HORS
(s'assurer préalablement de leur parfaite agglutinabilité. Mettre à l’étuve à 37°. Après 48 heures, les cultures sont lavées au moyen de la solution saline, en versant 1 cc. par tube de gélose (soit environ 7 à 8 cc. pour les flacons de Roux). On laisse au contact pendant un quart d'heure à la température du laboratoire, puis on agite légèrement et on recueille les émulsions.
Celles-ci, composées donc de trois souches différentes, sont mélangées puis filtrées légèrement mais soigneusement sur ouate hydrophile.
Ensuite il importe de contrôler la richesse en germes, car la concentration de l’antigène est un des facteurs importants de la réaction.
Leynen et WizLems ont porté leur choix sur l’émulsion bactérienne dont l’opacite est chiffrée par 8 "A à l’opacimètre de GATES.
La dilution éventuelle de l’antigène se fera avec la même solution saline.
Après ces opérations on dispose d’une émulsion d'aspect laiteux, très riche en germes, mais qui doit être exempte de flocons. Nous conseillons d'en diluer une petite partie au 1/3 avant l'emploi et d’en contrôler l’homogénéité à l’agglutinoscope. Cet antigène, bien que placé en glacière pendant la nuit, est remplacé toutes les semaines par de l’antigène nouveau.
Il arrive qu'après trois ou quatre jours le contrôle à l’agglutination y décèle de petits grumeaux. On agitera alors vigoureusement le flacon et on refiltrera le contenu sur une petite épaisseur de ouate hydrophile.
NU — DisPOsITIONS A PRENDRE AVANT LA RÉACTION
Les tubes contenant les échantillons de sang sont tous centrifugés à 5.000 tours pendant cinq minutes, à l’aide d’un centrifugeur électrique.
Cette centrifugation pourrait être supprimée pour les tubes dont le caillot bien rétracté a exprimé un sérum parfaitement limpide en quantité suffisante, c'est rarement le cas en raison de la faible quantité de sang dont on dispose habituellement.
Il importe donc que le sérum à examiner soit bien clair; car s'il peut être légèrement teinté par l’hémolyse, il ne peut en aucune façon contenir des traces de globules rouges en suspension.
