CHAPITRE III

Étude morphologique des leucocytes de la paroi intestinale.

Si l’on examine avec un fort grossissement la coupe de l'intestin grêle d'un cobaye, on est frappé de l'extrême variété de formes qu'y présentent les leucocytes et de leur abondance à tous les niveaux de la paroi intestinale : cellules rondes à gros noyaux et à protoplasma peu abondant, leucocytes mononucléaires proprement dits dans la muqueuse, la sous-muqueuse et le tissu conjonctif sous-séreux ; dans les culs-de-sac terminaux des chylifères centraux, éléments mononucléaires géants ; dans les vaisseaux sanguins, entre les cellules de l’épithélium intestinal, leucocytes polynucléaires : éléments à granulations basophiles ou acidophiles dans les parties profondes de la muqueuse ; sans compter une foule de formes de passage entre ces divers types cellulaires.

Comme il sera souvent question, au cours de ce travail, des leucocytes de la paroi intestinale, que, d'autre part, nous avons eu la bonne fortune de pouvoir élucider l’origine de certains d’entre eux (tels les éléments à granulations basophiles, Mastzellen d’'Ehrlich, qui abondent dans l'intestin cholérique chez l’homme), nous allons passer en revue les différentes formes de cellules migratrices que l'on rencontre dans la paroi intestinale de l'homme et du cobaye.

Ce sont d’abord, des éléments arrondis, de 4 à 8 u de diamètre, à noyau prenant uniformément et très énergiquement les couleurs basiques, à protoplasma très peu abondant et d'une colorabilité faible. Ce sont les lymphocytes des auteurs allemands. On les trouve répandus çà et là dans les mailles du tissu conjonctif de la muqueuse et de la sous-muqueuse, dans les vaisseaux sanguins, dans le tissu conjonctif sous-séreux ; mais c’est dans les follicules clos qu'on les rencontre en quantité immense et souvent en voie de division karyokinétique.

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Jamais ils ne contiennent, à l’intérieur de leur protoplasma,de micro bes ou de déchets cellulaires.

A côté des lymphocytes, et présentant la même distribution topographique, on rencontre des éléments de même dimension qu'eux, mais dont le noyau, également très volumineux par rapport au protoplasma de la cellule, se colore d’une façon moins uniforme : on y distingue, en effet, un réseau chromatique à mailles très petites et pourvu d'un gros nucléole. Tous les termes de passage existent entre ces éléments et les lymphocytes dont ils dérivent évidemment. On peut s'en convaincre aisément en les étudiant dans les follicules clos.

Dans l’ampoule terminale des chylifères centraux des villosités, on trouve des éléments géants que, vu leur haute importance morphologique et physiologique, nous allons étudier avec quelques détails. Disons tout de suite que ces leucocytes présentent les mêmes caractères et la même distribution ehez l’homme et chez le cobaye : ils sont légèrement plus petits chez le premier.

Leur taille est colossale : ils® atteignent jusqu'à 38 et 42 & de longueur. Leur contour est généralement irrégulier et sinueux. Plus l'élément tend vers une forme régulièrement ovale, plus le noyau occupe une position centrale ; chez ceux au contraire, dont le contour est très sinueux, le noyau est refoulé à l’une des extrémités : l’extrémité opposée présente alors des lobes allongés et arrondis qui sont très probablement des pseudopodes. Le protoplasma est finement granuleux, légèrement trouble, prenant faiblement les couleurs, basiques ou acides, bien qu'ayant en général un peu plus d’affinité pour ces dernières.

Le noyau est toujours unique, tantôt en fer à cheval, tantôt arrondi : dans ce dernier cas il mesure de 5-8 u de diamètre. Il renferme un suc nucléaire très abondant et un réseau chromatique bien différencié à 1, 2, rarement 3 nucléoles.

Presque tous ces éléments contiennent à l'intérieur de leur protoplasma des microbes ou des débris cellulaires provenant de leucocytes ou d’hématies englobés. Les masses ainsi incluses dans le protoplasma du macrophage sont presque toujours entourées d'un espace clair, arrondi, parfaitement délimité, et représentant une vacuole digestive analogue à celles qui se forment chez les rhizopodes ou les infusoires lors de la digestion intracellulaire. Les leucocytes ainsi englobés sont

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des lymphocytes, des polynucléaires ou des mononucléaires ; il est facile de suivre la série des transformations subies par un leucocyte ainsi enfermé dans une vacuole digestive : son protoplasma se colore avec une intensité de moins en moins grande, diminue de volume et finit bientôt par s’effacer ; le noyau prend encore bien la couleur pendant un certain temps, puis pâlit, se fragmente ; il ne reste plus alors dans la vacuole que deux à trois petites masses à contours mal définis et se colorant d’une manière diffuse. Puis la vacuole elle-mème disparaît et il ne reste plus qu'une masse chromatique logée directement dans le protoplasma du macrophage et qui finit bientôt par s’effacer. A.Ruffer pense que ces macrophages, bien que capables d’englober des leucocytes vivants, s'adressent de préférence à ceux dont la vitalité est déjà affaiblie, ceux par exemple qui contiennent des microbes dans leur intérieur. à

Les hématies englobées et digérées se présentent sous la forme de masses volumineuses, irrégulières, qui, après l’action du bleu de toluidine et du tannin, virent au rouge, au violet, au brun jaune ou au vert vif, selon le stade de digestion auquel elles sont parvenuess.

On trouve également à l’intérieur de ces macrophages d’autres macrophages plus petits en voie de dégénérescence et parfaitement reconnaissables à leur noyau vésiculeux.

Ils contiennent enfin fréquemment des microbes à divers stades de dégénérescence. Ces microbes sont souvent directement englobés par le macrophage ; il nous est cependant arrivé plusieurs fois d'en trouver encore enfermés dans l'intérieur d'un leucocyte, ingéré luimême.

Ces macrophages remplissent, avons-nous dit, l'’ampoule terminale des chylifères centraux dans toute la longueur de l'intestin grêle ; ils sont également massés en grand nombre sous l'épithélium du cæcum. Enfin, on les rencontre en abondance dans les follicules clos, particulièrement au voisinage de l'épithélium. Jamais ils ne se rencontrent dans le tissu conjonctif de la muqueuse ou de la sous-muqueuse ; iamais non plus dans les vaisseaux sanguins. Ils émigrent parfois vers la cavité de l'intestin ; c’est ainsi que nous les avons vus engagés entre les cellules endothéliales du lymphatique central ou même entre les cellules de l’épithélium intestinal. Enfin,dans un cas, nous les avons trouvés en nombre assez considérable dans la cavité intestinale d'un cobaye dont l’épithélium était absolument intact.

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Nous avons donc là affaire à des éléments migrateurs, doués de la propriété de digestion intracellulaire et chargés de détruire les cellules mortes ou affaiblies. Ce sont les phagocytes que Heidenhain a déjà signalés chez le cobaye ; que Ruffer a rencontrés chez le lapin et le chien.

Ruffer a vu et décrit des éléments exactement semblables sous l'épithélium amygdaliemdu chien. Là, ces phagocytes sont bourrés de particules charbonneuses et de poussières diverses.

Il est permis de supposer que ces macrophages sont les homologues des cellules à poussières que l'on trouve à la surface des alvéoles pulmonaires.

Quelle est l'origine de ces macrophages géants ? Selon nous, ils dérivent d'éléments que l’on rencontre dans les follicules clos et dont nous allons parler maintenant.

Si nous examinons la coupe d’une plaque de Peyer chez le cobaye, nous voyons, principalement vers les parties profondes des follicules, des éléments à gros noyau vésiculeux, pâle, rempli d’un suc nucléaire abondant et présentant un réseau chromatique délicat et nettement différencié, à 1 ou 2 nucléoles. Ce noyau, qui mesure en moyenne 6-7 y de diamètre, est en tout semblable à celui des macrophages géants ; le protoplasma qui l'entoure est très peu abondant et prend facilement les couleurs basiques.

Il s’agit sans doute là des éléments désignés par Czermack sous le nom de « Keimzellen ». Czermack pense que ces éléments donnent naissance aux hématies ; A. Ruffer croit au contraire qu'ils représentent les stades jeunes des macrophages. Nous partageons entièrement sa facon de voir.

En effet, si l’on suit le chylifère central de son extrémité élargie en ampoule vers la profondeur, on voit le protoplasma des macrophages qui y sont contenus diminuer de volume à mesure que l’on s'éloigne du cul-de-sac ; d’autre part, ces macrophages à protoplasma de moins en moins abondant, contiennent de moins en moins de déchets cellulaires ou de microbes. Leur noyau, pendant ce temps, ne varie pas. Au niveau de la partie rétrécie du lymphatique central, vers la base de la villosité, ces macrophages sont réduits à un très gros noyau vésiculeux, entouré d’un protoplasma peu abondant et ne contenant plus de masses ingérées : à cet état ils sont identiques aux éléments

folliculaires décrits plus haut. Les macrophages géants des lymphatiques centraux semblent donc dériver des éléments à gros noyau vésiculeux contenus dans les follicules elos ; de là, ils pénètrent dans le lymphatique central qu’ils remontent grâce à leurs mouvements amiboïdes ; arrivés dans le cul-de-sac, ils acquièrent rapidement un volume énorme, grâce à l'abondance des sucs au milieu desquels ils sont plongés.

Mais cette origine des macrophages devient tout à fait évidente si l'on observe ce qui se passe dans la rate, où les mêmes éléments se retrouvent.

Voiei ce que nous avons observé sur les coupes d'une rate de cobaye mort de cachexie cholérique, et chez lequel existait une abondante destruction des globules rouges du sang.

Les hématies sont englobées et digérées dans les mailles de la pulpe splénique par des leucocytes mononucléaires géants, à très gros noyau vésiculeux, muni d'un réseau chromatique bien différencié, et identiques aux macrophages des chylifères centraux. Les uns contiennent une ou plusieurs hématies, englobées mais non encore dégénérées ; certains phagocytes, à côté de ces globules intacts, renferment des masses irrégulières, virant au violet, au jaune ou au vert après l’action du bleu de toluidine et du tannin ; ce sont des hématies déjà digérées et dont la forme rappelle plus ou moins celle des hématies normales. D'autres phagocytes enfin sont complètement gorgés de globules rouges digérés ; ils sont tellement distendus par leur contenu que le noyau refoulé et comprimé s’aplatit complètement, tandis que le protoplasma est réduit à une mince lame entourant la masse ingérée. Ces phagocytes bourrés d’hématies sont d’une abondance extraordinaire. Nous retrouvons donc là, mais exagéré, le phénomène de destruction globulaire déjà observé dans les chylifères des villosités, les agents de cette destruction étant les mêmes dans les deux cas.

Quelle est donc l’origine de ces macrophages de la pulpe splénique ? Si nous examinons avec soin la structure d’un glomérule de Malpighi, nous voyons que cette structure est très semblable à celle d'un follicule clos de l'intestin; il renferme des lymphocytes en très grand nombre ; puis des lymphocytes dont le noyau, plus où moins volumineux, présente un réseau chromatique bien différencié ; enfin des éléments à très gros noyau vésiculeux, à protoplasma peu abondant,

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dant, identique aux éléments étudiés plus haut dans les plaques de Peyer.

Aucun de ces éléments ne contient d’hématies tant qu'ils sont à l'intérieur des glomérules de Malpighi.

Dans l'espace lymphatique péri-glomérulaire, on trouve disséminés : d'une part, les éléments à gros noyau et à protoplasma peu abondant ; de l’autre, les macrophages, mangeurs de globules, avec leurs caractères typiques ; entre ces deux termes extrêmes, on trouve toutes les formes de passage possibles.

Là, le doute n’est plus permis : les macrophages de la pulpe splénique, identiques aux macrophages des villosités, proviennent des éléments à gros noyau vésiculeux contenus dans les glomérules de Malpighi, de même que leurs homologues des villosités proviennent des éléments à gros noyau vésiculeux contenus dans les follicules clos. Quant aux formes jeunes des macrophages, elles dérivent très probablement des lymphocytes ; mais la chose n’est pas encore démontrée.

Nous allons parler maintenant d'un autre groupe de leucocytes, que l'on ne rencontre guère dans la paroi intestinale du cobaye normal, mais qui existe dans l'intestin humain : ce sont des éléments chargés de granulations basophiles, les « Mastzellen » d'Ehrlich et de Westphal. Certains cas de choléra, où ces éléments s'étaient activement multipliés, nous ayant permis d’élucider leur origine, jusqu'ici peu connue, nous allons les étudier avec quelques détails.

C'est Kühne qui, le premier, en 1864, signala ces éléments chez la grenouille ; puis Cohnheim,Mayer, Waldeyer les signalèrent également. Leur signification fut très discutée: Friedländer, Mayer en faisaient des éléments nerveux ganglionnaires; Schôübel,des cellules épithéliales. E. Westphal, le premier, sur les conseils d'Ehrlich, entreprit de les étudier systématiquement.

Ce sont des cellules bourrées de fines granulations qui se colorent avec intensité par les couleurs basiques d’aniline et n’ont d'aflinité ni pour les colorants acides, ni pour l'hématoxyline, l'hématéine ou le carmin. Westphal les définit: « un amas de granulations énergiquement colorées entourant une tache claire correspondant à un noyau incolore ». En effet, un des caractères les plus remarquables de ces

éléments, c'est la non colorabilité de leur noyau; c’est sous cet aspect qu'on les trouve accumulés en grand nombre dans le derme de la peau atteinte d'urticaire pigmenté.

Westphal recommande pour les colorer la solution suivante :

ET NT 0 NOR CR CCR 2m Ne RSS UT MA ARR 100 c.c. Alcool ahsolsaturétde dablid. 5 Tirer sum con. 50 c.c Acide acétique glacial........... PE EL PTT # 10 c.c

Laisser colorer 24 heures et laver à l'alcool. Par cette méthode, les granulations basophiles sont seules colorées, ainsi que les microbes. Nous nous sommes servi, pour nos recherches, du mélange de Nikiforoff: par ce procédé, les noyaux cellulaires se colorent en bleu et les granulations basophiles en violet pourpre. Ces granulations se colorent également avec une grande netteté par l’oxychlorure de ruthénium ammoniacal.

Si l'on examine des coupes d’intestin humain normal (nos observations ont été faites sur un intestin de supplicié et sur un intestin d'enfant fixé une demi-heure après la mort). on trouve ces éléments situés sans ordre apparent dans les mailles du tissu conjonctif. Ils sont surtout nombreux dans la sous-muqueuse au voisinage des vaisseaux et tout le long de la couche musculaire. Dans la muqueuse, on les trouve au niveau de la région profonde des glandes de Lieberkühn. On en trouve encore, mais rarement, au voisinage de l’épithélium. Jamais on ne les rencontre dans les vaisseaux. Westphal signale une distribution légèrement différente et insiste sur leur abondance au niveau de l’épithélium et de l’orifice excréteur des glandes de Lieberkühn ; il est donc probable que cette distribution est très variable. :

Chez le cobaye, ces éléments ne semblent pas exister dans la paroi de l'intestin.

L'immense majorité des leucocytes basophiles, de la taille d'un mononucléaire ordinaire du sang, répond autype de Westphal : amas de fines granulations basophiles remplissant complètement la cellule ; espace clair à la place du noyau. On rencontre cependant, de temps à autre, une cellule bourrée de granulations basophiles, mais munie d'un noyau prenant fortement la couleur et rappelant celui des Iÿmpho-

cytes ; ce noyau est presque toujours relégué à l'extrémité de la

cellule, Enfin, certains éléments sont tellement bourrés de granulations que l'on ne distingue plus ni noyau ni espace clair.

Westphal signale, lui aussi, l'existence, rare il est vrai, de Mastzellen à noyau coloré; il les a observés dans la couche musculaire du duodénum d’un porc. Mais c’est là, pour lui, un fait exceptionnel, et il ajoute : « Les Mastzellen ne proviennent probablement ni des leuco= cytes du sang, ni des cellules rondes indifférentes (lymphocytes). Au contraire, il est facile d'établir une parenté entre les Mastzellen et les cellules fixes du tissu conjonctif. »

Westphal a fait la remarque que les Mastzellen de l'homme sont particulièrement abondants dans les points où se produit un trouble de la nutrition locale. Nous avons constamment trouvé une augmentation considérable du nombre de ces éléments dans la paroi intestinale des cholériques. Dans un cas, cette formation de cellules basophiles était tellement abondante qu’il nous a été facile de suivre la genèse de ces éléments à partir des stades de début. Nous avons pu ainsi constater qu'ils dérivent directement des lymphocytes proprement dits (il y avait, dans le cas qui nous occupe, lymphocytose abondante des tissus).

C’est ainsi que l’on voit des lymphocytes typiques présenter dans leur protoplasma quelques granulations très fines qui se colorent en violet avec une netteté admirable par le bleu de Nikiforoff. Souvent ces granulations n’occupent qu’un seul point de la cellule, le reste du protoplasma étant normal, Puis ces granulations augmentent de nombre dans l'intérieur du leucocyte qui, lui-même, augmente de volume ; bientôt il se trouve entièrement bourré de fines granulations basophiles : à ce stade, le contour du protoplasma cellulaire se dessine encore nettement, et le noyau prend énergiquement-la couleur, sans avoir en rien modifié son aspect. Puis, brusquement, le noyau pâlit, ne prenant plus la couleur que par endroits : il est en ce moment représenté par une vésicule incolore contenant une ou deux taches chromatiques. Enfin, ces dernières disparaissent ; le noyau tout entier est figuré par un espace clair. Les granulations basophiles ont augmenté au point de faire disparaitre les contours du protoplasma primitif: ce stade nous représente les Mastzellen typiques de Westphal.

Du côté de l’épithélium, on rencontre surtout les stades jeunes; les