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Beaucoup de cellules profondes de la couche de Malpighi sont vacuolaires. Les endothéliums des vaisseaux sanguins sont intacts.
Les leucocytes sont peu nombreux au milieu du foyer d'inoculation; on y trouve trois polynucléaires pour un monouucléaire. Aucun ne contient de vibrions.
Au contraire, entre les faisceaux musculaires sous-jacents, il y a infiltration leucocylaire considérable composée exclusivement de polynucléaires non éosinophiles, Un grand nombre d’entre eux contiennent des vibrions à divers stades de dégénérescence ; mais l'immense majorité des vibrions est libre. On ne constale aucune intiltration leucocytaire dans le derme.
En résumé : envahissement des lymphatiques par les vibrions ; leucocytose très faible là où les vibrions sont très abondants (foyer) ; leucocytose plus intense et mème phagocytose diserète là où les vibrions sont en quantité faible (entre les faisceaux musculaires).
Ajoutons que dans les lymphatiques on trouve des lymphocytes en assez grande quantité. Pas de karyokinèses dans le dlerme.
Cobaye neuf. Injection de 1/8 d'une culture âgée de ?0 heures. Mort au bout de 2? heures.
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Pendant la maladie on observe dans le sang :
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HEURES } POLYNUCLÉAIRES MONONUCLÉAIRES LYMPHOCYTES Avant l'injection... .... A LE RNA BEEN 21 Unedemi-heuré après... 0825002407. HE CEE SEP ER 11 8/heures aprèss un. se. {DR IPN" AUTRE 5 11 — AE (A RER Hs 190 ie 4 DO de due LÉ NCA | A EMA Et EU 6
AUTOPSIE.— Un peu de liquide louche dans le péritoine. Rate grosse ; intestin hyperhémié; cæcum distendu de gaz.
Exsudat sous-cutané. — Grande quantité de vibrions libres ; leucocytose
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moyenne, composée exclusivement de polynucléaires; tous contiennent un certain nombre de vibrions, les uns intacts, les autres déjà granuleux.
Exsudat péritonéal. — Nombreux vibrions libres ; leucocytose abondante ; 1/8 des leucocytes est mononucléé; tous les autres sont des polynucléaires. Presque tous contiennent des vibrions plus ou moins dégénérés.
Cultures sur plaques.— Les exsudats ont fourni de nombreuses cultures ; le sang est stérile.
Coupes de la peau. — Les vibrions fourmillent dans le foyer d’inoculation. Ils ont envahi en masse le derme tout entier, les follicules pileux, sont massés dans les fentes lymphatiques et sous l’épiderme. L'épiderme lui-même est intact. On n’en rencontre pas dans les vaisseaux sanguins. Aucun leucocyte n’a pénétré au centre du foyer d’inoculation. Sur les limites de ce foyer existe une infiltration assez considérable, infiltration qui augmente à mesure que l’on s'éloigne et qui a son maximum dans la zone des follicules pileux. Les parois des veines et des capillaires sont infiltrées de leucocytes en diapédèse ; ceux-ci s'accumulent ainsi en grande quantilé autour de ces vaisseaux, ieur constituant une véritable gaine; puis de là, s’avancent par traînées Jusque sur les bords du foyer en suivant les faisceaux conjonctifs.
Ces leucocytes sont surtout des polynueléaires ; 1 mononucléaire sur 20 globules blancs. Presque pas de lymphocytes. Il n'existe aucune diapédèse au niveau des vaisseaux lymphatiques.
Un très grand nombre de ces leucocytes sont dégénérés et réduils au noyau qui, lui-même, ne se colore souvent qu'imparfaitement. Ceux qui sont intacts contiennent une grande quantité de vibrions plus ou moins digérés.
L'intiltration leucocytaire est presque nulle dans le tissu compact du derme ; à ce niveau l’on voit de nombreux foyers de nécrose.
Ce cas est donc celui d’un cobaye qui a présenté une énergique réaction leucocytaire et phagocytaire, mais chez lequel la majorité des phagocytes a succombé après l’ingestion des vibrions : on trouve en effet, très fréquemment, tout autour des noyaux dégénérés, de petits amas compacts de ces vibrions. ‘ Les leucocytes sortent donc tous des vaisseaux sanguins et non des lymphatiques.
Cobaye neuf. Injection de 1/8 ce culture âgée de ?4 heures. Mort au bout de 18 heures.
LEUCOCYTOSE LEUCOCYTOSE DE L'EXSUDAT
HEURES JEMPÉRATURES DU SANG PAR MILLIM. CUBE Avant l’injection....... DD me GESONAEE 0 Une demi-heure après.. 39°,5.... 27.000... 0 5 heures après........ 38°,3.... 9.000... 4.200 Ro Nora écre FOR RE EXCER PU 8.000... 9.000 ES nef CA ROSE LS PEER 6.000... 5.000
18 — ME Mort,
L'exsudat retiré 5 heures après l’injection, renferme une infinité de vibrions libres: leucocytose faible, composée uniquement de polynucléaires. La moitié environ contient des vibrions ; mais beaucoup de ces leucocytes présentent des signes de dégénérescence. Quelques hématies. Au bout de 8 heures, tous les leucocytes contiennent des vibrions; le nombre des globules dégéneres est très grand. Au bout de 17 heures, le nombre des vibrions libres est énorme; très faible celui des polynucléaires. Nombreux noyaux libres provenant de leucocytes dégénérés.
AUTOPSI£. — Le péritoine renferme une quantité moyenne de liquide légèrement teinté en rouge; ce liquide contieut des vibrions en quantité immense et en culture pure. La leucocytose est presque nulle. Sur les quelques polynucléaires qu’on y rencontre, 1/4 contient des vibrions.
Cultures sur plaques — Le sang est stérile.
Cobaye neuf. Injection de 1/8 de culture âgée de ?24k heures. Mort en 16 heures.
LEUCOCYTOSE LEUCOCYTOSE DE L'EXSUDAT
HEURES TEMPÉRATURES DU SANG PAR MILLIM. CUBE
Avant ‘injection. ..... te ON DURE" NE 0 Une demi-heure après. 000 RER EDS 000 ES 60
5 heures après. ..... 24 AON SRE MEDION 14.600
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L’exsudat retiré au bout de cinq heures, contient beaucoup de vibrions libres ; leucocytose abondante composée de polynucléaires; à peu près tous contiennent des vibrions ; quelques leucocytes sont dégénérés, mais peu. Au bout de 7 heures le nombre des vibrions libres a considérablement diminué; tous prennent bien la couleur. ‘Grande quantité de polynucléaires, tous absolument bourrés de vibrions à divers stades de dégénérescence; 1/4 environ des leucocytes est dégénéré; pas d'hématies. Au bout de 14 heures, le nombre des vibrions de l’exsudat est très faible; polynucléaires extrêmement nombreux, bourrés de vibrions. Beaucoup de leucocytes dégénérés et réduits au noyau. Sur 10 leucocytes on trouve 7 polynucléaires, 2 mononucléaires, 1 lymphocyte.
AUTOPSIE. — Faible épanchement clair dans le péritoine. Il contient quelques vibrions libres, mais très peu, et un très grand nombre de polynucléaires contenant des vibrions. L'exsudat sous-cutané au niveau du point d'inoculation a presque disparu.
Ce cas est donc celui d’un cobaye mort au bout d’un temps assez court (16 heures) et chez lequel l'immense majorité des vibrions, loin de se multiplier : a été détruite par les phagocytes. Il s'agissait donc probablement d’un individu
particulièrement sensible à la toxine cholérique. Réaction leucocytaire générale et locale très vive.
Cultures sur plaques. — Sang stérile.
Cobaye neuf. Injection d'un quart de culture âgée de 24 heures.
Guérison.
LEUCOCYTOSE LEUCOCYTOSE DE L’EXSUDAT HEURES TEMPÉRATURES DU SANG PAR MILLIM. CUBE Avant l'injection... .... 3890-67. :. COUDRE ' 0 Une demi-heure après.. 39,2... 19.000... 400 3 heures après. !...... AO SE 9 DODES. 19.000 T — Era RASE DIN MS S SOUCIS 47.000 10 — AE ne 380,81. 048-000 7e 55.000 19 — Re, Rob oAe BPM RUES 1 DOO TIENNE PRES 24 — ADR EU h BAD ETE OOO PEER ER ANA RSS
Une demi-heure après l'injection, leucocytose faible; la moitié des leucocytes, tous polynucléaires, contient des vibrions. Pas de leucocytes dégénérés. Énormément de vibrions libres: 7 heures après l'injection, leucocytose très forte : 1 mononucléaire pour 8 polynucléaires. Tous absolument bourrés de vibrions entiers ou granuleux. Très peu de leucocytes dégénérés. Nombre des vibrions libres beaucoup diminué. Au bout de 10 heures, les vibrions libres sont en nombre minime; ils se colorent bien et présentent un assez grand nombre de formes spirillaires. Phagocytose et leucocytose intense. 19 heures après l’injection, il nous a été impossible de retirer de l’exsudat, vu sa faible abondance.
Voici donc l'observation d’un cobaye neuf, ayant reçu une dose de virus mortelle et qui cependant à guéri; il faut noter, dans ce cas, non seulement l’intensité de la réaction phagocytaire, mais surtout sa rapidité : en effet, une demiheure après l'injection, l'exsudat contient déjà 400 leucocytes par millimètre cube. Le cobaye possédait donc l’immunité naturelle.
Cobaye neuf. Injection de 1/15 de culture ägée de ?4 heures. Guérison.
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La Jeucocytose, au bout de quatre heures, est déjà abondante dans lexsudat, composée uniquement de polynucléaires. Presque tous contiennent des vibrions,. Le nombre des vibrions libres est très grand; 11 heures après, le nombre de ces vibrions libres est très faible ; l'immense majorité se trouve dans les leucocytes et plus ou moins dégénérés. Beaucoup de leucocytes dégénérés et de noyaux libres. Très peu d’hématies. IL n’a plus été possible de retirer d’exsudat au bout de 21 heures.
Voici done un cobaye neuf auquel on a injecté une dose non mortelle de vibrions de Massaouah. nous voyons qu’au bout d’un très petit nombre d'heures, presque tous les vibrions sont déjà englobés par les phagocytes et n’ont pas eu le temps de se multiplier dans l'organisme.
Cobaye vacciné. Injection de 1/4 de culture âgée de ?4 heures. Gueé-
rison.
HEURES TEMPÉRATURES LEUCOCYTOSE DU SANG Avant l'injection. ...... DOS de 8.600 Une demi-heure après.. G CORRE 12.400 4heures après... ....... FE SE VEN 16.000 TENTE RE DO de 15.000
La réaction fébrile a donc été faible. Le sang avant l'injection présentait une, proportion de leucocytes supérieure à la normale; l'augmentation des leucocyles du sang après l’injection a été relativement faible.
Au bout de 7 heures, on sent sous le derme, au niveau du point d’inoculation, une petite tumeur légèrement fluctuante, se laissant assez bien délimiter. Nous l’excisons pour l’étudier par la méthode des coupes. La région avoisinant l’abcès ne présente aucune trace d’œdème.
Coupes. — Le foyer d’inoculation est situé dans le tissu cellulaire souscutané, immédiatement au-dessus de la couche musculaire. Ce foyer étendu en nappe, d’uve profondeur minime, est exactement circonscrit de toutes parts par une épaisse barrière de leucocytes polynueléaires, qui le transforment de cette façon en une poche parfaitement close. Le centre du foyer ne contient point de lencocytes : les vibrions y fourmillent en liberté ; ils sont intacts et se colorent bien par le bleu de Nikiforoff ou la thionine. Les leucocytes qui constituent la paroi de cette poche sont tassés les uns contré les autres ; avee l'objectif à immersion 1/12 de Leitz et l'oculaire compensateur n° 4 de Zeiss, on peut en compter en moyenne 2,000 dans un champ du microscope. Nous pouvons, en schématisant un peu, distinguer dans celte paroi quatre zones :
1° La zone avoisinant immédiatement le foyer d’inoculation ; tous les teucocytes qui la composent sont des polynucléaires ; tous sont bourrés d’un nombre incalculable de vibrions, les uns entiers, la plupart réduits en granulations, Parmi les cellules qui se trouvent le plus immédiatement en contact avec le
oyer prioulif, un certain nombre, assez faible d’ailleurs, sont dégénérées et réduites à leur noyau. ù
Un très grand nombre de polynucléaires, ceux en particulier qui sont bourrés de vibrions dégénérés au point d’avoir doublé ou triplé de volume, sont pseudo-éosinophiles, c’est-à-dire que leur contenu granuleux se colore également par le bleu de Nikiforoff, ou par l’aurantia si l’on emploie le mélange de Biondi. Ceux qui sont un peu-plus éloignés du foyer, et qui contiennent un nombre moins grand de microbes, ne renferment pas de granulations acidophiles ; on peut donc admettre que ces dernières représentent un stade déjà avancé de la digestion intra-cellulaire des vibrions. Cette zone ne contient ni mononucléaires, ni lymphocytes. On y remarque, entre les leucocytes, un certain nombre de vibrions libres, les uns se colorant bien, les autres prenant la couleur imparfaitement.
2° Une seconde zone, composée exclusivement de polynueléaires; on n’y trouve plus de vibrions libres entre les leucocytes ; un très grand nombre de ceux-ci contiennent des vibrions, mais en nombre beaucoup moins grand que Les cellules de la première zone; chaque phagocyte en renferme trois ou quatre, en général non granuleux ; le nombre des leucocytes pseudo-éosinophiles y est tout à fait minime. Pas de mononucléaires ; par de lymphocytes. Presque pas de leucocytes dégénérés.
30 Une troisième zone, composée de polynucléaires ; ici les leucocytes sont beaucoup plus espacés. Quelques-uns contiennent des vibrions, mais c’est l’infime minorité ; pas de vibrions libres; pas de pseudo-éosinophiles. On y trouve un nombre assez petit de grands éléments mononucléaires, à noyau vésiculeux, à protoplasma abondant: quelques-uns de ces grands éléments contiennent des vibrions dégénérés, mais c’est là l’exception. Pas de lymphocytes.
4° Une quatrième zone où les polynucléaires sont très espacés; ils ne contiennent pas de vibrions ; on ne trouve pas non plus de vibrions libres. Pas de pseudo-éosinophiles. Ici les mononucléaires géants sont relativement nombreux :
on en trouve de 40 à 50 en moyenne par champ du microscope. Ils ne contiennent pas de vibrions ; de temps à autre, rarement, on en trouve un renfermant un polynucléaire entouré ou non d’une vésicule digestive.
Telle est la paroi qui limite immédiatement le foyer d’inoculation. Sur la limile externe de cette paroi, on ne trouve plus de vibrions. On n'y trouve pas d’hématies épanchées. i HAUT
En dehors de cette paroi, le derme, le tissu cellulaire sous-cutané, le muscle peaucier, sont infiltrés de leucocytes polynucléaires. On trouve dans le derme de nombreux mononucléaires géants ; mais c’est dans le tissu cellulaire sous-cutané que ces éléments se trouvent en grande quantité : à ce niveau, on peut en compter, en certains points, 300 ou 400 par champ microscopique.
On aperçoit dans le derme un petit foyer de vibrions, entièrement entouré par les phagocytes polynucléaires. Sauf en ce point, on ne trouve de vibrions nulle part dans toute la préparation.
Les vaisseaux sanguins du tissu cellulaire sous-cutané contiennent une abon-
