ma connaissance, donnent des résultats parfaitement satisfaisants, à savoir: l’acide piciique et l’acide acétique suivis de glycérine un peu diluée. L’alcool absolu peut ■^ussi être employé, mais il resserre trop les œufs. Après l’acide picrique, l’on peut teindre au picrocarminate qui s’attache surtout au noyau et rend la préparation beaucoup plus instructive. Ces trois réactifs sont ceux qui possèdent au plus haut point la propriété de resserrer le vilellus et de diminuer son volume. Une fois pénétré de glycéi ine, il prend alors un aspect très-homogène qui va, dans les préparations à l’acide picrique, jusqu’à une transparence parfaite. Je dois noter, cependant, que pour obtenir cette transparence, les chaînes d’œufs doivent être plongées dans une solution saturée d’acide picrique et ne doivent pas y rester plus de quinze minutes, ni moins de dix minutes, après quoi il faut les teindre dans de la glycérine picrocarminaléc cl les placer dans de la glycérine pure. Ces préparations sont remanpiablemenl Itelles, mais elles ne peu-

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÉNIE.

vent se conserver. Au bout de quelques jours les globules lécithiques reparaissent et prennent des contours de plus en plus marqués, en sorte que le vitellus redevient opaque. Les préparations à l’acide acétique se conservent plus longtemps, mais finissent aussi par s’obscurcir. Des autres réactifs que j’ai essayés, aucun n’a la propriété d’éclaircir le vitellus, aussi dus-je renoncer à leur emploi.- Voici ce que nous enseignent ces œufs coagulés dans les acides ;

Au moment de la ponte, la vésicule germinative est encore bien nette, munie d’une couche limitante (PI. VII, fig. 12, EN) et renferme, dans des préparations bien réussies, un réseau de filaments de sarcode. Ses dimensions sont les mêmes que celles du noyau de l’ovule mûr. Néanmoins elle est déjà constamment dépourvue de sa tache germinative; cette dernière a disparu sans laisser de traces, à moins que l’on ne doive considérer les quelques granules irréguliers et réfi’ingents, qui sont parfois suspendus dans le contenu de la vésicule, comme provenant d’une dissociation du nucléole.

En coagulant une chaîne d’œufs au moment où la vésicule germinative disparaît chez les œmfs les plus avancés, l’on obtient une préparation présentant toutes les phases qui, par des gradations insensibles, nous font passer delà vésicule germinative encore intacte à l’amphiaster de rebut bien constitué. La couche enveloppante, dite membrane de la vésicule, devient moins nette, quoiqu’elle reste encore visible. En même temps la vésicule diminue un peu de volume, mais sans se ratatiner, conservant toujours une forme rà peu près sphérique. Aux pôles opposés de cette grande cavité arrondie, l’on distingue maintenant deux amas de substance granuleuse, de texture parfaitement semblable à celle du protoplasme qui entoure la vésicule et qui s’étend de là entre les globules du protolécithe. Ces amas font légèrement saillie dans la cavité, du reste parfaitement arrondie, de la vésicule germinative. Le contour interne de ces amas est donc très-facile à distinguer, mais extérieurement ils se confondent absolument avec le sarcode vitellin, dont ils semblent faire partie. De ces amas partent aussitôt des stries qui s’étendent suivant des

r.ECIlEKCHES sur, J.A FÉCONDATION

fractions de lignes méridiennes. Ces stries deviennent plus netlos et se changent en de véritables filaments, lesquels, parlant des deux pôles, s’étendent dans l’intérieur de la vésicule, comme deux pinceaux étalés en éventail (PI. YH, fig. 13, F'); ils s’arrêtent encore à une certaine distance du plan équatorial et ne se rencontrent donc pas encore entre eux. A toutes les phases de la formation de ces filaments, l'on voit clairement que leurs extrémités périphériques sont en continuité avec le réseau protoplasmique qui occupe Vintérieur du noyau (PI. Vif, fig. 14 et 15, F' et No?'). A mesure que les rayons avancent, le réseau disparaît; il est plus que probable que les rayons ne sont qu’une modification de forme du réseau inlranucléaire, et qu’ils résultent d’un arrangement régulier des trabécules de ce réseau. Quant aux amas polaires, leur origine première est bien plus difficile à établii*., l’avoue que, pour ma part, je n’y suis pas parvenu et qu’à cet égard je ne puis que poser une alternative sans la résoudre. Ces amas peuvent provenir du sarcode intranucléaire qui se porterait aux deux pôles opposés du noyau et se confondrait avec le protoplasmevitellin,ou bien ils peuvent provenir du protoplasme périnucléaire qui ferait irruption dans la cavité de la vésicule; à moins encore que ces . deux processus nese produisent simultanément, et qu’il n’y ait, dôsle premier instant, une fusion entre ces deux substances. Que celte fusion soit immédiate ou non, il est incontestable que les protoplasmes inlra- et périnucléaire ne lardent pas à se confondre aux deux pôles, en sorte que, un peu plus tôt, un peu plus tard, il y a toujours fusion.

Les amas polaires faisaient d’abord une légère saillie dans l’intérieur de la vésicule sphérique. Pendant la croissance des rayons intranucléaires, ils s’éloignent du centre et font de part et d’autre hernie dans le vilellus. Il en résulte que la vésicule passe de la forme sphérique à celle d’un citron très-court (PI. YII, fig. 13-16). Pendant ce temps les rayons nucléaires, qui se trouvent près de l’axe qui rejoint les deux pôles, sont arrivés à se rencontrer et se sont soudés de manière à constituer quelques filaments bipolaires (PI. Vil, fig. 14 et 15 F); les rayons latéraux de chaque aster vont encore se perdre dans le réseau inlranucléaire (F').

ET lÆ COMMENCEMENT DE l’HÉNOGÈNIE.

En même temps que les rayons inlranucléaires^ naissent les rayons extranucléaires ou vilellins de chaque aster et la croissance de ces deux sortes de rayons est assez exactement parallèle (PL VII, fig. 13, f). Il y a donc un temps pendant lequel chaque pôle ou centre d’attraction est entouré d’un système de rayons divergents qui vont se perdre dans le vitellus et dans la vésicule germinative, sans être encore réunis aux rayons de l’aster voisin (PL VII, fig. 13, a, a). Cette phase a une grande importance théorique, aussi ai-je eu soin de m’assurer consciencieusement de son existence chez les Plerolrachœa.

L’amphiaster de rebut occupe dès l’abord une position excentrique. J’ai dit que les centres des deux asters apparaissent aux deux pôles opposés de la vésicule germinative. Cette expression n’est pas parfaitement exacte. Dans une certaine position il semble bien que la ligne qui relie ces deux centres passe par le centre de la vésicule (PL VII, fig. 18, Ar')-, mais que l’on fasse rouler le vitellus sur lui-même d’un quart de tour et l’on verra que ces deux points ne sont pas, tant s’en faut, aux extrémités d’un même diamètre (PL VII, fig. 17, Àr' ).

Au moment où quelques rayons inlranucléaires d’un aster se réunissent à ceux de l’aster opposé, il semble, en les regardant d’un certain côté, que l’amphiaster soit déjà complet, mais très-étroit et traversant diamétralement la vésicule (PL VII, fig. 18, Ar' ). De profil on voit que les filaments bipolaires ne sont au complet que sur la ligne qui va directement d’un centre d’attraction à l’autre centre et que la plupart des rayons intranucléaires divergent en éventail et vont se perdre dans ce qui reste du réseau de sarcode intranucléaire (PL VII, fig. 17 et pi. VIII, fig. 4, F').

Après la disparition du nucléole, il reste souvent de petits grains réfringents, suspendus dans la vésicule germinative et qui proviennent probablement d’une dispersion de la substance de ce corpuscule. Au moment où l’amphiaster est encore incomplet, l’on voit d’habitude des grains tout à fait semblables le long des rayons inlranucléaires (PL VII, fig. 16 et 17, Fc'). Ces grains pourraient donc dériver du nucléole;

KECHERCHES SUR LA FÉCONDATION

mais je n’émels celle idée qu’à liire de simple siipposilion que je ne considère moi-même pas comme Irès-plausible. En effel, ces granules manquent souvent complétemenl et il esl difficile d’admellre que le nucléole entre dans la composition de l’ampliiasler de rebut dans certains cas seulement et pas dans d’autres. Cependant je sens qu’il y a là encore bien des détails que mes reclierclies n’ont fait qu’aborder sans les élucider.

A P rès celle phase en survient une où l’amphiasler s’est complété par la soudure bout à bout de tous les rayons inlranucléaires et aussitôt les filaments bipolaires présentent au milieu de leur longueur des renflements qui sont les granules de Bülschli (PI. Ylï, lig. 19 et 20 et pl. VIII, fig. 4, Fc). Ijes relations de ces renflements avec les grains que présentaient les rayons encore isolés sont encore obscures pour moi. L’amphiaster s’allonge et étire en même temps la membrane de la vésicule qui est encore très-visible, surtout dans les préparations à l’acide acétique, et paraît encore entière (Pl. VII, tig. 19 et 20, EN). Le réseau intranucléaire a complètement disparu, et l’amphiasler se trouve, par suite de rallongement de la vésicule, en occuper assez exactement l’axe. Les rayons vitellins ont pris plus d’extension et le centre de chaque aster esl occujié par quelques granulations (Pl. YÎI, flg. 19, ac), autour desquelles se trouve un espace occupé par du protoplasme homogène (Fig. 19, aa)\ c’est ce que j’ai nommé l’amas central de l’aster. Pendant ce temps, la membrane ou couche limitante de la vésicule prend des contours indécis et disparaît entièrement. L’amphiasler se déplace de telle sorte que fun des asters arrive à la surface, tandis que l’autre esl dans l’intérieur du vilellus (Pl. YII, tig. 20). L’amphiaster, d’abord oblique, vient se mettre dans une position normale à la surface du vilellus. L’aster périphérique se rapproche tellement de la suiface, que son centre affleure presque et que les rayons unipolaires sont tous dirigés en arrière, entourant l’extrémité du fuseau des rayons bipolaires (Fig. 20, aé). Puis ce point de la surface s’élève en dôme, les renflements des rayons bipolaires se divisent (Pl. YIII, fig. 6 et 6, Cr') et le premier globule polaire

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÉNIE.

se détache, composé d’une moitié de l’amphiaster de rebut (PI. VIII, fig. 7, Cr'). La moitié interne de l’amphiaster subit les mêmes modifications que chez les Astéries, menant à la formation d’un second amphiaster complet : le second amphiaster de rebut, plus petit de moitié que le premier (PI. VIII, fig. 8, Ar”). Il se divise de la même manière, en sorte que sa moitié périphérique devient la seconde sphérule de rebut. Dans l’intérieur des globules polaires, au moment de leur formation et même quelque temps après, l’on distingue très-nettement les portions de filaments bipolaires parallèles entre eux, et leurs renflements tous placés les uns à côté des autres cà la même hauteur (PI. VIII, fig. 3, 5 et 6, Fc). Plus lard, celle structure s’efface et le globule se compose d’une couche superficielle plus dense et d’un contenu à grosses granulations. Plus lard encore, au moment du fractionnement du vitellus, ces globules présentent l’aspect de petites cellules avec un grand noyau et un ou plusieurs nucléoles (PI. IX, fig. 12, Cr). Enfin, au moment du développement embryonnaire ils commencent à se décomposer sans jouer ici, pas plus que chez aucun autre animal, le moindre rôle dans le développement de l’œuf.

La moitié interne du second amphiaster de rebut se ramasse par un procédé identique à celui de la formation des nouveaux noyaux dans les sphérules de fractionnement. Je n’insiste donc pas en cet endroit sur des détails qui seront décrits avec soin dans le troisième chapitre. Qu’il me suffise de dire que les granules de Bülschli de cet aster se rapprochent des granules qui occupent le centre de l’aster, que tous ces granules se gonflent, s’imbibent du suc environnant et se fusionnent entre eux jusqu’à former un petit noyau qui croit rapidement et dans l’intérieur duquel se différencie bientôt un nucléole (PI. VIII, fig. 11 à 15, v Q). Puis ce pronucléus se dirige vers le centre du vitellus, tout en continuant à croître, et rencontre le pronucléus mâle avec lequel il se fusionne.

Avant de terminer ce sujet, je dois encore noter la manière dont la couche superficielle de sarcode vilellin se comporte vis-à-vis des réactifs. Sous l’action des acides, celte couche prend ras|)ecl d’une membrane

dont le bord interne se confondrait avec le protoplasme du vitellus (PI. VII, fig. 12 à 20 et pi. VIII, lig. 5 tà 16, Ev). La couche superficielle reste hyaline malgré les acides, tandis que le protoplasme intérieur devient granuleux. L’on peut donc considérer comme limite interne de la couche enveloppante la ligne où commencent les granulations (PI. VII, fig. 17, Ev)) mais, je le répète, il y a adhérence, il y a continuité de substance entre ces couches. Si l’on traite un vitellus par l’alcool absolu, et qu’après l’avoir placé dans de la glycérine, l’on dilue cette glycérine avec de l’eau et de l’acide acétique, l’on voit, au bout d’un certain temps la couche superficielle se soulever et se détacher irrégulièrement du vitellus auquel elle reste reliée par des trabécules de protoplasme granuleux. La manière dont cette couche se soulève est une des meilleures preuves de la continuité de sa substance avec celle du vitellus. En effet, elle n’a qu’un contour net : le contour externe. Sa limite intérieure présente au contraire un aspect déchiré. Par places la couche soulevée est très-épaisse et comprend, outre la partie hyaline, des portions plus ou moins épaisses de vitellus granuleux. En d’autres endroits la partie soulevée est tout à fait hyaline et n’a pas même l’épaisseur de la couche enveloppante.

Les globules polaires ne soulèvent, en sortant, aucune portion de membrane et, une fois détachés, ils restent longtemps avant de s’entourer d’une membrane propre. Lors du fractionnement, enfin, rien ne nous autorise à supposer l’existence, à la surface du vitellus, d’une membrane véritable. Warneck (xlix) a déjà dit que le vitellus des Gastéropodes pulmonés est dépourvu de membrane vitelline et que sa substance est seulement un peu plus condensée à la surface que dans l’intérieur; je ne puis que souscrire aux conclusions de l’éminent observateur russe, en les étendant aux Ilétéropodes.

Le cas de ces Mollusques présente, comme l’on voit, quelques petites différences avec celui des deux autres animaux que j’ai étudiés, différences peu importantes au fond, mais qui jettent pourtant une certaine lumière sur ce que ces processus ont de constant et d’important, de va-

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÉNIE. 19

riable et d’accessoire. Je reviendrai sur ce sujet dans le dernier chapitre, pour lâcher de déduire de ces variations tous les renseignements que leur comparaison peut nous fournir.

IL PAllTÎE EÏBLIOGRAPBÎQUE.

L’origine et la signification histologique de l’ovule ont été l’objet de recherches trop nombreuses pour que je puisse entreprendre de les analyser. Je rappellerai que les opinions sur ce point ont varié avec les moyens de recherche dont on disposait et surtout avec l’ensemble des notions histologiques régnantes.

Après l’adoption de la théorie de Schwann (xviii) sur la constitution de l’élément histologique, il se manifesta une grande incertitude sur la manière dont cette théorie devait être appliquée à l’ovule, incertitude qui ne cessa complètement que lorsque la théorie de Schwann eut fait place à la théorie moderne du protoplasme. Quelques auteurs, parmi lesquels je citerai Barry (xîx), soutinrent que l’ovule est un organisme complexe, composé d’un grand nombre de cellules. Celle erreur paraît reposer, du moins en ce qui concerne Fauteur cité, sur une faute d’observation causée par des raélhodeseldes moyens optiques singulièrement insuffisants et suppléés par une imagination trop vive.

Une opinion beaucoup plus répandue et plus sérieuse faisait de l’ovule un ensemble combiné d’une cellule véritable et d’une substance inerte qui entoure la première. La vésiculegerminalive passait pour une cellule munie d’un noyau, à savoir, la tache germinative. La masse inerte répondait au vitellus. Je ne citerai pas les noms des auteurs qui ont adopté cette manière de voir; ils sont trop nombreux et comprennent la majorité des hommes qui se sont occupés de ce sujet entre les années 1840 et 1850. Tous ces auleurs-là s’accordent à faire naître dans le sein de l’ovaire, en premier lieu, la vésiculegerminalive à laquelle le vitellus ne s’ajoute que plus lard; mais ils diffèrent sur l’origine de la vésicule elle-même. En effet,

les uns voient la tache germinative apparaître la première et s’entourer ensuite d’une vésicule, tandis que les antres font naître d’abord la vésicule, dans l’intérieur de laquelle se montre ensuite la tache. Sans nous arrêter à ces discussions anciennes et presque oubliées, il sera peut-être instructif de rechercher les causes qui ont pu induire tant de bons observateurs à croire à l’existence de vésicules germinatives dépourvues de vitellus, dans la partie de l’ovaire où les germes prennent naissance. Quelques citations suffiront à nous faire comprendre la cause de cette erreur.

Quatrefages, parlant de l’origine des ovules chez les Hermelles (xlî), déciil un ovaire rempli d’abord de simples granulations. Chaque granule, en grossissant, devient une vésicule germinative dans l’intérieur de laquelle apparaît la tache. Ces vésicules se détachent de l’ovaire et tombent dans la cavité du corps où elles continuent cà augmenter de volume. « Quand la vésicule de Purkinje a acquis environ ’/so milli- « mètre de diamètre, on voit tout à coup apparaître autour d’elle et à « une certaine distance une membrane excessivement ténue qui l’enve- « loppe de toute part, en enfermant une certaine quantité d’un liquide (( d’aboid parfaitement homogène et transparent. Bientôt au milieu de

« ce liquide, on voit se développer des granulations Ce sont Là les pre-

(( miers rudiments du vitellus.))

A lire ces lignes l’on comprend de suite que cet observateur, si exact du reste, n’a pas su voir la couche de protoplasme transparent qui entoure les vésicules germinatives même les plus jeunes. Une goutte d’acide l’aurait rendue visible, mais l’idée de chercher cette couche n’a probablement pas surgi, car la notion d’une vésicule germinative libre n’avait rien qui choquât à cette époque. Pourtant Grnbe (xxix) avait déjà soutenu l’opinion que le vitellus est contemporain de la vésicule germinative. Purkinje (x), v. Baer (xv), Bischoff (xxiv), Kolliker (xxvi), Meckel, Lereboullct, Huxley, Stein, Nelson interprètent les faits de la même façon que l’auteur que je viens de citer.

Tout aussi instructive est la description que Claparède (lxxvii) a donnée de la structure de l’ovaire de Y Ascaris Suilla. Après avoir affirmé

ET LE COMMENCEMENT DE l’HÈNOGÈNIE.

que les nucléus ou vésicules germinatives existent seules dans la partie supérieure de l’ovaire ou blastogène l’auteur ajoute (p. 29): « Déjà dans « ie soi-disant blastogène les vésicules germinatives sont agglutinées (( ensemble par une substance transparente intercellulaire, ou, si l’on (( aime mieux, internucléaire. La masse de cette substance s’augmente « à mesure que les vésicules descendent dans l’ovaire; il se forme des (( granules dans son intérieur, et l’on a le premier rudiment du vitel- (( lus.»

La description est parfaitement exacte, il n’y manque que la notion que cette substance « internucléaire » est le protoplasme, c’est-à-dire la partie la plus essentielle de la cellule. Le peu d’attention accordée à cette substance explique pourquoi elle a si souvent échappé aux regards. O. Schmidt, Max Schultze, Keferstein, Cohn et d’autres encore ont vu cette substance internucléaire, mais sans lui donner plus d’importance que ne le fait Claparède. Encore en l’an 1863, à une époque où des idées plus justes régnaient dans la science, Milne Edwards (lxxxiïi, p. 326) écrivait : « Je puis dire d’une manière générale que l’œuf est constitué « d’abord par la vésicule germinative autour de laquelle se développe (( ensuite le vilellus. Celui-ci est formé primitivement par des granu-

(( les; » et plus loin (p. 392) : « dans les premiers temps de son

« existence ce corps (le Protoblaste ou vésicule germinative) constitue (( à lui seul la totalité du nouvel être en voie de développement. »

Je n’aurais pas insisté sur ces anciennes erreurs contre lesquelles Siebold, H. Aubert et Gegenbaur se sont élevés avec force, qui sont actuellement oubliées et qu’il eût été plus charitable de couvrir d’un voile, si l’on n’avait pas récemment reproduit comme nouvelles ces notions surannées (voyez Index exxv).

Les travaux plus récents de Bischoff, ceux de Reichert, de Kôlliker, de Leuckart contribuèrent avec d’autres moins importants à établir que la vésicule germinative, même à son origine, n’est jamais isolée mais toujours suspendue dans un protoplasme. Les ovules peuvent descendre directement des cellules embryonnaires par simple prolifération, ou bien

UECIIEHCOES SUR LA FÈGOXDATiON

il peut intervenir une phase dans laquelle les vésicules sont suspendues dans un cœnosarque qui se divise ensuite en autant de portions qu’il y a de noyaux; ces deux cas paraissent exister dans le règne animal. La théorie de la naissance des ovules par bourgeonnement d’une cellule proligère, soutenue par Meissner, a été complètement abandonnée par les auteurs subséquents. Il reste donc acquis que la naissance des ovules ne diffère pas de celle des cellules en général; cela est devenu un axiome. Je renvoie tà cet égard aux beaux travaux de Pdüger (lxxxi), de Waldeyer (xcin), de E. van Beneden (xcvii) et de Hubert Ludwig (cv). Tous admettent comme évident que Tovule est une vraie cellule dont la vésicule germinative est le noyau et la tache germinative, le nucléole.

Tout récemment, il est vrai, M. Villot (cxxv) s’est fait le champion de la notion, conçue dans l’enfance de riiistologie, d’après laquelle la vésicule germinative serait une cellule qui aurait pour noyau la tache germinative et serait entourée d’un vitelius jouant le rôle d’une masse nutritive inerte. Comme l’auteur ne cherche à expliquer aucun des faits si nombreux qui ont fait abandonner celle théorie, et ne s’appuie sur aucune observation personnelle, nous ne nous croyons pas obligés de rappeler tous les faits sur lesquels la théorie cellulaire de l’ovule a été laborieusement et solidement assise et dont chacun suffirait à renverser l’hypothèse qu’il vient soutenir. Je serais curieux cependant de savoir comment M. Villot réussirait à expliquer pourquoi sa cellule-germe doit être éliminée du vitelius inerte avant que celui-ci ne commence son évolution.

il me reste à rappeler les données bibliographiques sur le sort de la vésicule germinative au commencement du développement de l’embryon et sur les membranes qui entourent l’ovule. Sur ce dernier point je me bornerai aux données relatives aux animaux qui ont servi à mes propres études, car la diversité est trop grande à cet égard pour que d’une classe ou d’une famille d’animaux l’on puisse étendre les conclusions à une autre famille. Je réserve pour mon second chapitre la question des membranes qui apparaissent au moment de la fécondation.

Bon nombre de naturalistes, et de ceux qui jouissent de l’autorité la

Eï LE COMMENCEMENT DE LTIÈNOGÉNIE.

mieux établie, ont soutenu que la vésicule germinative survit à la fécondation de l’œuf et donne directement naissance, soit par scissiparité, soit par multiplication endogène, aux noyaux des sphéruîes de fractionnement. Je citerai v. Baer pour le genre Echinus (xxxiii), J. Müller pour VEntoconcha, Leuckart pour les Pupipares (quoique l’auteur paraisse fonder ici son opinion plutôt sur des analogies que sur des observations propres), Leydig pour Notommata, Kôlliker pour les Siphonophores, Gegenbaur pour les Méduses, les Siphonophores, les Pléropodes, les Hétéropodes et pour Sagitla, Hæckel pour les Siphonophores, Pagenstecher pour les Trichines, Keferstein pour le Leploplana, Kowalevsky pour les Holothuries, les Ascidies et les Vers, E. v. Beneden (xcvii) pour les Platyhelminlhes et les Mammifères, enfin Leuckart (Menschliche Parasiten) pour les Oxyures. Leydig, dans un traité d’histologie, pose en thèse générale que la vésicule germinative persiste et se divise et que sa disparition n’est qu’apparente.

L’examen de ces données n’est pas superflu, car il nous montrera que les divergences des auteurs reposent, non sur des différences entre les divers animaux étudiés, mais simplement sur des erreurs d’observation. J’ai déjà fait la critique de celles de ces observations qui se rapportent aux Mollusques (cxiv et cxxii); j’ai montré que l’erreur provient probablement de ce que la phase pendant laquelle le noyau est absent aura échappé à l’attention de l’observateur. Cette remarque peut s’étendre aux travaux de Leuckart, Leydig et Keferstein sur les Vers et les Rotifères.

L’assertion de Hæckel pour les Siphonophores (p. 17 et 18) est plus difficile à expliquer, car cet auteur s’exprime à cet égard avec la plus parfaite assurance. Or, les œufs de Siphonophores sont d’une transparence parfaite et la présence ou l’absence de la vésicule est des plus faciles à constater. Les figures représentent un œuf de Siphonophore avant sa maturité et muni de sa grande vésicule; l’auteur le donne pour un œuf mûr. Cependant le tout petit noyau, situé dans une position excentrique que présente l’ovule mûr de ces animaux, ne peut absolument pas se confondre avec la grande vésicule germinative placée au centre de

UECilEllCHES Sim LA FÉCONDATION

l’ovule mal mûr. El pourlanl Hæckeî doit avoir eu des ovules mûrs entre les mains, puisqu’il dit avoir fait des fécondalions arlificielles. 11 s’agil donc ici d’observations superficielles et qui me paraissent difiiciles à excuser. La figure surtout dans laquelle il représente l’œuf divisé en deuxsphérulesde fractionnement dans le milieu de chacune desquelles il représente un grand noyau muni d’un nucléole, ne ressemble à rien de ce que présente la nature. Hæckel est très-catégorique et affirmatif; il qualifie de négatives les observations de ceux qui ont vu disparaître la vésicule germinative, tandis que les naturalistes à qui celte phase a échappé auraient fiiil des observations positives. Celle description serait pour nous trèsembarrassante si Metschnikotî n’avait démontré sa fausseté. Je puis appuyer de mes observations personnelles la description du savant naturaliste russe. Melschnikoff, il est vrai, n’a pas vu les noyaux des premières sphérules de fraclionnement, qui ne sont guère visibles sans l’emploi des réactifs à cause de leur petitesse, de leur forme aplatie et de leur position excentrique. Celte omission s’excuse facilement; je n’en puis dire autant des dessins fictifs de Hæckeb quoi qu’en puissent dire ses défenseurs.

Koxvalevsky croit avoir observé la division directe de la vésicule germinative chez les œufs de Penlacla doliolum. Ses recherches ont porté sur des œufs déj.à fécondés, comme l’auteur le dit lui-même; il est donc probable que ce qu’il a pris ici pour une vésicule germinative n’était, en réalité, que le noyau de la première sphérule de fractionnement. Ces œufs sont du reste trop opaques pour se prêter à la solution de ces questions. Le même auteur avail, il est vrai, déclaré dans son premier mémoire sur le développement des Ascidies (p. 3) que la vésicule germinative n’est plus visible chez des œufs arrivés à maturité. Mais dans son premier mémoire sur le développement de YAmphioxus (p. 1), tout en reconnaissant qu’il n’a pu apercevoir la vésicule germinative chez l’œuf fécondé, il se défend de croire à l’absence de cet élément, alléguant la difficulté qu’il y a de voir le noyau d’un œuf fécondé. Dans son second mémoire sur les Ascidies (p. 104), le savant russe montre son aversion pour toute notion de disparition de noyaux et de formation

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÉNIE.

indépendante de cellules. « Il est en général facile, s’écrie-l-il, de consi- « dérer comme disparu (verschwunden) le noyau que l’on ne peut pas voir. » Cette phrase dit tout. Pour Euaxes (p. 12), Kowalevsky montre moins d’assurance et, après avoir déclaré qu’il n’a pu trouver de noyau dans le vitellus fécondé, il admet la possibilité de son absence réelle; mais chez le Lombric (p. 21) il parle de nouveau de la division directe de la vésicule germinative qu’il confond évidemment avec le noyau de la première sphérule de fractionnement. Comme on le voit, les observations positives de l’embryogéniste russe parlent plutôt contre son idée préconçue, qui se serait évanouie s’il avait comparé les dimensions de la vésicule germinative avec celles du noyau de l’œuf fécondé.

La théorie delà persistance de la vésicule germinative a trouvé en E. van Beneden (xcvii) son dernier, mais aussi son plus énergique défenseur. Les données de l’illustre zoologiste sont très-positives; mais si l’on compulse les observations sur lesquelles elles se fondent, l’on est étonné de voir combien ces observations sont peu nombreuses et peu concluantes. Ainsi, pour le Distoma cygnoides, il affirme simplement que le noyau de l’œuf fécondé « est l’analogue delà vésicule germinative des autres animaux;» c’est précisément le point qu’il s’agit d’éclaircir et sur lequel les observations de v. Beneden ne nous apprennent rien. Chez Ascaris rigida ce savant a remarqué que la vésicule germinative disparaît à la vue après la fécondation; plus tard il reti’ouve un noyau qui aurait les mêmes dimensions que la vésicule, qui serait la vésicule momentanément cachée aux regards par un obscurcissement du vitellus. Cette observation est la seule sur laquelle il puisse s’appuyer et encore ne prouve-t-elle rien, puisque l’auteur ne s’est pas assuré de l’existence réelle d’un noyau dans le vitellus pendant la période d’obscurcissement. Les seuls animaux étudiés sont les Vers parasites, quelques Crustacés et les Mammifères, et les deux espèces citées de Vers sont les seules que l’auteur ait réellement examinées au point de vue de la persistance de la vésicule germinative. Je ne m’arrête pas à réfuter ces opinions dont la faiblesse est trop évidente, d’autant plus que E. van Beneden a reconnu lui-même tout dernière-

UECHEHCHES SUR LA FÉCONDATION

menl que ses « conclusions précéclenles étaient peu conformes aux (( principes de la logique » et qu’il s’est appliqué dans de bons travaux (cxviii et cxx) à corriger son erreur.

Passant aux auteurs qui ont combattu l’idée de la persistance du noyau de l’ovule et observé sa disparition, nous aurons à faire une liste bien plus longue, tellement longue que je devrai me borner à faire une simple énumération, tout en mentionnant plus particulièrement les auteurs qui ont vu la vésicule disparaître avant la fécondation de l’œuf.

Purkinje (x) rapporte que la vésicule germinative chez les Oiseaux se mêle au germe avant la fécondation.

Piusconi (xi) soutient une opinion analogue pour les Batraciens; v. Baer a vu chez la Poule, le Lézard, la Grenouille, les Poissons (xv et xvi) la vésicule germinative arriver jusqu’à la surface du vitellus et son contenu se disperser. Ces faits s’observent chez l’œuf arrivé à maturité sans fécondation préalable. Chez ri\nodontc le même auteur croit'avoir vu la vésicule faire saillie sous la membrane vitelline tà la surface du vitellus; il s’agit ici probablement du globule polaire faussement interprété. Wagner et plus tard CEllacher (xciv et c) virent aussi chez les Oiseaux la vésicule arriver à la surface du vitellus et vider son contenu indépendamment de la fécondation. Vogt (xxm), Cramer (xl), Ecker (lu), Newport (li et lx), Gœtte (xcv), v. Bambecke (xcvi) arrivent pour les Batraciens et les Reptiles aux mêmes conclusions, déjà posées du reste, par Rusconi pour la Grenouille, de rexpulsion du contenu de la vésicule germinative. V. Bambecke a observé ces faits chez des œufs non fécondés.

Pour les Poissons, Ransom (Lxxxvm) a observé l’expulsion du noyau de l’ovule avant la fécondation, ainsi que OEIiacher (xcix) l’a décrit plus lard avec beaucoup plus de détails. A. Müller a vu la disparition de ce noyau chez des œufs déjà fécondés de Pelroniyzon. Eimer (ci) confirme pour les Reptiles le fait de la disparition de la vésicule avant la fécondation.

Chez les Mammifères, v. Baer (xii) n’était pas arrivé à la compré-

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÈNOGÈNIE.

hension du phénomène, à cause de l’erreur qu’il corameltait de prendre l’ovule tout entier de ces animaux pour l’homologue de la vésicule germinative des autres Vertébrés. Mais en revanche Wharton Jones (xvii) et surtout Bischoff (xxîv, xxv, xxx, lui), Coste (xxxii et xlvii) et tout récemment E. V. Beneden (cxx) ont établi la disparition de la vésicule indépendamment de la fécondation. Ce fait fut démontré pour l’espèce humaine par Lebert et Pmbin (lvi).

Dans l’embranchement des Mollusques, la disparition du noyau de l’ovule a été reconnue par de nombreux observateurs, mais sans que nous apprenions rien sur la relation de ce phénomène avec celui de la fécondation. Je citerai les travaux de Jacquemin, pour Planorbis, de Sars, pour Boris, de Nordmann pour Tergipes, de Lovén pour les Lamellibranches, de Leydig pour Paludina, de Warneck pour IJmnæus et Umax, de Leuckart pour Firoldides, de Lereboullet pour Limnœus, de Flemming pour les Anodontes, et mes propres travaux sur les Ptéropopodes et les Hétéropodes (cxiv et cxxii).

Chez les Vers cette disparition de la vésicule a été constatée par Bagge (xxi) chez Strongyliis, par de Quatrefages (xli) pour les Ilermelles avant la fécondation, par Krohn (lv) pour les Ascidies aussi avant la fécondation, par Leydig (xlvi) pour Piscicola avant la fécondation, par Girard (lxv) pour les Planaires.

Chez les Coelentérés le même fait est établi par Metchnikoff pour les Siphonophores et diverses Méduses, avant la fécondation, et par Kleinenberg (cii) pour l’Hydre d’eau douce.

D’une manière générale, Schwann (xviii) pensait déjà que la vésicule germinative, en sa qualité de noyau de l’ovule, devait disparaître lors de la maturité de l’œuf. Leuckart (lix) pose en thèse générale que la disparition de cette vésicule est indépendante de la fécondation. Enfin Milne Edwards (lxxxiii) déclare (p. 392) qu’il est inadmissible que la disparition delà vésicule germinative soit due à l’action de la liqueur fécondante, car il a été souvent facile de constater que longtemps avant l’imprégnation de l’œuf, la vésicule en question avait cessé d’exister. Et plus

loin (p. 393) : « la disparilion de celte cellule primordiale (le noyau de « Fovule) ne peut être considérée que comme une conséquence de sa « mort naturelle; c’est le terme normal de l’existence d’un être vivant (( dont le rôle biologique est terminé, et en général ce phénomène (( semble caractériser la période de malurilé de l’œuf. »

Quant au mode de disparilion de la vésicule, il est à noter que les auteurs qui se sont occupés de l’œuf des Oiseaux, des Reptiles, des Batraciens ou des Poissons sont unanimes à admettre que chez ces animaux la vésicule arrive ô la surface du vilellus où elle crève et expulse son contenu au dehors. Chez les autres animaux elle disparaît sans être expulsée, mais au même moment l’on voit apparaître à la surface du vilellus des globules qui ont reçu le nom de globules polaires.

Lovén a vu chez Cardium et Modiolaria la vésicule s’approcher de la surface du vilellus dont il a vu sortir un corpuscule qu’il suppose être la tache germinative. Cet observateur sagace travaillait malheureusement avec des grossissements trop faibles pour résoudre des questions de celle nature. Leydig (xlvi) appuya plus lard celle manière de voir en ce qui concerne la Piscicola Geonietrica. Les globules polaires avaient été déjà aperçus auparavant par P.-J. van Beneden et Windischmann ainsi que par Nordmann (voyez cxiv, p. 24 et suiv.) et par Barry (xix). Carus et Dumortier passent, à tort selon moi, pour les avoir découverts; il m’a été impossible de trouver dans les ouvrages de ces auteurs la description de corpuscules qui pussent être rapportés avec vraisemblance aux globules polaires. Bischoff (xxiv et xxv) a très-bien vu les globules polaii es sortir du vilellus fécondé ou non fécondé du Lapin, après la disparilion de la vésicule; mais il les fait descendre de la tache germinative qui se diviserait en deux corpuscules. Ces globules deviendraient ensuite les noyaux des deux premières sphérules de fractionnement. L’auteur abandonna plus tard ces idées erronées sur le lôle de la tache germinative dans la formation des globules et sur le sort ultérieur de ces derniers (XXX cl LUI).

J. Beid, de Qualrefages (xLi), Fritz Müllcr et îl. Rathke (voy. cxiv, p.

Eï LE COMMENCEMENT DE l’HÈNOGÉNIE.

24 et suiv.) ont accordé aux globules polaîj’cs une attentiou spéciale et de ces travaux à peu près simultanés sortit une connaissance assez exacte de l’aspecb des propriétés et de l’origine de ces corpuscules^ du moins quant aux apparences extérieures. L’on a reconnu qu’ils sont très-pâles et transparents, quoique le viteilus dont ils sortent soit souvent fort opaque; que le plussouvent ils possèdent chacun un noyau et s’entourent en général d’une membrane propre ; l’on a reconnu enfin qu’ils prennent naissance par une sorte de bourgeonnement à la surface du viteilus. Je n’entre pas dans l’énumération des auteurs qui ont décrit ces globules successivement pour la plupart des groupes des Métazoaires, à l’exception des Oiseaux, des Reptiles, des Batraciens et des Poissons. L’on trouvera dans un mémoire de Flemming (cxv, p. 31), dans le mien sur les Ptéropodes (cxiv, p. 24) et dans le grand ouvrage de Bütschli (cxix, p. 171) quelques données bibliographiques à ce sujet. Je ne rappellerai que les observations qui peuvent Jeter quelque lumière sur les relations entre les globules polaires et la vésicule germinative d’une part, et d’autre part sur le rapport qui existe entre l’apparition de ces globules et l’imprégnation de l’œuf.

Wagner pensait que les taches germinatives persistaient dans le vitellus, après la disparition de la vésicule germinative, pour prendre part au développement de l’œuf fécondé; il fut suivi dans celte voie par Vogt (xxiii). Cramer (xl) et Ecker (lu).

Bischoff (xxiv et xxv) indique déjcà en termes parfaitement clairs, que, chez le Lapin, la vésicule manque lorsque les globules polaires deviennent visibles et que le viteilus flanqué de ces globules renferme un noyau bien plus petit que la vésicule germinative, noyau qui semble compacte et dont les contours ne sont pas bien définis et ne le séparent pas nettement de la substance vitelline environnante (pronucléus femelle?). Cet excellent observateur insiste aussi sur ce fait important que la vésicule disparaît non-seulement avant la fécondation, mais qu’elle peut déjà manquer à des ovules encore renfermés dans l’ovaire. Crube (xxix) voit apparaître dans le viteilus fécondé de Clepsine, déjà

dépourvu de sa vésicule, un globule clair (noyau combiné?) qu’il relrouve dans chaque spbérule de fraclionneinent.

Reichert (xxxiv) décril avec détail la disparition de la vésicule, observée chez des œufs fécondés de Strongylus miricularis ; elle devient confuse sur les bords et se dissout en se séparant en trois, quatre ou plusieurs taches claires dont la plupart se dispersent dans le vitellus, tandis que les autres en sortent pour devenir des globules polaires. Puis le vitellus se contracte et dans son centre se montre une tache claire mal déhnie au début (noyau combiné). Déjcà auparavant, Frey (xxxi) avait remarqué chez Nephelis une relation entre la disparition de la vésicule et l’apparition des globules polaires qu’il faisait provenir de la tache germinative. Lovén adopte cette manière de voir en ce qui concerne les Lamellibranches et remarque que la vésicule arrive à la surface du vitellus au point où les globules vont prendre naissance, après quoi elle se renfoncerait dans le vitellus pour devenir un noyau (pronucléus femelle?).

De Quatrefages (xu) accorde une attention encore plus spéciale aux phénomènes en question chez les ilermelles. Il a vu la vésicule disparaître chez des œufs conservés à l’abri de la fécondation. Le savant zoologiste commet, il est vrai, herreur de faire dépendre la naissance des globules polaires d’une imprégnation préalable, mais il nous donne cependant quelques détails nouveaux. Ainsi il a observé que la vésicule se change en une tache claire qui devient lagéniforme. Le goulot arrive à la surface en un point d’où les granulations vitellines s’écartent, et cette substance transparente se soulève en un mamelon ; seulement au lieu de faire détacher ce mamelon, le savant français le représente comme s’entr’ouvrant pour laisser échapper un globule polaire. En même temps une série de processus sont décrits comme normaux, quoiqu’ils soient évidemment pathologiques, et il est même difficile de distinguer dans la description ce qui appartient tà ce dernier ordre de phénomènes.

Warneck (xlix) entre encore plus avant que ses prédécesseurs dans les détails de ces phénomènes et en donne une description parfaitement juste qui renferme tout ce qu’il est possible de voir, sans l’aide des

réactifs, dans les œufs relativement peu favorables (Lirmiœus et Umax) qu’il a étudiés. Le centre du vitellus, peu après la ponte, est occupé par un espace clair et dépourvu de granulations, à bords mal définis et passant insensiblement à la substance granuleuse particulièrement obscure qui l’entoure. Cette tache se divise en deux et ces deux taches plus petites se dirigent vers la surface où elles se juxtaposent de manière à constituer un cône transparent dont la surface du vitellus forme la base. En écrasant le vitellus l’on en fait sortir deux corpuscules transparents, preuve que les deux taches n’étaient que juxtaposées et non fusionnées dans le cône clair (phase du premier amphiaster de rebut). Le cône transparent prend une forme plus évasée et sa partie superficielle donne naissance, par une sorte de bourgeonnement, à un globule polaire, puis à un second, et rarement encore à un troisième. Ces globules n’ont pas d’action polaire; ils ne rentrent pas non plus dans le vitellus; ils restent en place et se décomposent au bout d’un certain temps. La tache claire de forme conique, se renfonce dans le vitellus après ce bourgeonnement, et reprend une forme ronde; chez Umax, au lieu d’une tache claire, l’on en voit maintenant deux. Ces deux taches ont des contours trèsnets et renferment chacune un corpuscule facile à voir (les deux pronucléi et leurs nucléoles); ils ne tardent pas à se fusionner entre eux.

Les belles recherches faites par de Lacaze-Duthiers (lxxiii) sur le Dentale établissent que les globules polaires prennent ici naissance chez des œufs qui ne peuvent être soupçonnés d’avoir été fécondés et qui ne présentent aucun signe de modifications pathologiques. L’observation est importante parce que c’est le seul Mollusque chez qui l’on ait jusqu’à présent pu constater l’indépendance de ces phénomènes.

Robin (lxxx) s’est adressé, pour ses recherches, aux Hirudinées et aux Gastéropodes Pulmonés, dont les œufs se fécondent au moment de la ponte; aussi ne pouvons-nous faire grand cas de son assertion que le retrait du vitellus et la disparition de la vésicule germinative précédent ici l’imprégnation de l’œuf. La formation des globules polaires a été l’objet principal de ces études et se trouve décrite avec soin. L’auteur nie

Ul^CflEHCilES SUE LA FÉCONDATION

énergiqueineiil une liaison généiiqne quelconque enlce ces globules et la vésicule disparue. Warncck, dont Robin paraît avoir ignoré te travail antérieur au sien de plus de dix ans, avait su voir plus juste. D’après le savant français, il se montre au bord du vitellus une substance claire qui donne naissance, par un procédé de gemmation, successivement à deux globules; chez les Ilirudinées il s’en forme trois et même quatre. îl se présente, quant au nombre et à la forme des globules, une série de variations très-intéressantes, mais qu’il serait trop long d’énumérer ici. Chez les Ilirudinées, le premier globule se réunirait au précédent et le produit de cette fusion se joindrait au dernier globule. Chez les Gastéropodes pulmonés, les deux premiers globules naissent par bourgeonnement et se réunissent bientôt en un seul corpuscule qui reste logé dans la membrane qui entoure le vitellus, tandis que le dernier globule sortirait tout formé du sein du vitellus et se logerait en dedans de la membrane vitelline. Le corpuscule externe rentrerait dans le dernier mais seulement en partie. Le troisième globule polaire serait particulier aux Mollusques et n’aurait pas d’homologue chez les Ilirudinées. Je puis difficilement porter un jugement sur ces résultats, n’ayant jamais observé chez aucun des animaux que j’ai étudiés, de fusion véritable entre les globules polaires; je n’ai jamais non plus vu sortir du vitellus un globule préformé. Quant à la pellicule qui entourerait le vitellus des Gastéropodes Pulmonés, je la considère simplement comme la couche interne de l’albumen de l’œuf. Plus tard Robin trouve au centie du vitellus un noyau qui paraît répondre au noyau combiné et non au proniicléus femelle.

Ratzel et Warschawsky (lxxxix) remarquent que chez le Lumbricus agricola les œufs non fécondés ne perdent pas leur vésicule germinative, quoique celle-ci prenne des contours indécis. Chez celui des œufs de chaque cocon qui a subi la fécondation, la vésicule germinative se réduit à une tache claire mal définie à côté de laquelle se trouve une traînée claire dans le vitellus. Ce dernier subit le retrait et s’entoure d’une membrane, en dedans de laquelle naissent les globules polaires.

A propos de la maturation des œufs du Tuhifex riviilorum (xc) Ratzel

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÈNIE.

est plus explicite. Il montre que la vésicule des œufs mûrs perd ses contours déterminés et devient un corps allongé, renflé au milieu et aminci vers les deux pôles. La partie renflée présente une striation parallèle aux méridiens que l’auteur attribue à la présence d’une enveloppe en cet endroit. Cette description s’appliquerait jusqu’à un certain point à l’amphiaster de rebut et nous pourrions attribuer à Ratzel la priorité de la découverte d’ufle partie de cette disposition importante si, dans la figure qui représente cette phase, le noyau ne présentait les stries dirigées suivant l’équateur et si le dessin rappelait réellement l’aspect d’un amphiaster.Tel qu’il est, ce dessin ne peut être ainsi interprété qu’à l’aide de beaucoup d’imagination et de bonne volonté. Ratzel indique du reste fort bien que la tache germinative disparaît la première et que le corps allongé et strié présente une consistance telle, qu’il se conserve au milieu de la substance vitelline de l’œuf écrasé. Toutefois Ratzel considère ce corps comme étant simplement la vésicule germinative modifiée dans sa forme; prenant cette phase comme point de départ du développement embryonnaire, il conclut à la persistance de la vésicule et à sa division directe. Les relations de la vésicule avec les globules polaires paraissent lui avoir échappé chez Tuhifex.

Un travail important d’Œllacher, publié en 1872 (c) confirme pour la Truite les observations anciennes sur le sort de la vésicule germinative que Purkinje, v. Baer et antres avaient déjà fait connaître pour ceux des Vertébrés dont le vitellus de nuti ition est relativement considérable. Il donne à cet égard une foule de détails qui établissent avec certitude que la vésicule arrive à la surface, vide son contenu à l’extérieur et que sa membrane même vient s’étaler sur la surface du vitellus. Tous ces processus ont lieu aussi bien chez l’œuf infécond que chez l’œuf fécondé. Déjà antérieurement, le même auteur (xciv) avait publié sur l’œuf de Poule des observations moins complètes mais tendant à la même conclusion. Dans un autre travail sur le premier développement de la Truite (xcviii), le même auteur constate qu’il a observé une fois, dans un œuf dépourvu de sa vésicule germinative, un noyau beaucoup plus petit et

RECHERCHES SUR LA FÉCONDAïtON

qu’il considère comme de forma lion nouvelle el sans lien génésique avec la vésicule. Ce fait n’a été observé que sur un seul œuf el recherché en vain chez un grand nombre d’œufs contemporains de celui-là.

Pour rilydre d’eau doucC;, Kleinenberg (en) décrit un réticulum sarcoüique dans la vésicule germinative de Fovüle approchant de la malui‘ilé. Pendant la maturation, la tache germinative perd sa netteté et se réduit en fragments qui se dissolvent; puis le contenu de la vésicule devient un simple liquide tenant en suspension des corps réfringents que l’auteur considère commode la graisse; tout le processus de la métamorphose régressive du noyau et du nucléole de l’ovule n’est à ses yeux qu’une dégénérescence graisseuse. La membrane de la vésicule est trèsrésistante chez celte espèce; l’auteur la croit composée d’une substance cornée ou chitineuse, opinion sur laquelle je fais mes réserves comme sur celle de la dégénérescence graisseuse de la vésicule. Cette membrane crèverait et son contenu s’épancherait dans le vilellus; plus lard la membrane a disparu mais son mode de disparition n’a pas été observé. Plus lard encore, mais avant la fécondation, le vilellus expulserait une certaine quantité de liquide dans lequel nagent deux globules polaires. Je fais encore mes réserves sur tous ces points et me contente de noter que la disparition de la vésicule et rexislencc des globules polaires ont été constatées chez îhjdra avant la fécondation.

Dans mon mémoire sur le développement des Geryonides (cvii) les phénomènes de maturation ne sont pas traités. L’ovule est laissé au moment où il a atteint toute sa croissance dans l’ovaire cl présente une grande vésicule germinative avec sa tache; de là la description passe sans transition à l’œuf fécondé, entouré d’une membrane vitelline et muni d’un noyau beaucoup plus petit que la vésicule. J’ai eu le tort de désigner ce noyau du nom de vésicule; cette faute de terminologie m’a fait classer parmi les auteurs qui croient à la persistance de cet élément. Telle n’était nullement ma pensée, ainsi que cela ressort de l’examen du texte et en particulier de la phrase suivante (jue Je reproduis mot à mol: « Il (( sei'ait inl(“ressant de savoir si ce noyau (de l’(euf fécomb') provient du

ET LE COMMENCEMENT DE l’HÉNOGÉNIE.

« noyau de l’ovule avant la fécondation ou de sa tache germinative, ou (( si ces deux éléments disparaissent pour faire place à une formation (( nouvelle. » J’étais donc dans le doute et mes opinions d’alors ne mériteraient pas d’être rapportées si je ne me voyais appelé à corriger de fausses interprétations. Dans le même mémoire j’ai signalé l’existence d’un petit noyau dans l’œuf fécondé des Cténophores. Ce noyau est logé, près delà surface, à la limite de l’endoplasme et de l’ectoplasme. Cette observation est restée ignorée par des auteurs subséquents, peut-être à cause de la terminologie que j’employais.

Flemming (cviii), dans un mémoire consacré au premier développement des Anodontes, nous donne une description soignée des processus de formation des globules polaires. Ses observations à cet égard portent malheureusement toutes sur des œufs fécondés. Ces œufs sont déjà dépourvus de vésicule germinative, mais présentent dans leur intérieur une tache claire, rapprochée du pôle opposé au micropyle, voisine donc du point où se formeront les globules polaires. Ces derniers prennent naissance par un bourgeonnement lent; ils sont clairs et transparents sauf quelques poiites granulations qu’ils renferment, et sont encore complètement dépourvus de membrane propre, car cette enveloppe ne se forme que plus tard autour d’eux. L’auteur considère comme probable qu’il ne sort du vite! lus qu’un seul globule, de consistance très-résistante et qui se divise ensuite en deux. Le globule en voie de formation présente, vers son sommet, de petits pseudopodes hérissés à la manière de piquants. Flemming considère les globules polaires comme provenant de la vésicule et de la tache germinatives, quoique celles-ci eussent déjà disparu avant le moment où se montrent les premiers; il appuyé cette opinion sur l’affinité de tous ces éléments pour les substances colorantes.

Chez les Nématodes, Bütschli (ex, p. 101) remarque que l’ovule mal mûr présente une série de taches claires que le vitellus expulse de son sein et une vésicule germinative qui disparaît à la vue. L’auteur ne sait s’il doit considérer la vésicule comme absenle pendant la phase où elle

HEGHERCHES SUR EA FÉCONDATION’

reste invisible ou si elle est seulement devenue indislincle. Peu de temps après apparaissent deux noyaux; mais nous arrivons ici à un sujet qui sera amplement traité dans lecbapilie de la récondaliou. J)aus le travail cité, il n’est pas question des globules polaiies, qui existent pourtant chez les Nématodes.

Quelques mois après, Auerbacli (cxi) donna une description du premier développement des Nématodes, en prenant pour point de départ le vitellus déjà fécondé. Celui-ci n’a plus sa vésicule germinative; les globules polaires n’ont été vus qu’à une phase plus avancée, en sorte que l’époque et le mode de leur formation ont complètement échappé à notre auteur.

Dans un second mémoire sur le développement des Anodonles (cxv), riemming pénètre plus avant dans le détail des processus. Dans l’ovnle déjà bien développé, il trouve la vésicule germinative munie intérieurement d’un réseau de sarcode (p. 20) qui tient en suspension une tache germinative double et un nombre variable de nucléoles secondaires. Tant qu’ils sont dans l’ovaire, les œufs conservent leur vésicule. L’auteur ne les reprend qu’au moment où ils sont pondus, fécondés et dépourvus de leur vésicule; ils. présentent cependant, avant et pendant la sortie des globules polaires, une tache claire dans le vitellus. Llemming est d’avis, néanmoins, que la disparition de la vésicule est un pliénomène indépendant de la fécondation.

Revenant sur le premier développement des Nématodes, Bütschli (cxii) rapporte que la tache germinative devient indistincte déjà avant la fécondation. Après la réunion du zoos|»erme au vitellus, la vésicule germinative perd la netteté de ses contours et se rapproche de la surface; elle expulse de son sein un globule polaire, a[très quoi sa substance semble s’étaler à la surface du vitellus. Les nouveaux noyaux prendraient origine, aux deux pôles opposés du vitellus, aux dépens de celte couche qui provient de la substance de la vésicule. .le n’insiste pas davantage sur ces observations que j’aurai à rappeler au sujet de la fécondation. Bütschli a observé le premier dans la vésicule germinative en voie de métamor-

ET LE COMMENCEMENT DE L’hENOGÏÎNIE.

plîose régressive, la formation d’un corps fusiforme, strié en long (partie médiane du premier amphiaster de rebut) et qui se déplace jusqu’à toucher la surface. Il considère ce corps fusiforme comme résultant d’une métamorphose de la tache germinative et comme donnant naissance aux globules polaires; mais cette opinion n’est pas fondée sur l’observation directe de ces piocessus. Chez les Gastéropodes pulmonés, ce naturaliste soigneux a vu, dans l’intérieur des globules polaires, un ensemble de petits grains brillants, tous disposés dans un même plan et munis de prolongements en forme de filaments pai’allèles; il en conclut avec raison que ces globules proviennent du corps fusiforme, et, comme il dérive ce dernier de la tache germinative, il en résulte qu’il considère les globules comme descendant de cette tache.

Dans mon mémoire sur le développement des Ptéropodes (cxiv, p. 105 et suivantes), j’ai décrit l’œuf pondu et déjà fécondé de ces animaux. J’ai cru voir dans le centre du vitellus, déjà dépourvu de sa vésicule germinative, une figure étoilée unique qui se divisei*ait ensuite en une double étoile (le premier amphiaster de rebut). Cette observation repose trèsprobablement sur une erreur; là où j’ai cru voir une seule étoile, il y en avait sans doute déjà deux dont l’une m’aura échappé. Plus tard cette double étoile se divise de telle manière que l’étoile périphérique constitue le globule polaire, lequel se divise en deux globules après sa sortie. J’ai donc signalé le premier le rôle que ces figures étoilées jouent dans la formation des globules polaires. Le corps fusiforme n’a pas attiré mon attention, de môme que les étoiles ont échappé à Bütschli; chacun de nous a vu une moitié du phénomène et nos deux observations se complètent l’une l’autre. Quant à la formation d’un seul globule polaire qui se divise ensuite, cette description repose bien sur des observations positives mais peu nombreuses; je dois, jusqu’à plus ample informé, faire des réserves sur la généralité de ce processus même en ce qui concerne les Ptéropodes. Un autre fait important, signalé pour la première fois dans ce mémoire, concerne l’origine du noyau de l’œuf fécondé. J’ai montré que l’étoile (moitié interne de l’amphiaster de rebut) qui reste dans le vitellus

KECHEKCHES SUE J.A FÉCONDATION

après la formalion des globules polaires, se change en un ensemble de vacuoles ou de petits noyaux qui se fusionnent entre eux et constituent de la sorte un nouveau nucléus (le pronuclcus femelle).

Gœtte(cxvi) décrit la disparition de la vésicule germinative, avant la fécondation, chez l’œuf du Bomhinalor. Ses contours deviennent irréguliers et elle diminue de volume en perdant son suc; puis la vésicule réduite se mêlerait à la substance vitelline environnante, tandis que son suc serait expulsé au dehors. Enfin un nouveau noyau se montre dans le vitellus, mais il ne ferait son apparition qu’après la fécondation.

Hensen (cvi) démontre, d’après de nombreuses observations, que chez l’œuf de Lapine et de Cobaye, la vésicule germinative disparaît, que le vitellus subit son retrait et qu’un ou deux globules polaires effectuent leur sortie, quand meme la fécondation n’a pas eu lieu. Cet observateur consciencieux établit ce point important de la manière la plus catégorique.

Le beau travail de Strasburger (cxiii) nous renseigne surtout sur la présence dans le règne végétal de phénomènes tout à fait analogues à ceux que des travaux récents avaient fait connaître d’abord pour le règne animal. Chez Ephedra altissima, l’ovule mûr est muni d’un grand noyau; cet ovule est surmonté de quelques petites cellules nommées « Canalzellen. » Le noyau disparaît après la fécondation pour être remplacé par un certain nombre d’amas protoplasmiques qui deviendront les nouveaux noyaux. Chez Ginkgo bibola la disparition du nucléus primaire est suivie de la formation de plus de trente noyaux. Chez P/iaseolus multillorus le noyau disparaît de même et un certain nombre de cellules se forment simultanément de toutes pièces dans le sac embryonnaire. Le noyau de ces nouvelles cellules n’apparaît pas avant mais en même temps que la cellule elle-même qui le renferme. Chez Picea vulgaris, l’ovule mûr est surmontédes cellules canaliculaires et possède un noyau; après le contact du tube pollinique, le noyau disparaît, sa substance se disperse suivant des lignes radiaires et quatre nouveaux noyaux se montrent à la fois; parfois il s’en forme huit du coup. La description que donne l’auteur delà disposition des quatre noyaux au moment de leur apparilion fait songer

ET LE COMMENCEMENT DE l’h ÉNOGÈNIE.

aux phases avancées d’un lélraster. Plus loin, le savant bolanisle remarque que si, chez les animaux, la vésicule germinative disparaît avant ou peu après la fécondation, ce fait constitue une différence notable avec les plantes où l’ancien noyau persiste loujours là où il existait. — Comme on le voit, ces résultats tirés en partie des travaux de Nægeli, Hofmeister, DeBary, Dippel et autres et en partie des propres observations de l’auteur, ne nous fournissent aucun renseignement suffisant pour permettre une comparaison véritable avec ce que nous savons maintenant du premier développement des animaux. Ce noyau de l’ovule des plantes est-il comparable à une vésicule germinative ou à un pronucléus femelle? Le l'ègne végétal offre-l-il quelque chose d'analogue aux sphérules de rebut? présente-t-il, lors de la fécondation deux pronucléus distincts? Autant de questions que résoudra sans doute bientôt un botaniste au courant des récentes découvertes des zoologistes.

Chez PhaUusia mamillala, Strasburger décrit l’ovule mùr comme dépourvu de vésicule germinative et ne présentant qu’une substance vitelline homogène qu’entoure une couche corticale de protoplasme (« Hautsclîicht »). Après la fécondation artificielle, cette couche corticale présente, en un point, un épaississement qui affecte d’aboid la forme d’une lentille, puis celle d’un sac dont la partie intérieure se détache et s’enfonce dans le vitellus pour constituer un noyau. Ce noyau s’entoure de stries radiaires qui s’accentuent à mesure qu’il marche vers le centre du vitellus, et quelques vacuoles se montrent dans son intérieur. La marche centripète du noyau se ralentit quand il atteint le centre, les stries radiaires s’effacent et il devient homogène et difficile à voir. Plus tard il se divise pour produire le fractionnement de l’œuf. Ces observations fragmentaires et entachées d’idées préconçues, qui proviennent de la préoccupation de de retrouver ici des structures comparables à celles des cellules végétales, seraient difficiles à interpréter si mes propres observations sur PhaUusia ne m’avaient montré (|ue Strasburger a été témoin de la formation du pronucléus femelle. La naissance des globules polaires et celle du pronucléus mâle ont complètement échappé à son observation.

UKCriEUCHES suis la FfiCO.XUATIOA

Av;ml (raliorder les résullats des recherches d’O. Heriwig sur les Oursins, je dois inlercaler un résumé des travaux plus anciens sur ces animaux, travaux dont je n’ai pas encore rendu compte. Cette exception à l’ordre chronologique, que je me suis efforcé de suivre, se justifie par la nécessité de présenter ensendjle toutes les observations laites sur un cas, qui diffère très-sensiblement de tous ceux que nous venons de passer en revue.

V. fiaer (xxxiii) remarque que l’ami' mùr de l’Oursin présente près de la surface un cercle clair qui serait composé d’une substance molle, Le vitellus .se tournerait toujours de façon que ce corpuscule se trouve en bas, d’où il faudrait conclure qu’il est formé d’une substance plus dense (pie celle du vitellus. Tout eu avouant n’avoir pas suivi avec assez de soin la genèse de ce corpuscule, l’illustre embryogénisle lui donne le nom de (( noyau de l’œuf )> à cause de son rôle dans la suite du développement. Comparant entre eux les œufs tout jeunes et ceux qui approchent de la maturité avec les ceufs complètement murs, rauteur croit devoir déclarer que ce noyau est identique à la tache de Wagner de l’œuf mal mùr. I^a vésicule germinative est si grande qu’il hésite à la comparer à celle des autres animaux; elle disparail assez longtemps avant la maturité complète de l’(Euf. Le « noyau de l’œuf » jouerait, d’après v, Baer, dans l’œuf de l’Oursin, le même rôle que la vésicule germinative dans les œufs des autres animaux.

La description que donne Dufossé (xxxvi) de l’œuf de l’Oursin s’adresse exclusivement aux ovules mûrs; elle est trop inexacte pour mériter une analyse spéciale.

Derbès ixxxvii) décrit Tovule mal mùr comme présentant trois contours concentriques, et sa ligure montre ipi’il entend par là le contour du vitellus, celui de la vésicule et celui de la tache germinative. La vésicule disparaîtrait purement et simplement, et la tache, restant en place, deviendrait le noyau de l’ovule mûr (pronucléus femelle) auquel Derbès applique le nom de vésicule germinative, parce qu’il n’a pas reconnu la nature de la véritable vésicule. Le vitellus est entouré d’une couche transparente (oolemme pellucide) qui serait sans structure.

Er LE COMMENCEMENT DE i/hÈNOGÈNIE.

Krohii (xLiii) prétend (jue la vésicule germinative de l’Oursin ne disparaît pas avant la fécondation, comme v. Baer et Derbès l’avaient observé; ce n’est qii’après la fécondation que la vésicule et la tache disparaîtraient. Malgré l’exactitude habituelle de ce chercheur, il est difticile de ne pas croire qu’il a commis dans cette occasion une giosse erreur Le vitellus fécondé présente dans son intérieur un élément sphérique, vésicLileux, transparent, dont les dimensions sont les mêmes que celles de la tache germinative.

J. Müller (liv) considère la couche mucilagineuse comme complètement indépendante de la membrane vitelline avec laquelle elle n’a aucun rappoi't. Leydig (lxiv) pense que la membrane vitelline résulte du durcissement de la partie la plus interne de la couche mucilagineuse.

D’après Meissner (lxxi);, le vitellus de VEckinus esculentus est entouré d’une membrane vitelline très-délicate qui présenterait toujours une ouverture micropylaire. Cette membrane existerait dès l’origine de l’ovule et serait elle-même enveloppée d’une couche résistante d’albumen. Je donne l’analyse de cette description si superlicielle, parce que quelques auteurs qui n’ont pu se procurei- cette petite publication de Meissner ont cru à tort qu’elle pourrait renfermer des données importantes. — La vésicule germinative n’existe plus chez les œufs prêts à être pondus; il ne reste qu’une tache claire centrale autour de laquelle les granules vitellins présentent un arrangement radiaire distinct; une seconde membrane se forme en dedans de la membrane vitelline... nous entrons, comme on le voit, à pleines voiles dans une description des phénomènes qui suivent l’acte de la fécondation, sans qu’il soit possible de discerner, d’après la description de l’auteur, quelles sont les phases qu’il a eues sous les yeux; l’on ne sait en particulier si ce noyau entouré de lignes radiaires est un pronucléus femelle ou un noyau fécondé, ou si l’auteur n’a pas confondu et mêlé toutes ces phases.

A. Agassiz ( lxxxiv et lxxxv) ne paraît pas avoir accordé une attention spéciale au premier développement des Oursins. Les remarques qu’il fait incidemment à ce sujet se bornent à dire que les [)remières

r, ECHEr.cn ES sur. la eEcon dation

pliases (le l’Oiirsin présenl(?nl les ni("mes faits ((ue celles de l’Astérie, que laformationdesglobules polaires est tiv, s-facile à suivre cliez Toxopneustes, et que ces globules occupent, comme chez Âstcrias, ime position constante relativement à l’axe de fractionnemeni, — autant de données qui sont en contradiction absolue avec les l’ésullats de O. Ilertwig et les miens. Chez Âslerias, le zoologiste américain n’a étudié que l’œuf (bijà fécondé. Peu après la rotation produite par les zoospermes, la vésicule germinative disparaît et, à en juger d’après les dessins dont le mémoire est illustré, le vitellus ne contiendrait pins qu’une tache germinative noyée dans la sid)slance vitelline. Cette tache disparaîtrait à son tour et le vitellus |trendrait un aspect uniformément granuleux. Puis le vitellus se retire et il apparaît un espace clair entre sa surface et la membrane vitelline, après quoi le fractionnemeni commence, lœs globules polaires se montreraient au moment où le vitellus est divisé en deux sphérules. L’auteur n’a évidemment accordé a ces phénomènes qu’une attention distraite et sa description est trop inexacte pour que nous nous arndions à l’inlerpréler.

ï.a description que donne Holfmann (xcviii) des ovules des Oursins et des Astéries ressemble à celle de Dufossé. Nous ne nous y arrêtons pas. U. Lud wig (civ, p. 295 et suiv.j montre que les ovules des Oursins et des Astéries résultent du développement direct de cellules, distinctes les unes des autres dès l’origine, munies du noyau et du nucléole et tapissant, à la manière d’un épilhèle, la face interne de la paroi des follicules ovariens.

O. Uertwig (cxvii) a fait du premier développement des Oursins une élude consciencieuse et détaillée qui fournit une réponse souvent juste et satisfaisante à beaucoup de questions qui n’avaient été qu’abordées par ses prédécesseurs. L’ovule de Toxopneustes lividus, renfermé dans l’ovaire, se constitue, aux approches de la maturité, d’un vitellus granuleux, renfermant une grande vésicule germinative et entouré d’une large couche gélatineuse (oolemrne). La vésicule est composée d’une membrane, d’un contenu edair comme de l’eau et d’une tache germinative

ET LE COMMEiVCEMEiVT DE i/hÉNOGÉNIE.

généralement unique. La membrane de la vésicule est nettement limitée en dedans comme en dehors. Suivant l’exemple d’Auerbach, Hertwig la considère comme faisant partie du protoplasme qui entoure la vésicule. ,T’ai indiqué les raisons pour lesquelles je ne puis adopter cette manière de voir. Le micléolc;, à peu près sphérique, mesure 0"'"’,013 en diamètre et se compose d’une substance albumineuse compacte qui prend une coloration foncée dans le carmin et l’acide osmique et présente dans son intérieur une grande ou plusieurs petites vacuoles. Quelques ovules ont, outre ce nucléole régulier, deux ou trois^petits nucléoles accessoires. Chez l’Oursin, cet élément ne présente pas de mouvements amiboïdes. L’auteur donne à la matière qui compose le nucléole le nom de « substanc(i nucléaire » et au contenu de la vésicule germinative, celui de (( liquide nucléaire. » Ces dénominations s’expliquent par la notion erronée qu’avait le savant zoologiste sur le rôle de ces parties dans la suite du développement; nous ne les emploierons même pas dans la présente analyse qu’elles rendraient plus diffîcile à comprendre.

Un protoplasme transparent, parsemé de granules, entoure le nucléole et s’étend sous forme de filaments anastomosés jusqu’à la paroi de la vésicule qu’il semble tapisser. Ilertwig attribue à tort à Kleinenberg la découverte de ces réseaux intra-nuclcaires; le lecteur trouvera à cet égard des renseignements bibliographiques dans un très-bon travail de Flemming (cxxiii) sur ce sujet. Cette structure du noyau est très-répandue dans le règne animal et ne nous autorise pas à considérer, avec O. Hertwig, la vésicule germinative comme un noyau particulièrement différencié. l^a couche de gelée qui entoure l’ovule mal mûr est percée de nombreux canalicules perpendiculaires à sa surface et par lesquels s’opérerait la nutrition de l’ovule. Cette couche ne présente pas de solution de continuité, pas demicropyle.

L’ovule mûr tel qu’on le trouve dans l’oviducte est de composition toute différente. Le vitellus homogène, sans vésicule germinative, ne présente qu’une tache claire, mesui'ant 0'ith,013 en diamètre. Cetk> tache est en n'alité un coi ps compacte, homogène, résistant, sans

RECHEnCîlRS SUR LA FÉCONDATION

membrane, et se colorant fortement. par le carmin ou par l’acide osmique (pronncléns femelle). L’on pressent de suite la comparaison que l’auteur va faire entre ce corps compacte et le nucléole de l’ovule mal mûr. Il remarque, il est vrai, que cet élément de l’œuf mûr présente dans l’acide acétique une enveloppe distincte, mais il ne paraît pas avoir fait la même réaction sur l’ovule mal mûr; sans cela il n’eût pas manqué de s’apercevoir que le nucléole se comporte tout autrement sous l’action de cet acide, llertwig’ désigne ce pronucléus femelle du nom, déjà proposé par V. lîaer, de « noyau de l’œuf; » ce terme ne me paraît pas plus lieureusement choisi que les autres désignations employées par notre auteur.

lœs enveloppes de l’ovule ont subi, pendant sa maturation, des changements non moins grands. Une membrane résistante, à double contour, entoure le vilellus dont elle est séparée par une gelée, claire comme de l’eau, mais qui prend une teinte brune dans l’acide osmique. La membrane est encore entourée extérieurement d’une couche mucilagineuse mince et transparente. Comme on le voit, llerlAvig considère comme propre à l’ovule mûr cette membrane soulevée qui est caractéristiipie pour l’œuf fécondé, léovulc ne présente jamais avant la fécondation de membrane répondant à celte description.

Pour trouver les intermédiaires entre les deux états qu’il vient de décrire, O. lîertwig s’adresse soit à des animaux jeunes dont l’époque de maturité est plus tardive (pie chez les adultes, soit à des individus qui, par suite d’une réclusion prolongée, avaient évacué la majeure partie de leurs produits sexuels. Ne perdons pas de vue cette dernière méthode; elle nous donnera la clef d’une partie des erreurs commises par l’auteur que j’analyse, car nous savons maintenant que les œufs d’individus conservés en cajilivité ne présentent guère que des processus pathologiques. Le liquide employé par Hcrtwig pour faire ses préparations est le liquide du corps qui a l’inconvénient de se décomposer en peu d’iienres.

O. llertwig trouva, par ces méthodes, des ovules chez lesipiels la vésicule germinative était ( onqd('‘iemenl sortie du vilellus et lui (dail

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÉNIE.

accolée extérieurement. Tantôt la tache germinative se trouvait dans la vésicule expulsée au bord du vitellus, tantôt elle était absente, mais dans ce cas le vitellus renfermait toujours le « noyau de l’œuf. » — J’ai cherché à revoir les images qui viennent d’être mentionnées, mais Je n’ai pas pu les retrouver, jusqu’au jour où, ayant conservé sous un compresseur des ovules qui, par mégarde, se trouvaient un peu comprimés, j’ai vu effectivement se dérouler des processus de ce genre. Je suis donc porté à croire que, muni d’un outillage insuffisant, le savant naturaliste aura observé des œufs comprimés, à son insu, par le couvre-objet de la préparation. Il est souvent difficile de se rendre un compte exact des choses que llertwig a pu avoir sous les yeux, à cause du genre purement schématique qu’il a adopté pour ses dessins. Il me semble cependant que dans les cas où il a trouvé la vésicule germinative expulsée à la surface et une tache claire dans l’intérieur du vitellus, cette tache représentait le nucléole et point du tout le noyau de l’œuf (pronucléus femelle).

D’autres fois, riertwig trouve dans l’intérieur de l’ovule la vésicule germinative sans son nucléole et à côté, au milieu de la substance vitelline, une tache claire qu’il prend pour son « noyau de l’œuf. L’interprétation que nous devons faire de cette observation n’est pas douteuse: nous avons affaire ici à ces ovules modifiés par un séjour dans un liquide corrompu, ou, ce qui revient au môme, provenant de ces exemplaires d’Oursins gardés en captivité et qui répandent, au moment où on les ouvre, une odeur putride. J’ai décrit des cas analogues (p. 32) et je les ai représentés sur les fig. 3 et 4 de la pl. V; j’ai montré que le corps rond que l’on rencontre à côté de la vésicule germinative n’est autre chose que le nucléole expulsé. Je n’insiste donc pas à nouveau sur ce sujet.

En résumé, O. llertwig a pris pour normaux des cas pathologiques. Je me hâte d’ajouter que cette erreur trouve son excuse dans l’extrême difficulté que présente la recherche de ces phases de transition chez rOursin, difficulté dont une étude poursuivie pendant plusieurs mois a seule pu triompher. Nous devons aussi tenir compte cà llertwig de la réserve vraiment scientifique avec laquelle il s’exprime, malgré une convie-

lUîCHEHCHliS SLIU LA FÈCONI)ATI()x\

liüii anêlée qui se tait jour coutre le gré de l’auleur. I^a eourlusion générale des recliei ches du savaiil oljservaleur ne pouvait être qu’erronée, puisqu’elle reposait sur des prémisses faulives.

E. van Beneden (cxviii),dans un récent mémoire sur le dévelop[»ement des Mammifères, constate la présence d’une substance granuleuse dans le noyau de l’ovule du Lapin avant la maturité. Cette substance à laquelle il donne le nom de nucUo plasma, affecte souvent la foinie d’un réticulum et tient en suspension un nucléole accompagné de deux ou trois pseudonucléoles. Aux approches de la maturité, la vésicule se meut vers la surface du vitellus et vient s’aplatir contre la zone pellucide; elle s’entoure en même temps d’une couche de protoplasme. Le nucléole s’aplatit ensuite contre la membrane de la \iésicnle du côté où celle-ci affleure à la surface du vitellus; elle se soude avec cette membrane en une plaque que l’auteur nomme la « pla([ue nucléolaire. » Le reste de la membrane s’amincit et semble venir se réunir à cette plaque; le reste du contenu de la vésicule, à savoir le nucléoplasme et les pseudonucléoles, conslituent un amas auquel l’auteur dorme le nom de « corps nucléoplasmique. » Quant au liquide de la vésicule, il se môle au proto[»lasme environnant. La pla(|ue nucléolaire se l amasse en un corps ellipsoïdal, lenticulaire ou en forme de calotte, ([ue l’auteur désigne du nom de (( corps nucléolaire. » Les globules polaires, que v. Beneden persiste à ap[>eler les « corps directeurs, » sont éliminés au moment de la dis|)arition de la vésicule germinative. Ils ne sont pas tous deux de mêiue composition et n’ont pas la môme signification. Le premier l'épondrait au (( corps nucléolaire, » le second au « corps nucléoplasmique; » l’un se colore en rouge par le carmin, l’autre ne prend [)as la matière colorante. Le protoplasme amassé dans cette partie du vitellus se confond avec la couche corticale.

Le retrait du vitellus commence au moment de la disparition de la vésicule germinative et consiste dans l’expulsion d’un liquide Iransparenl, nommé « périvitellin, » qui s’accumule entre le vitellus et la zone pellucide. Le vitellus reprend ensuite sa forme sphérique et, à en croire

ET LE COMMENCEMENT J)E l’hENüGÊNIE.

V. Beiieden, il rcileviendrail c, un cylode » ol inérilerail « le nom de (( Monerula qui a été donné par Hæckel à l’œuf dépourvu de sa vésicule « germinative. »

Plus lard railleur trouve au centre du vilellus un noyau qu’il nomme le pronucléus central, par opposition à un pronucléus périphérique. Ce noyau central correspond évidemment à notre pronucléus femelle dont l’auteur n’a pas vu le mode de formation.

(( La disparition de la vésicule germinative, continue v. Beneden, la « production des corps directeurs, le retrait du vilellus et la cessation (( de toute séparation en substance corticale et médullaire sont des plié- « nomènes indépendants de la fécondation. Ils se raltaclienl à la malu- (( ration de l’ovule. Chez le Lapin, ils s’accomplissent dans l’ovaire. »

Ainsi, E. van Beneden abandonne complètement la thèse qu’il avait été le dernier à soutenir, de la persistance de la vésicule germinative malgré la maturation et la fécondation de l’œuf, et se convertit à l’o|)inion plus généralement reçue de la disparition de cette vésicule, accompagnée de la naissance des globules polaires. Le savant belge soutient en outre l’opinion de Bischolf et de llensen sur l’indépendance de ces processus et de ceux de la fécondation. Les phénomènes d’attraction et les figures étoilées, qui président à la sortie des globules polaires et qui avaient été précédemment décrits (cxiv) ont complètement échappé à son observation, puisqu’il ne les mentionne même pas. Il devient dès lors très-ditficile d’interpréter les données de ce savant sur la nature et l’origine des globules polaires; si sa description ne renferme pas de grandes lacunes, il faudrait admettre que ces phénomènes diffèrent considérablement chez les Mammifères de ce qui a été observé jusqu’à présent dans les autres classes du règne animal. Celle supposition n’est guère plausible. L’origine du pronucléus femelle a complètement échappé à l’atlenlion de v. Beneden, et c’est sans doute à celle faute d’observation qu’il faut attribuer l’appui donné par ce savant aux élucubrations et à la terminologie des soi-disant philosophes de la nature.

L’ensemble des recherches de Bülschli (cxix), dont plusieurs frag-

RECHEKCHES SUR EA FÉCONDATION

nieiils avinuiil élu publics prcccdcmmeni, nous apporle une (juautilé de l’enseiguemeuls nouveaux el uliles. Chez Nephelis vulgaris railleur n’a étudié que les o3ufs déjà fécondés. Dans l’intérieur du vitellus se trouve, peu après la ponte, un corps fusiforme strié en long qui paraît résulter d’une inétainorphose de la vésicule germinative. Les stries longitudinales de ce fuseau présentent, chacune à son milieu, un renflement brillant et granuleux; ses deux extrémités plongent dans des espaces clairs qu’entourent de toutes parts les granules vitellins rangés en rayons divergents. Le fuseau ainsi constitué arrive à la surface du vitellus par une de ses pointes; il se pousse hors du vitellus en traversant l’espace clair qui entourait cette pointe. La partie du fuseau qui dépasse la surface du vitellus s’arrondit pour constituer le globule polaire; dans son intérieur l’on voit une zone de granules foncés reliés par des filaments avec une seconde zone de granules qui se trouvent encore dans le vitellus. Les globules polaires, au nombre de trois, représentent la vésicule germinative métamorphosée el expulsée; ils se réunissent plus lard en un seul globule qui présente dans son intérieur une double figure radiaire. Audessous du point de sortie de la vésicule se moulre le rudimeul d’un noyau (pronucléus femelle), tandis qu’un autre petit noyau apjiaraîtrail près du ceulre de l’œuf (pronucléus male). L’on voit que Bülschli n’admet pas la formation successive de plusieurs amphiaslers de rebut, mais d’uii seul qui serait enlièremeul expulsé du vitellus.

Chez Cucullanus elegans, l’ovule mûr possède encoie une grande vésicule germinative, mais la tache est déjà bien réduite. Après la réunion du zoosperme au vitellus, celle tache disparaît, elà sa place l’on voit un cercle de granulations entouré de petits bâlonuets, le tout renfermé dans un corps à contours déterminés. Un peu plus lard, la vésicule germinative disparaît aussi et se métamorphose eu un fuseau, présentant au milieu un ensemble de bâtonnets, composés de granules réunis el se continuant par de fins filaments jusqu’aux deux extrémités du fuseau (premier amphiasler de rebut). Celui-ci arrive à la surface contre laquelle il se couche en long. Les deux globules polaires paraissent résul-

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÈNOGÉNIE.

1er de la division de ce fuseau en deux portions égales; cependant cette division doit être accompagnée d’une perte de substance, puisque les deux globules polaires ont un volume inférieur à celui du fuseau. Audessous des globules, le vitellus présente une petite accumulation de protoplasme transparent, parsemé de gros granules. Ce protoplasme s’étale ensuite à la surface et tes nouveaux noyaux se forment sans doute à ses dépens. Chez Tylenc/ms imperfeclus, peu après la descente de l’ovule, ta tache germinative disparaît, la vésicule devient indistincte sur les bords et se rapproche de la surface; celle-ci s’enfonce en fossette au point où la vésicule vient affleurer et, dans cette fossette, se montre tout à coup un globule polaire. Puis la tache claire, dernier reste de la vésicule, se renfonce dans le vitellus et devient très-vague. Bientôt le premier noyau de fractionnement se montre au centre dy vitellus; il ne paraît donc pas, dans ce cas, se former par ta fusion do deux noyaux distincts. Chez Anguillula rigida, la tache germinative disparaît chez l’ovule mùr; la vésicule arrive au bord du vitellus et donne probablement naissance au globule polaire, après quoi sa substance s’étale à la surface du vitellus. Puis il se forme des amas de protoplasme en divers points de cette surface, surtout aux deux pôles opposés et la substance étalée de la vésicule semble se mêler à ces amas qui donnent naissance aux noyaux centripètes. Pendant tous ces processus, le vitellus exécute des mouvements amiboïdes, surtout chez le genre Diphgasler.

Les œufs pondus, et par conséquent fécondés, de Limmwus auricularis ont, d’après Bütschli, dans leur intérieur une tigure composée de deux étoiles reliées par de minces (ilaments (premier amphiaster de rebut). Ces deux systèmes rayonnés se rapprochent de la surface qu’atteint le plus périphérique des deux. Ce dernier sort du vitellus pour devenir le premier globule polaire, tandis que le système rayonné intérieur semble constituer un corpuscule qui se délimiterait dans le vitellus, pour en être ensuite expulsé en bloc. Toutefois l’auteur avoue n’être pas parfaitement au clair sur le sort des deux systèmes rayonnés. Hans les globules polaires, Bütschli a remaiapK* l('s petits grains reli(‘s par des (ilaments l(hius

RECHERCHES SUR EA FECONDATION

el disposés siiivanl (les plans transversaux. L’étoile qu’il a observée au centre (lu vitellus semble se rapporter au pronucléus mâle. Au-dessous du point où se trouvent les globules polaires, se forme un certain nombre (le petites vacuoles ([ui se réunissent entre elles jusqu’à former deux noyaux qui marchent vers le centre du vitellus où ils se soudent à leur tour. Le savant naturaliste a vu parfois quelques filaments reliant le point où naissent ces vacuoles à celui où se trouve le second globule polaire, mais il ne leur attribue aucun rôle.

Ainsi donc, malgré les résultats que j’avais obtenus chez les Ptéropodes et qui démontraient que le premier amphiaster de rebut donne à la fois naissance aux globules polaires et à un nouveau noyau vitellin, Bütschli continue à admettre que cet amphiaster est expulsé en entier, et que le nouveau noyau (pronucléus fcmelhî) prend naissance indépendamment de ramphiastcr. Enfin la formation, au-dessous des globules polaires, de vacuoles qui se réuuisseut entre elles el la naissance des deux promicléus aux pôles opposés du vitellus ne sont pour lui que des variations d’un même processus.

Chez les Rolifères {Nolommala, Brackionus, Triarlhra) Bütschli observe (pi(î la vésicule germinative de l’œuf mùr est devenue beaucoup plus pcîileque celle de l’ovule mal mùr el nnnne, chez Triarlhra^ plus petite de moitié ([ue l’aucienue tache germinative. Aucune trace de globules polaires u’a pu être découverte. Après la ponte, celte petite vésicule germinative disparaît el, aussitôt apiœs, le vitellus se divise en deux. Si J’en juge par analogie, je dirai que ce noyau du vitellus mùr n’(3st pas une v('sicule germinative, mais un pronucléus femelle; que les globules polaires u’onl pas été vus, probablement pai‘ ce qu’ils se forment (bqà dans l’ovaire; et que la disparition du noyau apiès la ponte répond à la formation de ramphiasler de fractionnement el non à celle de l’amphiasler de rebut. Telle est l’explication la plus plausible que j’aie pu trouver de ces résultats.

Dans \(', psPHihwïim des Aphidiens (du genre Fînlschli nous ap-

pia'ud (pie la tache giM ininativi' tnnibe en mor(‘eaux, (pie la V('sicnle ar-

ET LE COMMENCEMENT DE L’HfîNOGÊNIE.

rive à la surface et disparaît tout à coup à la vue. Cependant aucun corps fusiforme, aucun globule polaire n’a jamais été observé. Plus lard, l’on retrouve dans te vitellus un noyau unique qui préside au fractionnement.

Dans un mémoire consacré au premier développement d’une Astérie (cxx), E. van Beneden expose le résultat de quelques observations faites deux années auparavant. L’ovule mûr, tel qu’on le trouve dans l’ovaire, est entouré d’une couche mucilagineuse continue, présentant une striation, due à la présence de pores en canalicules. L’auteur compare avec justesse, au point de vue physiologique, cette couche tà la zone pellucidc de l’œuf des Mammifères et pense que ni l’une ni l’autre n’est sécrétée par le vitellus; il fait du reste ses réserves quant à la similitude morphologique de ces couches molles. Dans la masse du vitellus, ce savant fait une distinction entre une couche corticale et une substance médullaire passant de l’une à l’autre par des transitions insensibles. Cette distinction ne me paraît pas justifiée. En revanche, je souscris pleinement à ses conclusions, lorsqu’il nie la présence d’une membrane distincte à la surface du vitellus.

La tache germinative renferme des vacuoles, et à côté d’elle se trouveraient de huit à quinze globules plus petits, les pseudonucléoles, formés d’une substance beaucoup moins réfringente. L’auteur admet par analogie que le nucléole A'Asterias doit présenter des mouvements amiboïdes quoiqu’il ne les ait pas observés chez cette espèce; je ne les ai pas vus non plus et crois pouvoir nier leur existence. En revanche, v. Beneden a positivement vu ces mouvements chez les œufs de Polystomum et de la Grenouille; chez les nucléoles disparaîtraient et feraient leur

réapparition allernalivement. Le savant belge combat l’opinion d’Auerbach et de Ilertwig, d’après laquelle la membrane de la vésicule germinative ferait partie du vitellus et non du noyau; je me suis rangé a son point de vue, quoique mes motifs soient différents de ceux qu’invoque noire auteur. Dans la vésicule germinative, il retrouve le réseau déjà connu de filaments protoplasmiques.

HKCHEHCHES SUR LA FÉCONDATION

. Dans (les ovaires tonl à lait mûrs, v. Beneden a trouvé exceptionnellement des œufs dont la vésicule germinative se rapproche de la surface et d’antres on elle a disparu. Lorsque la vésicule est devenue superficielle, elle se trouve en contact immédial avec la zone pellucide, à moins qu’elle n’en soit séparée par une mince couche de protoplasme, tœ réseau de sarcode n’est plus visible dans son intérieur. Si l’on place les œufs mûrs dans l’eau de mer, la vésicule germinative disparaît, que l’œuf soit fécondé ou qu’il ne le soit pas. Cependant elle disparait plus promptement lorsque les œufs sont fécondés.

lœs particularités de la disparition du noyau de l’ovnle sont les suivantes : le nucléoplasme réuni autour du nucléole disparaît, puis le nucléole lui-même devient de moins en moins réfringeni, son contour pAlil, toutes ses vacuoles se réunissent en une seule, ses formes deviennent irrégulières, framhoisées; enfin il se résout brus(jnement (îu fragments inégaux quise dispersentdans le liquide delà vésiculegerminative. Un de ces fragments, plus gros que les autres, renferme la vacuole de la tache germinative. Ces fragments segonltent et se dissolvent, le gros fragment disparaissant le dernier. La vésicule germinative est encore sphérique, mais ses contours ont pâli, comme si la substance de sa membrane se fondait; cette membrane se perfore, toujours du côté qui regarde vers l'inlérieur de l’œuf et, par cette ouverture, le liquide de la vésicule s’écoule dans le vitellus, formant une goutte claire à c(Mé de la membrane flétrie. Puis la vésicule modifiée s’écarte de la surface et se dissout; la substance vitelline envahit la place qu’elle occupait. Après cela, le vitellus présente le phénomène du retrait, les corps directeurs (globules polaires) apparaissent dans le liquide périvitellin et le fractionnement commence; mais l’auteur ne fait que mentionner ces processus, qu’il ne paraît pas avoir observés lui-même, et n’en fait pas la description.

Jugeant par analogie avec ce qu’il a trouvé chez Asterias, v. Beneden combat les conclusions de Hertwig. Le jugement qu’il porte sur les conclusions de son prédécesseur se ressentent de l’ignorance oû il se trouve lui-même des particulariU^s présentées par l’œuf des Oursins. Toutefois

V. Beneclen s’élomie avec raison de ne trouver chez Hertwig aucune mention des globules polaires, et combat l’identification tentée par le savant allemand de la tache germinative avec son « noyau de l’œuf » (le pronucléus central de v. Beneden, notre pronucléus femelle).

L’analyse de ces travaux récents dévoile donc une grande diversité d’opinions sur les relations des globules polaires avec la vésicule germinative et sur l’origine du prouuchhis femelle. De tous les auteurs cités, c’est Bütschli qui s’est le plus rapproché de la vérité; mais il se trompa en admettant la sortie complète du fuseau de l’amphiaster de rebut (la seule partie de l’amphiastei' à laquelle cet auteur accorde de l’importance) pour constituer à lui seul les globules polaires. Cette erreur le mettait dans l’impossibilité de comprendre ^l’origine du pronucléus femelle. Déjà dans mon mémoire sur les Ptéropodes, j’avais montré que l’aster intérieur de l’amphiaster de rebut est le centre de formation du nouveau noyau.

Ces données sont complétées et rectifiées dans mon mémoire sur les Météropodes (cxxii). Voici textuellement ce que j’écrivais alors sur ces phénomènes: « Le vitellus possède après la fécondation un noyau cen- « tral dont l’origine est encore inconnue. Aux deux côtés opposés de ce « nucléusapparaissent des centres d’attraction d’où partent des filaments « sarcodiques disposés en étoiles. Les plus gros de ces filaments s’éten- (( dent dans l’intérieur du nucléus d’un centre d’attraction à l’autre cen-

« Ire L’un des centres se rapproche de la surface du vitellus et l’autre

« le suit, quoique plus lentement. Le centre qui se trouve le plus près « delà surface sort du vitellus sous forme de globule, entraînant avec « lui une partie de ce que je crois être la substance du noyau primitif. (( Puis le centre,qui est resté dans l’intérieur du vitellus, se divise à nou- (( veau et sa moitié périphérique sort du vitellus de la même manière

c( pour former le second corpuscule de rebut L’étoile restée dans le

(( vitellus reprend ensuite la forme d’un noyau avec son nucléole et va

se réunir à un second noyau etc. » Nous trouvons dans cette description, pour la première fois, riiistoire des deux amphiasters de rebut et

UECIIEHCHES SUU LA FÉCONDATION

rorigine première du pronucléus femelle. Toutefois je dois ajouter qu’une lacune considérable subsistait dans mon exposé. J’étais resté dans l’incertitude sur la nature du noyau aux dépens duquel se forme le premier amphiaster de rebut; je n’avais pas reconnu dans ce noyau la vésicule germinative que je faisais disparaître avant sa formation. J’ai reconnu maintenant que ce noyau est identique à la vésicule germinative qui ne cesse d’exister qu’au moment où le premier amphiaster de rebut se forme à ses dépens.

La bibliographie, que nous venons de passer en revue renferme la plupart des résultats de mes dernières observations; seulement le bon grain est partout mêlé à l’ivraie. 11 fallait faire le triage et ce triage ne pouvait s’opérer qu’à la lumière d’études nouvelles. C’est ce que j’ai tenté de faire.

OH AMTRli: II

I PARTIE DESCRIPTIVE Le procefsisiis normal.

La pénétration du zoosperme dans le vitellus. J’aborde maintenant un sujet que je peux dire presque nouveau pour la science. Ce n’est pas qu’il n’ait depuis longtemps attiré l’attention des chercheurs et fait l’objet de nombreux travaux. Mais ces recherches furent couronnées de bien peu de succès comme nous le verrons en les analysant. Ce n’est que tout

ET r/E COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÈNIE.

réceniinenl que Ton a obtenu à cet égard quelques résultats importants; néanmoins la pénétration môme du zoosperme chez des œufs normaux et doués de vie était restée à peu près inconnue, malgré tous les efforts de mes devanciers. L’on comprendra dès lors le soin que je mis à constater ces faits et l’on me pardonnera ce que ma description peut avoir de trop détaillé et de trop minutieux.

C’est encore XAslerias glacialis qui m’a fourni les œufs les plus favorables à l’étude de cette série de phénomènes primordiaux. Mais tout en choisissant cette espèce comme hase d’observation, je n’ai pas négligé de prendre comme point de comparaison d’autres animaux dont je disposais en abondance suffisante. Les Oursins présentent quelques variations instructives du type de VÂsterias. Les œufs de Sagitta et ceux des Hétéropodes ne se prêtent pas à l’étude de la pénétration du zoosperme dans le vitellus, mais il est facile d’y suivre la formation des deux pronucléus et leur réunion; ils diffèrent, sous ce rapport, des Échinodermes que j’ai étudiés, par plusieurs particularités intéressantes.

Les procédés que j’emploie pour obtenir la fécondation artificielle des œufs d’ Astéries et d’Oursins méritent une mention spéciale, car de ces procédés dépend le succès des expériences. îl importe avant tout d’avoir des ovules mûrs et bien frais; la captivité ou la maladie des sujets affecte leurs produits sexuels avant de se manifester par l’aspect de l’individu atteint. Pour procéder avec une entière sécurité l’on devra donc opérer avec des animaux pêchés depuis peu d’heures et placés immédiatement dans des vases renfermant de grandes quantités d’eau de mer. Je me servais généralement d’animaux que j’allais pêcher moi-même, car il est difficile d’empêcher les pêcheurs d’amonceler les animaux en grand nombre dans une petite quantité d’eau. Pour avoir des ovules arrivés à complète maturité chez l’Astérie, l’on est obligé de se procurer une grande abondance de sujets et de choisir ceux dont les ovaires sont distendus d’œufs qui s’écoulent à la moidre piqûre faite aux parois de l’organe. Les ovules les plus mûrs sont ceux que l’on rencontre dans roviducle de ces sujets; mais roviducte est ditficile à trouver et l’on peut

IIKCHEP.CHES SUE LA FECONDA LIÜN

forl bien se seevii' des œiits qui sorteul de peliles décliimres de lovaire. Cliez les Oursins, la périodicilé dans les ë[)0(|ues du iVai peruiel d’opérer avec plus de sécurilé. L’évacualioii des produits sexuels chez ces animaux est liée à la lunaison; tout au moins les deux espèces qui ont but les Irais de mes expériences, le Toxoj)neu,'>lcs lividus et le Sphœrechinus hrcvispijiosus, péchés tous deux à rentrée du [lort de Messine, sont prêts à IVayer avant la pleine lune et vides peu de jours après. Les pécheurs, toujours très-vei’sés dans les particularités des animaux mani^eahles, connaissent fort bien ce lait. La ((uanlité de produits sexuels élaborés et évacués cinupie mois varie avec la saison. En novembre cette quantité est assez faible et se maintient à peu près la môme pendant les mois d’hiver. Au prinlenqis elle augmente à tel point qu’en juin les organes génitaux occupent, au moment de la maturité, la majeure partie de la cavité du corps. Mes observations ne s’étendent pas à l’été, mais au dire des pécheurs, les Ouisins continuent à se remplir pendant toute cette saison qui serait celle où ils sont le plus recherchés pour la table. Pour obtenir des ovules mûrs l’on n’a donc qu’à prendre ces animaux en toute saison, aux époques qui précèdent la pleine lune. Pour être sûr ([ue les [troduils, avec lesquels on opère, ne soient pas mêlés d’œufs mal mûrs, l’on fera bien de les prendre dans les oviductes en exerçant au besoin une très-légère pression sur l’ovaire. Une remarque (|ue j’ai faite à Messine m’a [)ermis d’étendre mes recherches au delà de l’époque trèslimitée (jiie j’ai indiquée pour la maturité sexuelle. En elîet les individus provenant de diverses stations ne frayent pas tout à fait en même temps; ceux qui se trouvent en mer sont vides aussitôt après la pleine lune^ tandis que ceux qui vivent dans le port ne se vident que quelques jours plus tard, et ce délai s’étend à une semaine ou même dix jours pour les Toxopneustes lividus qui vivent dans la lacune peu profonde qui s’étend enti’e la citadelle et l’ancien lazaret.

Enlin une dernière précaution indispensable consiste à ne pas mélanger aux œufs le liquide de la cavité du corps. A cet elTet, l’on n’a qu’à videi‘ ce liquide après avoir ouvert le test et laver à grande eau

ET LE COMMENCEMENT DE l’HÉNOGÈNIE. 87

l’intérieur de l’Oursin ou de l’Astérie avant d’entamer les oviductes. Les œufs, une fois extraits, doivent être placés dans des quantités relativement considérables d’eau de mer pure et fraîche, et utilisés le plus tôt possible.

Le sperme est facile à avoir; les sexes étant en nombres à peu près égaux, l’on trouvera toujours les mâles arrivés à maturité en cbercbant des femelles. Il suffit d’entamer le testicule et de recueillir un peu du liquide blanc, de consistance crémeuse, qui s’écoule. On le mêlera aussitôt à un verre d’eau de mer fraîche; quelques gouttes du liquide opalin ainsi obtenu suffisent à féconder des quantités d’œufs Irès-considéraldes. Il ne faut pas oublier qu’après la mort de l’animal, sa liqueur séminale perd assez promptement ses propriétés fécondantes. Au bout d’une heure environ, le contenu du testicule se coagule en une masse de la consistance du lait caillé. Dispersée dans l’eau de mer fraîche et portée sous le microscope, cette substance se montre uniquement composée de zoospermes morts et immobiles. Le sperme mêlé à de grandes quantités d’eau de mer fraîche conserve sa vitalité un peu plus longtemps, mais la plupart des zoospermes sont déjà immobiles au bout de deux heures et si, à la cinquième heure, l’on mêle cette eau à celle qui contient des œufs, aucun de ces derniers ne donne le moindre signe d’imprégnation. Plus les zoospermes sont nombreux dans une même quantité d’eau et plus leur mort est prompte; je crois pouvoir, dans ce cas, l’attribuer à une asphyxie. C’est sans doute aussi par asphyxie que périssent les œufs fécondés avec du sperme trop concentré, si l’on ne prend pas la précaution de les laver à grande eau aussitôt après la pénétration. Pour opérer la fécondation artificielle d’œufs placés dans une très-petite quantité d’eau, l’on devra diluer au second degré le liquide opalin ci-dessus décrit. Cette mesure est indispensable pour l’observation directe des phénomènes de pénétration.

La difficulté que j’éprouvai à voir directement sous le microscope la réunion du zoosperme à l’ovule, dans des conditions normales, fut si grande que je ne pus y réussir qu’après des mois d’efforts infructenx.

KECm-.RCHKS SIH! LA l'ÈCONI) ATION

Aussi lie puis-je m’étounee lie;uicou|) lorsque je in’;i perçois par une élude soigneuse de loule la Itihliograpliie du sujet, qu’à une ou deux exceptions près, et ces exceptions memes sont douteuses, personne n’a encore observé avant moi cette pénétration physiologique chez aucun animal.

.le ne fatiguerai pas le lecteur par le récit de tous mes mécomptes et me contenterai de décrire la seule méthode qui m’ait réussi. Et d’aliord, il faut être muni d’nn compresseur à lames parallèles; cet instrument m’est absolument indispensable, et sans. lui je n’aurais certes jamais atteint mon but. Je suppose connu le modèle dont je me suis servi et que j’ai déjà décrit et figuré ailleurs (Gegenbaur, Morphol. Jahrbucli, t. lî, p, 440, 1876). L’avantage de cet instrument est de permettre au travailleur de régler à volonté la disfance du couvre-objet et du porte-objet, tout en maintenant entre ces deux lames un parallélisme jiarfait. L’on peut donc amincir la goutte d’eau, dans laquelle se trouvent les œufs à étudier, au point de les rendre accessibles aux [tins forts grossissements, et cela sans les comprimer le moins du monde, l^a goutte d’eau s’oxygène par les bords, ce qui n’est pas le cas dans une simple cellule de verre, et elle ne se concentre que lentement, à l’inverse de ce qui se passe dans une préparation ordinaire, où le couvre-objet est maintenu à distance par de petits corps interposés. Enlln le plus grand avantage se révèle dans la fécondation artificielle sous le microscope. Je n’ai jamais réussi à observer la pénétration lorsque je plaçais, l’une à côté de l’autre, les deux gouttes d’eau renfermant le sperme et les œufs, pour les faire toucher par leurs bords au moment de l’Observation; mais je réussis, pour ainsi dire à chaque essai, en plaçant la goutte qui renferme le sperme très-dilué sur le porie-ohjet et celle ([iii contient les ovules murs contre le couvreobjet du compresseur. Les deux gouttes étant ainsi disposées, je place l’instrument sous le microscope que j’ajuste et je n’ai plus qu’à tourner la vis du compresseur pour amener le mélange des deux gouttes superposées et observer à l’instant même. Les ovules, plus denses que l’eau, tombent à travers le liquide, les zoospermes s’élèvent en nageant et la rencontre a lieu dans des conditions à peu près normales. Quand une

ET LE COMMENCEMENT DE l’HÈNOGÈNIE.

fois l’on connaîl de vue les phases de la pénélraiion,ron n’a pas de peine à les retrouver dans des essais faits dans des conditions moins favorables. Ainsi je les ai revues dans des fécondations faites avec du sperme trop épais et je n’ai pas négligé de m’assurer que, dans ce cas comme dans le premier, il ne pénètre jamais qu’un zoosperme par œuf.

Mais à côté de l’observation directe, il est indispensable de placer celle des mêmes phases fixées à l’aide des réactifs. L’on peut ainsi examiner à son aise et conserver pour la démonstration ces phénomènes si délicats et si passagers; on peut les rendre visibles chez des œufs fécondés dans les conditions que présente la nature ou dans les conditions les plus variées et montrer que les processus importants restent, dans tous ces cas, les mêmes que ceux que l’on a observés directement sur te vivant. Les acides acétique et picrique m’ont rendu peu de services dans l’étude de ces stades chez les Étoiles de mer et les Oursins. L’acide osmique, suivi de bichromate de potasse ou mieux de earrnin de Beale, rn’a donné les images très-exactement décrites par O. Hertwig, mais rien de plus. La seule méthode qui m’ait parfaitement réussi consiste à plonger les œufs, d’abord dans de l’eau de mer additionnée de deux pour eent d’acide acétique cristallisable, ensuite dans de l’acide osmique à un pour mille, et enfin dans un carmin ammoniacal additionné d’alcool et d’un peu de glycérine. Dans l’acide acétique les œufs ne restent que deux ou trois minutes, trois ou quatre minutes dans l’acide osmique, et quelques heures dans le carmin. Ils sont ensuite conservés dans de la glycérine étendue d’alcool et d’eau, avec une petite quantité d’une substance antiseptique. J’indiquerai plus loin les effets de ees réactions.

Dans le premier chapitre, nous avons laissé les (Y Asterias glacialis

au point qu’ils atteignent après quatre heures environ de séjour dans l’eau de mer (en janvier par une température de 12 à 15" centigr.). Le vitellus estdépourvu de membrane, mais sa surface est formée d’une couche enveloppante; dans son intérieur, il ne présente qu’un pronucléus femelle qui se trouve près du centre du vitellus, mais du côté des globules polaires (voyez fig. 8).A la surface se trouvent ces derniers globules, sou-

RFXHERCHES SUR EA FÉCONDATION

Fig. 8.

L’ovule entier, sans son enveloppe, avec ses globules polaires , retenus par une mince pellicule, et son pronucléus femelle achevant sa croissance et encore entouré do stries radiaircs peu nettes. (Euf vivant.

vent entourés déjà trmie membrane propre. Enrm le vitellus et les globules sont enfermés étroitement dans la couche muqueuse ou l’oolemme pellucide. Faisons sous le microscope la fécondalion artificielle de ces ovules parfaitement mûrs. Nous verrons bientôt le champ du microscope parcouru par les zoospermes qui avancent lentement et droit devant eux üi'àce aux mouvements ondulatoires de leur cil vibratile. Toutes les fois que le corps du zoosperme rencontre la couche muqueuse d’un œuf, il reste pris et les mouvements continus de sa queue tendent à l’y faire enfoncer; il est bien rare qu’il se dégage pour continuer sa course. L’on ne peut observer avec attention la manière dont se comportent ces éléments males, sans garder la conviction que leurs mouvements sont tout à fait automatiques; la dilférence qu’ils présentent sous ce rapport avec le moindre infusoire est très-frappante.

La plupart des zoospermes qui s’accolent à roolemme pellucide ne pénètrent que peu dans son épaisseur et restent près de sa surface. Tous s’implantent perpendiculairement à la surface du vitellus grâce à la structure particulière de la couche mucilagineuse. Quelques-uns réussissent à se frayer peu à peu un chemin, mais leur nombre est très-restreint

ET LE COMMENCEMENT DE l'hÈNOGÉNIE.

el leur marche Irès-lente. L’on n’a donc pas de peine, si l’on opère un peu vile, à Irouver un œuf qui présente au bord un zoosperme profondément engagé dans l’oolemme, tandis que les autres sont encore voisins de la surface. Suivons ce zoosperme et nous verrons que sa marche tend plutôt à se ralentir à mesure qu’il avance dans celle couche molle. Mais le voisinage du zoosperme exerce bientôt sur le vitellus une action, sur la nature de laquelle je m’abstiens pour le moment de me prononcer. Nous voyons la couche hyaline superficielle se soulever en forme de cône plus ou moins effilé et venir ainsi à la l enconlre du zoosperrae le plus rapproché. Je donne à cette apophyse hyaline le nom de cône (F allr action. Ce cône présente des formes très-diverses. Tantôt il est mince el allongé en forme d’aiguille ou de languette (PI. III, fig. 1 a el 2 h. Sa), tantôt il est large et relativement court (PI. III, fig. 3, Sa). Celte forme varie surtout suivant la rapidité de progression du zoosperme. Au moment de sa première apparition, ce cône se présente toujours sous la forme d’une éminence mamelonnaire ou conique à hase large. Si le zoosperme avance lentement, cette proéminence s’allongera jusqu’à ce qu’elle l’ait rencontré (fig. la); elle atteindra en longueur jusqu’à la moitié du diamètre de la couche mucilagineuse. Si le zoosperme se rapproche rapidement du vitellus, il touchera le sommet du cône avant que celui-ci ait eu le temps de s’allonger beaucoup (fig. 3c), car aussitôt que le contact est établi, le cône cesse de s’étirer el commence au contraire à rentrer dans le vitellus. Ainsi s’explique la relation qui existe entre la marche du zoosperme et la forme du cône.

Une fois le contact établi, le gros bout du spermatozoïde se trouve réuni au vitellus par une traînée continue de sarcode, el celte union n’est plus interrompue que dans des cas très-exceptionnels et pathologiques. Le corps de l’élément mâle commence à changer de contours; il diminue de volume (PI. III, fig. Ib) et sa forme régulièrement ovoïde devient variable. Souvent il présente l’aspect d’une crosse (fig. 1 c, Zc) ou d’une gourde (fig. 3 c et 4a, Zc), d’autres fois celle d’une larme ou d’un fuseau. Ces formes sont changeantes, mais ne subissent pas ces allé-

|{KCHEUCHES SlUl !,A FÉCONDATION

râlions nipides que l’on désigne du nom de mouvenienis amiboïdes. A mesure que le cône se raccourcit, le corps du zoosperme diminue de volume el perd en même temps son pouvoir de réfraction. 11 devient toujours plus semblable à la substance pâle du cône dans laquelle il semble se dissoudre (PI. III, fig. 4c, Z). Cependant celle dissolution n’est que partielle; le cône est presque toujours terminé par un rentlemenl plus ou moins accentué, dernier reste du corps du spermatozoïde (tig. 1 d el 4c). Le rentlemenl est surmonté par la queue déjà réduite de volume et de longueur el devenue plus pâle (PI. 1!I, fig. ! d et 5 b, zq). Parfois la queue ou cil vibralile semble surmonter directement le cône aminci el présente des renflements arrangés en chapelet. Il ne semble pas que ce cil perde de la substance par décomposition, aucun fait observé ne m’autorise à le croire. I! est donc plus probable qu’il rentre petit à petit et se fond à mesure dans le cône, en sorte que son extrémité effilée reste seule sans changement. Celle-ci semble devenir un peu plus courte, plus large et plus pâle, au moment où le cône d’attraction avec le gros bout du zoosperme est presqu’enlièrement rentré dans le vilellus. Il est rare que le cône disparaisse entièrement; le plus souvent le sommet pointu, extrêmement pâle, de cette apophyse molle persiste au-dessus du niveau de la surface (PI. III, fig. 4 c) et devient aussitôt le point de départ d’une nouvelle formation. Le reste de la queue du zoosperme s’élargit â vue d’œil, en commençant par la base, et ainsi se forme un nouveau cône auquel je donne le nom de cône d’exsudalion (PI. III, fig. 5 c el 5d, Se). L’extrémité de la queue du zoosperme et le sommet du cône d’attraction sont le point de départ de ce cône exsudé; mais son mode de croissance indique clairement que la plus grande partie de sa substance doit provenir, par expulsion, du vitellus. La base de celle dernière excroissance continue â s’élargir, mais elle tranche nettement sur la surface du vitellus qui n’est pas soulevée autour de cette base. Ses bords présentent des languettes dirigées en arrière comme les barbes d’une plume (PI. III, fig. 4 d, Sc). Ces languettes sont aussi pâles que le cône lui-même; elles changent constamment de forme. Les premières languettes se dispersent et d’au-

ET LE COMMENCEMENT ÜE l’HÈNOGÈNIE. 93

très plus nombreuses apparaissent à leur place. Pemlant ce temps le cône aussi passe successivement par une série de formes diverses; puis il pâlit de plus en plus et cesse bientôt d’être visible. Tous ces phénomènes se succèdent avec une rapidité telle qu’il est bien difficile d’en retenir les phases à l’aide du crayon ou de la plume. Aussi les séries très-nombreuses d’esquisses et de descriptions que je possède sont-elles presque toutes assez incomplètes. Celles qui présentent le plus de suite ont été reproduites sur la planche III.

Tous ces phénomènes se suivent avec une extrême rapidité. Ils commencent et se terminent dans l’espace de peu de minutes. La phase qui précède le contact du cône d’attraction avec le zoosperme peut se prolonger quelques minutes, mais une fois la communication établie, les événements s’accélèrent de plus en plus. Le cône d’exsudation peut aussi persister quelques minutes. Ce sont donc le début et la fin de l’acte qui sont les plus faciles à observer.

Chez l’œuf mûr de l’Astérie, l’orientation du vitellus est nettement indiquée par la position des globules polaires. Ces corpuscules désignent au premier coup d’œJl le pôle formatif; il est donc facile de déterminer la position du point de pénétration par rapport à l’axe de l’œuf. Cette position est loin d’être constante. La plupart des spermatozoïdes entrent il est vrai par l’hémisphère nutritif et même, le plus souvent, dans le voisinage du pôle opposé à celui qu’occupent lessphérules de rebut; mais l’on voit aussi trop souvent le corpuscule mâle atteindre le vitellus dans son hémisphère formatif et jusque dans le voisinage immédiat des globules polaires (PL- III, fig. 4) pour pouvoir établir une règle à cet égard.

Pour simplifier la description, j’ai réservé jusqu’à présent toute une série de phénomènes importants qui sont simultanés avec ceux que je viens de décrire. Le cône d’attraction, au moment où il apparaît et grandit, semble être en continuité de substance avec celte couche hyaline de sarcode qui occupe la surface du vitellus et que j’ai déjà décrite sous le nom de couche enveloppante (PI. III, fig 1 a, Ev). Le contact entre le sommet du cône et le corps du spermatozoïde est à peine établi depuis

HECIIEUCIIES SUE LA EÈCÜ.XDATiON

quelques iiislauls, que déjà nous voyojis la couelie euveloppaule prendre un eoulour extérieur plus foneé, auquel s’ajoute maintenant un contour inteine bien liancbé (Fig. la^ Ev). La couche enveloppante est devenue une membrane et nous la désignerons désoi mais de ce nom. Audessous de cette membrane se trouve le vitellus, dépourvu de couche enveloppante^ et granuleux jusqu’au bord. Puis il se montre un es[)ace, d’abord très-mince, entre la surface du vitellus et la membrane vitelline et cela sur une petite étendue, autour de la base du cône d’allraclion (PI. III, lig. 1 b et 4a). Pendant ce temps, le cône se raccourcit et reste évidemment en continuité avec le vitellus à traveis la membrane. Celle-ci doit donc présenter en cet endroit une solution de continuité, une petite ouverture, un micropyle d’occasion, si l’on veut; je n’ai pas réussi à voir directement celte ouverture par le microscope, mais son existence me paraît mise hors de doute par la continuité bien évidente du cône. Autour de celui-ci, la membrane présente une dépression en forme de lasse ou de cratère (PI. III, fig. 1 b et 4a, Am), dépression qui s’expliquerait difficilement si l’on n’admettait l’existence d’une ouverture dans son centre. L’enfoncement n’est pas produit par un amincissement de la membrane en cet endroit; la mendjrane présente partout la même épaisseur, elle est seulement infléchie.

Au moment on un espace commence à se montrer sous la membrane vitelline dans le voisinage du point de fécondation, la dilïérencialion de la membrane s’étend déjà tout autour du vitellus. Elle n’est pas encore soulevée, mais elle présente déjà un contour intérieur bien net, même du côté opposé à celui où la pénétration a lieu. Dès cet instant l’œuf est inaccessible à tout autre zoosperme qui viendrait à loucher la membrane. Le vitellus ne peut plus fournir de ces prolongements nommés cône d’attraction, et comme le zoospeime ne pénètre guère, chez Aslerias, sans l’aide de celle excroissance, l’on comprend aisément que la pénétration d’un second élément male est devenue impossible. Enfin si l’on se rappelle l’extrême rapidité de ces processus et si l’on lient compté du fait que c’est le zoosperme le plus rapproché du vitellus, celui qui avançait

ET LE COMMENCEMENT DE F.’hÉNOGÉNIE.

le plus rapidement à travers l’oolemme qui est entré en communication avec te sarcode vilellin, l’on s’expliquera aisément comment il se fait qu’il ne pénètre jamais qu’un seul zoosperme dans un vitellus normal. Je donnerai plus loin les preuves de la justesse de cetle dernière assertion.

L’espace qui s’est produit entre la membrane et le vitellus gagne de proche en proche jusqu’au pôle opposé au point de fécondation. La membrane se trouve entièrement soulevée vers le moment où le cône d’attraction achève de rentrer et se voit remplacé par le cône exsudé (PI. III, lig. 1 d et 5d); dans cette phase aussi, le cratère de la membrane devient moins profond et tend à s’effacer (PI. III, fig. 1 d, A'm) La distance entre la membrane et le vitellus augmente ensuite d’une manière uniforme pendant quelques minules; l’espace compris entre les deux est occupé par une substance transparente qui ne peut être un liquide, mais qui doit être une gelée très-claire; si c’était un liquide, le vitellus se déplacerait et l’espace ne pourrait rester d’une épaisseur uniforme tout le tour. Celle substance provient-elle uniquement d’une sécrétion de la surface du vitellus, ou bien y a-t-il en même temps imbibilion à travers la membrane vitelline? Si elle provenait uniquement du vitellus, cedernierdevrait subir une diminution de volume. La mensuration exacte du diamètre du vitellus présente de grandes ditficnltés, h cause des changements de forme qu’il subit pendant le soulèvement de la membrane; aussi ne suis-je pas ariivé à des résultats bien concluants. Je puis seulement dire que, si le vitellus diminue de volume, ce ne peut-être que d’une quantité bien faible. Presque tons les auteurs qui traitent de ce phénomène, chez Asterias ei chez d’autres animaux, parlent d’un retrait du vitellus et non pas d’un soulèvement de la membrane. Sans oser nier absolument le retrait en ce qui concerne Às(enas,ie crois m’être assuré que le vitellus avec sa membrane présente un diamètre supérieur tà celui qu’il possédaitavant la formation de cette membrane. Je parlerai donc du soulèvement de cette dernière et non d’un retrait qui me paraît douteux.

Au moment où le cône d’exsudation va en croissant, la base du cône est visible en dedans de la membiane vitelline, tandis que sa partie ex-

(erne se trouve en dehors de celle membrane. Il doit y avoir encore conlinuilé entre ces deux parties du cône et conséquemment rouverlure de la membrane vitelline doit encore exister. Plus tard, lorsque le cône exsud é se décompose et disparaît par dillfusion, il est possible que l’ouverture n’existe plus; le ci alère a certainement disparu. Après la dispersion complète du cône d’exsudation, il n’est plus possible de trouver la moindre trace d’un orifice, même si l’on place par une rotation de l’œuf, la région dont il s’agit de manière à pouvoir la regarder de face.

Après avoir passé en revue les phénomènes qui se voient la surface nous devons encore consacrer quelques mots (à ceux que présente le vilellus lui-même. Ce dernier ne subit aucun changement jusqu’au moment OH le cône d’attraction rentre à travers le cratère de la membrane soulevée. Au-dessous de cet enfoncement l’on aperçoit une autre dépression, généralement peu accentuée, de la surface du vitellus. Au milieu de la dépression surgit le cône qui renferme le zoosperme; tandis que ses bords se soulèvent en une sorte de petit cratère (PI. III, fig. 2i, Kv). Audessous de ce point, le vitellus présente une petite tache claire et dépourvue de granulations (PI. llî, fig. 5d, v(^f). C’est l’origine du pronucléus mâle. Le cratère delà surface du vitellus est encore visible lorsque la membrane vitelline est entièrement soulevée, mais avant que le pronucléus ne soit constitué. Comme ce cratère est liès-facile à voir, il fournil un moyen de s’assurer que chez les œufs normalement fécondés il n’y a jamais qu’un seul point de fécondation et il permet en outre de contrôler rapidement sur un grand nombre d’œufs la position de ce point comparée à celle des globules polaires. L’on peut ainsi s’assurer que, si la pénétration du spermatozoïde se fait, dans la majorité des cas, dans l’hémisphère opposé à celui que surmontent les globules, celle règle n’est pas sans exceptions et que souvent le cratère se trouve jusque dans le voisinage immédiat de ces globules (PI. llI, fig. 4, Cr).

Je n’ai parlé jusqu’ici que de la fécondation d’œufs parfaitement mûrs et chez lesquels les globules polaires étaient constitués au moment de l’imprégnation. Il peut cependant arriver que des œufs bien frais, fécon-

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÉNOGÉNIE. 97

dés au moment où la première sphérule de rebut va se montrer, suivent ensuite un développement normal. Ces œufs diffèrent de ceux que j’ai décrits jusqu’ici par le fait que les globules polaires, au lieu de se trouver en dehors de la membrane vitelline restent accolés à la surface du vitellus (voyez fig. 9 et 10).

Fig. y. Fig. 10.

Œufs normaux à^Asterias glacialis arrivés à la phase où se montre le premier amphiaster île frai tionnement. L’un des deux (fig. 9) a été fécondé aprh la formation des sphérules de rebut et présente ces sphérules en dehors de la membrane vitelline, recouvertes seulement par l’oolemme pellucide ; l’autre (fig. 10) fécondé avant la sortie des globules polaires, montre ces globules en dedans de la membrane et appliqués contre la surface du vitellus. Préparations à l’acide picriqiie. Grossissement

Rien ne peut mieux démontrer le fait important que la membrane vitelline prend naissance seulement au moment de la fécondation, car s’il en était autrement, les sphérules de rebut se trouveraient toujours en dedans de la membrane.

La description détaillée que je viens de donner de la pénétration de l’élément male dans le vitellus chez Asterias me permettra d’être plus bref au sujet des mêmes phénomènes chez l’Oursin. Dans cette famille, la couche mucilagineuse est plus mince que chez les Astéries; le vitellus est aussi de dimensions plus restreintes, comparées à celles du zoosperme.

lŒCHEUCMES SUE LA FÉCONDATION

Les élémenls mâles m’ont paru présenter une locomotion plus énergique et plus rapide. Leur corps a la forme d’un cône régulier, avec la queue implantée au milieu de la base du cône (PI. V, fig. 9a, Z). De toutes ces particularités il résulte que le zoosperme traverse roolemme bien plus facilement et plus rapidement que cliez Aslerias et qu’il arrive en peu d’instants à loucher le vilellus. Celui-ci ne se soulève pas pour envoyer une apophyse de sarcode à la rencontre du spermatozoïde; il reste lisse, et c’est dans sa couche enveloppante unie que l’élément nuïle vient implanter la pointe de sa tète conique (PI. V, hg. 9b, Zc). Nous avons vu que chez Aslerias le cône d’attraction est d’autant plus petit que le zoosperme s’avance plus vite. Le cas des Oursins est donc un extrême que des transitions relient à l’autre extrême, souvent présenté par les œufs d’Éloiles de mer. Ces dilïérences ne sont donc pas tranchées et s’expliquent aisément d’après les remarques que j’ai faites sur l’Astérie.

Aussitôt que le contact a lieu, la membrane vitelline commence à se soulever avec une rapidité et une énergie bien plus grandes que chez l’Lloile de mer. Il ne se forme point d’enfoncement ni de cralèi’e dans celle membrane, qui du premier coup se gonlle au point de passer en dehors du zoosperme implanté. Elle doit donc présenter une ouverlui'e qui correspond au corps de ce spermatozoïde et qui doit le laisser passer lorsque la membrane se soulève. S’il n’en était pas ainsi, la membrane repousserait devant elle l’élément mâle et le séparerait du vilellus, ce que je n’ai jamais observé. Du reste, l’existence de celle ouverture est démontrée, encore après le soulèvement de la membrane, par la queue du zoosperme qui passe droite et sans interruption à travers la membrane vitelline; celle-ci doit donc nécessairement être perforée en cet endroit (PI. V, tig. 10 a, Zq). Je n’ai jamais pu voir directement au microscope, ni en ce moment ni plus lard, ce pore dont l’existence me paraît pourtant démontrée.

Ën pénétrant dans le vilellus, le zoosperme change peu de forme; il entre progressivement par l’action du sarcode vilellin et non par l’impulsion de sa queue qui s’est raccourcie et a cessé d’exécuter ses mouvements ondulatoires. Cependant, la membrane vitelline continue

ET LE COMMENCEMENT DE l’hÈNOGÈNIE.

à se délaeher. Elle est différenciée sur (oui le pourtour du vitellus à peu près à l’instant où le corps du zoosperme est à moitié enfoncé dans la substance vitelline (PI. V, fig. 10a, Mv'), et son soulèvement a gagné tout le tour de l’œuf vers le moment où te corps du spermatozoaire a pénétré tout entier (PI. V, fig. 10b, Mv').

Ap rès la différenciation de celte membrane, le vitellus ne se montre pas uniformément granuleux jusqu’à son extrême bord comme chez Asterias. Sa couche superficielle est hyaline et constitue une couche enveloppante comme celle de l’ovule mal mûr (PI. V, fig. 9c-9f, £v"). Cette couche se comporte à la façon d’une substance molle. En effet nous la voyons former, autourdu zoosperme qui pénètre, un petit bourrelet entourant une dépression centrale (PI. V, fig. 9d, Kv), bref un petit cratère semblable à celui que présente, chez Asterias, la surface du vitellus au-dessous de la membrane soulevée. Cette dépression à bords relevés ne tarde pas à disparaître, tandis qu’au point de fécondation apparaît une excroissance de forme très-irrégulière (PI. V, fig. 9f et 10b, Se), extrêmement pâle et très-mobile. Celte exsudation du vitellus ne vient pas toujours s’ajouter aux restes de la queue du zoosperme, car celle-ci disparaît souvent sans laisser de vestiges; aussi sa foi’me n’est-elle pas droite et effilée comme chez Asterias, mais plus généralement arrondie au sommet et quelquefois déjetée de côté. L’excroissance dont je parle n’a donc pas toujours la forme d’un cône et rarement celle d’un cône régulier; je crois néanmoins devoir lui donner le même nom que pour l’Etoile de mer, celui de cône d’exsudation. Ce cône change continuellement de forme (PI. V, fig. 9g, 9h et 10c, *Se), avec assez de rapidité pour que ces mouvements soient directement visibles. Je ne sais s’il faut attribuer ce phénomène à des contractions amiboïdes ou s’il ne s’agit pas plutôt d’une éruption continue d’une substance presque liquide qui se disperserait à mesure sur les bords? Quoi qu’il en soit, ce cône d’exsudation persiste quelques minutes après que l’imprégnation est accomplie et permet de reconnaître que, chez des œufs fécondés normalement, il n’y a pas un exemplaire sur cent qui ail reçu plus d’un zoosperme.