Comptes rendus, t. iO^, p

avec une trace d'essence de moutarde destinée à prévenir son altération, et jeté sur un filtre. Je me suis toujours arrangé de manière à amener le liquide filtré, avec les eaux de lavage du filtre, à occuper le même volume que le liquide de culture auquel la mucédinée broyée avait été empruntée. On recueille ainsi dans ce liquide la presque totalité de la sucrase des cellules, et c'est là le critérium qui permet d'apprécier la valeur du procédé. Si, en effet, on rajoute de l'eau sur le filtre, on recueille dans le liquide qui passe, après cette opération qui, à cause de la lenteur de la filtralion, peut être considérée comme une véritable macération et non comme un simple lavage, une quantité de sucrase dépassant rarement un dixième de la quantité renfermée dans le premier liquide; cette seconde quantité doit être ajoutée à la première dans l'évaluation de la sucrase totale. Après cette seconde filtration, la quantité de sucrase qui reste dans la mucédinée est absolument négligeable.

Le liquide ainsi recueilli a une acidité très faible. Cette constatation nous fait voir que le contenu des cellule» a, du moins en certains points, une réaction acide, et que cette réaction est plus que suffisante pour neutraliser l'alcalinité des parties alcaliues du protoplasma. En ces points acides, les conditions favorables à rinterversion par la sucrase et à sa conservation se trouvent réalisées.

Le liquide de broyage possède de plus une propriété sur laquelle j'aurai l'occasion de revenir plus tard: il présente les réactions de l'albumine, en particulier la propriété de donner un coagulum sous l'influence de la chaleur, mais le volume de ce coagulum semble devenir de moins en moins considérable à mesure que la plante avance en âge. J'aurai à mettre plus tard ce fait en relation avec un autre fait résultant d'expériences qui ne sont pas encore assez avancées pour que je les publie actuellement : c'est la plante toute jeune qui renferme le plus d'azote organique; sa teneur en azote va en diminuant notablement à mesure que son développement se poursuit.

Indépendamment de ces éléments et de la sucrase que nous étudierons tout à l'heure, le liquide de broyage de l'Aspergillus renferme, comme on pouvait s'y attendre, du sucre interverti. Il y a un fait plus inattendu, que je ne fais que signaler eu passant; ce liquide renferme du saccharose difficilement dosable

Jt cause de la présence de matériaux divers, entre autres de matières albuminoïdes. Mais Faction du tartrate neutre de potasse, auquel je reviens comme je Tannonçais plus haut, permet de vérifier Texactitude de ce fait. Ce sel ne permet, en effet, qu'à un .petit nombre d'éléments de se diffuser hors des cellules, et lorsque la plante est restée pendant quelques heures en contact avec lui, il arrive souvent qu'on a un liquide à sucrase non réducteur, mais qui prend un pouvoir réducteur énergique si on l'abandonne pendant quelques heures à la, température de 56^, indice certain de la présence du saccharose. Il nous resterait à voir si ce fait se produit à toutes les périodes du développement de la mucédinée ; nous ne sommes pas encore en mesuré d'examiner ce point. Mais si nous rapprochons le fait que je yiens de signaler de ceux qui vont suivre, nous ne pouvons expliquer celte présence simultanée de sucrase et de sucre non interverti dans les cellules de TAspergillus qu'en admettant, soit la ItDcalisation de la sucrase dans certaines cellules, soit la localisation en certains points de la cellule des conditions favorables à rinterversion.

Après avoir examiné ces quelques propriétés du liquide de broyuge de TAspergillus, tournons-nous du côté de la sucrase, et cherchons à voir à quelle époque et dans quelles proportions elle apparaît dans Tinlérieur des cellules. J'ai mis eu train, pour cette étude, 10 cultures d'Aspergillus aussi identiques que possible, dans des fioles à fond plat de 250*"% renfermant chacune 100°*^ de liquide de Aaulin stérilisé par filtration. Cha([ue fiole renferme :

Saccharose 48^44

Acidfr tartrique libre 02%170

Au bout de 40 heures, je relire deux fioles de l'étuve, et à a partir de ce moment, j'en relire deux nouvelles de 24 heures en 24 heures. Les deux fioles retirées de l'étuve renferment des 0uttures identiques; leur identité est attestée par ce fait que la teneur en sucre, interverti ou non, des deux liquides de culture et leur acidité sont exactement les mêmes. L'une des fioles me 9ert à déterminer le poids du végétal que j'étudie dans l'autre ça le broyant. Voici les résultats de cette étude; en même temps queleïs chiffres relatifs à la sucrase, je donne tous les renseignepaenls qpe j'ai; déjà indiqués à l'occasion d'autres expériences,.

parce qu'ici Texamen a eu lieu régulièrement et à des périodes plus rapprochées de l'origine de la culture, de sorte que ces nouvelles données complètent, dans une certaine mesure, les anciennes.

urée.

Sacch.

S. int.

Sucre cons.

Acidité.

Sucrase du

Sucrase

Poids de plante

restants.

liquide.

des cellules

gr.

gr-

gr-

gr.

gr-

D'autres expériences, que j'omets pour ne pas allonger inutilement cet exposé, conduisent à des conclusions tout à fait comparables à celles que nous avons maintenant à mettre en lumière ; je n'insiste que sur les faits relatifs à la sucrase; les autres nous étant déjà suffisamment connus.

. Nous voyons nettement que la quantité maximum de sucrase présente dans les cellules apparaît dès l'origine, dès le premier développement de la mucédinée. Cette quantité va ensuite en décroissant lentement et assez régulièrement dans ces cellules, en même temps qu'il en passe au dehors des quantités de pluà en plus grandes. Mais il faut remarquer que la somme de la sucrase extérieure et intérieure n'atteint pas le chiffre initial, et va, au contraire, en diminuant assez régulièrement, 3auf variation de quelques unités. Quel que soit le mécanisme de cette décroissance, qui correspond peut-être à une destruction partielle de sucrase incomplètement compensée par une for*mation nouvelle, nous nous trovivons en présence de ce fait curieux que toute la sucrase que la plante pourra élaborer se trouve, comme quantité, formée dès Torigine du développement. Il est important de constater en outre que les variations de la somme de la sucrase du liquide et des cellules, qui sont asse2l faibles, ne suivent nullement les variations de poids de la plante, qui sont considérables. Ainsi cette somme qui était 60 à l'origine de la culture et correspondait à un. poids de plante de 0^^65, tombe à 50, alors que le poids de la plante s'élève à 1^^2o.

La constatation de ce fait nouveau a d'autant plus d'importance qu'elle sert, pour ainsi dire, de clef à tous les phénO- ^nèoes complexes que nous avons présentés jusqu'ici. La forma-

tion de la sucrase dans les cellules se présente à nous comme suivant une marche toute différente, inverse de celle que nous avons observée pour son apparition dans le liquide de culture, et la contradiction apparente que nous avons notée, lorsque nous ayons étudié ce dernier phénomène, entre la formation abondante de diastase et l'absence de l'élément qu'elle doit transformer, ne subsiste plus. Tout ce qui se*passe dans le liquide de culture relativement à cette apparition de la sucrase doit se résumer pour nous en un phénomène de diffusion, et si nous nous reportons à ce que nous avons vu au sujet de la consommation des réserves nutritives, la diffusion nous apparaît comme devenant de plus en plus facile à mesure que les éléments présents dans rintérieur des cellules vont en disparaissant.

On voit, en somme, quelle complexité présentent tous ces phénomènes, et combien il faut- être prudent dans leur interprétation. Les faits que nous avons cherché à mettre en lumière fions montrent en particulier qu'on ne doit pas se hâter de conclure qu'un être ne fabrique pas de sucrase parce qu'on n'en trouve pas dans son liquide de culture; en effet, même pour l'Aspergillus, qui peut être considéré comme un producteur puissant de sucrase, au moment où le liquide de culture n'en renferme que des traces insignifiantes, les cellules en contiennent des quantités considérables si on les compare au poids de sucre qu'elles ont à intervertir. Une faudrait pas conclure davantage de ce que la sucrase apparaît plus tard en quantité notable dans le liquide, que cette apparition coïncide avec celle d'une fonction diasiasigène nouvelle; il pourra même se faire qu'à ce moment les cellules renferment beaucoup moins de diastase qu'à l'origine.

Nous pouvonsmaintenant essayer d'étendre à d'autres espèces les notions que nous venons d'établir pour TAspergillus, et qu'on peut résumer dans les conclusions suivantes. Les produits qu'on trouve dans le liquide de culture d'un organisme peuvent ne donner qu'une idée très éloignée de ce qui se passe dans la cellule elle-même ; comme c'est dans la cellule que la matière alimentaire devient assimilable, c'est là que doivent être localisées les diastases destinées à opérer cette transformation et c'est là qu'il faut s'efforcer d'aller les chercher. Sans doute, le pro-

blême que nous nous étions proposé de résoudre au début de ces recherches, à savoir de suivre la marche de la sécrétion d'une diastase par un organisme déterminé, devient de plus en plus délicat; mais il nous semble que si nous n'avons pas encore h notre disposition tous les moyens à mettre en œuvre pour atteindre notre but, la connaissance du point où il faut s'appliquer h chercher ces dîastases nous rapproche cependant de la solution.