HEURES VACCINE TEMOIN VACCINE TÉMOIN
Avant l’injeetion....... BBAEUUE DOLUSENE 122000 8R% 5.300 2 heures après: ... DOS LES DOS MAR EME NOEL Ta SEAT TEE DRE EE ets UL 340,8. 4% 390 Dtrr 18.000.... 21.000 9 — CE de 280,62. OS AS RL PA à LUS AU 13 — CT ETS LOS TEE DO OE 23.000... 27.000
AUTOPSIE. — Chez le vacciné, le péritoine contient une très faible quantité
d’un liquide clair. Le jéjunum est légèrement hyperhémié. Tout l'intestin grêle est contracté et contient une quantité minime de liquide brun clair. Pas de gaz dans l’estomac ou le cæcam. Les autres viscères abdominaux ne sont pas congestionnés. La réaction de l'estomac est très acide ; l'intestin grêle est neutre dans toute son étendue. Le contenu du cœcum est acide.
Chez le témoin, l'intestin grèle ainsi que le foie, la rate, les reins sont fortement hyperhémiés. L’intestin grêle contient une assez forte proportion de liquide.
Examen des liquides {/vacciné). — Jéjunum : Quelques vibrions se colorant mal. Bactéries, coccus en grand nombre. Assez nombreux leucocvtes, polynucléaires et mononucléaires. Quelques lymphocytes. Plusieurs polynucléaires contiennent des vibrions ; mais les cellules sont généralement dégénérées. Pas de noyaux épithéliaux.— [léon : Nombreux coccus et streptocoques. Très peu de vibrions : ceux-ci prennent mal la couleur. Pas de noyaux épithéliaux. Rares leucocytes dégénérés. Cæcum : Flore bactérienne très abondante. Quantité innombrable de vibrions, prenant tous très mal la couleur. Beaucoup de leucocytes dégénérés bourrés de toute espèce de microbes.
Cultures sur plaques de gélatine. — Ni le péritoine, ni les liquides d'aucune partie de lintestin n’ont fourni «le colonies vibrioniennes. Le liquide de l’iléon seul a liquéfé la gélatine en donnant un gros bacille el un coccus. L'intestin grêle et le cæcum du témoin ont donné de nombreuses colonies vibrioniennes.
Culture sur gélatine-peptone. — Le jéjunum et le cæcum ont donné un voile de vibrions.
Cobaye vacciné par le périloine. Injection de ? cultures de 30 heures après alcalinisation de l'estomac. Sacrifié au bout de 15 heures. Un témoin neuf est traité de même.
AUTOPSIE. — Chez le vacciné l'aspect est normal. Pas d'hyperhémie des viscères, pas d’épanchement péritonéal.
Chez le témoin, moitié inférieure de l'intestin grèle vivement injectée. L'intestin grêle contient un peu de liquide. Pas d'épanchement péritonéal.
Examen des liquides (vacciné). — Jéjunum : Pas de vibrions. Quelques leucocytes dégénérés. Streplocoques et cocco-bacilles. — Iléon : Pas de vibrions. Flore de coccus et de streptocoques à gros grains très abondante. Pas de leucocytes. Pas de noyaux épithéliaux. — Cæcum : Cadavres de vibrions en très grande quantité. Beaucoup de leucocytes dégénérés. L
Cultures sur plaques. — Pas de vibrions chez le vacciné. — Chez le témoin toutes les portions de l'intestin ont donné des colonies vibrioniennes.
Cultures sur gélatine-peptone à 37° (vacciné). — Pas de vibrions.
Coupes (vacciné). -- Jéjunum : La cavité intestinale est vide. Un œædème assez abondant s’est développé dans les villosités à la base de l’épithélium. La partie profonde des cellules épithéliales est trouble, granuleuse, déchiquetée, souvent absente. Les novaux cellulaires sont refoulés vers le haut. En général, la partie supérieure des cellules est intacte ; le noyau se colore toujours très bien ; seul, le plateau à, par endroits, perdu de la netteté de sa situation. Nulle part on ne trouve de solution dans la continuité du plateau. Les capillaires des villosités contiennent de très nombreux leucocytes polynucléaires : éeux-ci sout amassés en grand nombre entre les racines déchiquetées des cellules épithéliales. [Is ne présentent aucun signe de dégénérescence, et ne contiennent pas de microbes. Un nombre assez grand de ces éléments est silué entre les cellules de l'épithélium, immédiatement au-dessous du plateau. Très peu ont franchi le plateau strié. Aucune infiltration leucocytaire de la muqueuse ou de là sous-muqueuse. Les vaisseaux sanguins sont moyennement gorgés de Sang. L'endothelium péritonéal est intact. Nulle part on ne trouve de vibrions.
Iléon: Pas de vibrions ni de leucocytes dans la cavité intestinale. Le plateau strié esl partout intact. Les noyaux épithéliaux se colorent bien ; pas d'œdème sous-épithélial. Quelques vacuoles bien délimitées, claires et ne contenant de débris daucune espèce, se rencontrent de place en place dans le protoplasma épithélial entre le noyau et le plateau.
Quelques leucocytes polynucléaires sont amassés à la base de l’épithélium, mais cette inliltration est faible. Tout le reste de la paroi est absolument normal,
mn 1 À os Cæcum. — Quantité énorme de vibrions ne se colorant presque plus dans
la cavité, contre l'épithélium. Aucuu dans la paroi. Épithélium intact. Pas de leucocytose.
Cobaye vacciné par voie péritonéale. Injection intra-stomacale de ? cultures âgées de 30 heures. Sacrifié au bout de 24 heures.
HEURES TEMPÉRATURES LEUCOCYTOBE DU SANG PAR MILLIM. CUBE Avant l’injéction. "5-70 DOS OMR 15.000 SAOUTES TAPIS 7 CRU DT US EE A RE ER RAR TRES Le NBA, RE 10 RTS SARA EE 282 A 27.000 DIR RNA NE er, SO TRE 17.000 AUTOPSIE. — Absolument normale.
Examen du contenu intestinal. — Pas de vibrions, en aucun point. Pas
de leucocytes ni de noyaux épithéliaux. Flore bactérienne abondante (coccus, streptocoques, bacilles).
Cultures. — Ni les plaques de gélatine, ni les ensemencements sur gélatine-peptone à 37° n’ont fourni de colonies cholériques.
De ces observations, il résulte que la destruction des vibrions a lieu très rapidement dans la cavité intestinale des cobayes vaccinés ; 15 heures après l'injection de doses énormes (2 cultures entières sur gélose), des réactifs aussi sensibles que la gélatine-peptone ne décèlent plus de vibrions vivants. Dès la troisième heure qui suit l'injection, la plus grande partie de ces organismes sont tués et les plaques de gélatine sont insuffisantes pour démontrer leur présence (exp. LXXX et LXXXI). Cette destruction en masse se fait dans le cæcum, où dès les premières heures les préparations sur lamelles aussi bien que les coupes montrent d'innombrables cadavres de vibrions. Les phagocytes ne jouent aucun rôle dans ce phénomène. :
Le nombre des polynucléaires émigrés dans la cavité est, en effet, minime ; de plus ces éléments dégénèrent presque immédiatement.
A aucun moment, on ne constate d'hyperhémie marquée de l'intestin grêle ; celui-ci, très violemment contracté, chasse rapidement les vibrions vers le cæcum où ils périssent aussitôt.
Les toxines séjournent donc fort peu de temps dans l'intestin grêle ; néanmoins une certaine quantité de ces substances diffuse dans l'organisme, déterminant un léger abaissement (1 degré ou 1 degré
et demi) de la température rectale, et provoque vers la douzième heure la formation d’un trouble assez accentué dans la nutrition intime des cellules épithéliales ; ce trouble se traduit par l'apparition d’un œdème de la partie profonde de la cellule épithéliale et a son maximum dans la région moyenne du jéjunum. Ces altérations ne vont jamais jusqu’à la chute de l'épithélium.
Cette diffusion de toxines a également pour effet l’afflux des leucocytes dans les capillaires des villosités, leur diapédèse et leur accumulation sous l’épithélium qu'ils ne traversent pas.
Nous voyons là, une fois de plus, combien l'organisme vacciné est sensible à la toxine cholérique.
Un fait intéressant est l'abondance de la flore bactérienne dans l'intestin grêle des vaccinés ; cette flore comprend surtout des coccus, un streptocoque à gros grains et une bactérie courte.
Notons enfin que tous les noyaux épithéliaux sont intacts ainsi que la striation du plateau (sauf de rares exceptions).
f. — Choléra expérimental de Koch chez les cobayes vaccinés.
Abordons maintenant le dernier chapitre de cette étude sur l’intestin des cobayes cholériques et voyons comment se comportent les éléments de la paroi lorsque l'on injecte des vibrions cholériques dans la paroi des vaccinés en même temps que de la teinture d'opium dans leur cavité péritonéale.
Cobaye vacciné par voie péritonéale. Injection intra-stomacale de 1 cullure âgée de 30 heures. Injection péritonéale de teinture d'opium. Durée de la narcose : ? h. 1/2. Mort au bout de 16 heures. Un témoin neuf est traité de même ; durée de la narcose : ? heures.
Mort au bout de 9 heures.
LEUCOCYTOSE DU SANG
LEMPÉRATURES PAR MILLIM. CUBE HEURES VACCINÉ | TÉMOIN VACCINÉ TÉMOIN Avant l'injection. ...... 38971. 380,4... 11.000.... 6.900 2.heures après. 11, 350,220 HAN TE Pers 23.000.... 19.000 due TSI DO ONE EPA CURRENT MIE PER EEE ASE PME A ER ER EEE Bbosle MME D'ENSDo SR Rance NAN ENS 8.000 DS ie D Een 8. NS *, 340,90... MOrLO EAN AS ae LAN RE LA NS EL DUT) B NUL EEE TES 21.000
AUTOPSIE (vacciné). — Dans le péritoine, épanchement abondant, clair, Pas de dépôts fibrineux sur les viscères. Intestin grêle, foie, reins hyperhémiés ; intestin grèle lâche, Gistendu par le liquide qu'il contient. Un peu de liguide dans l'estomac ; beaucoup de gaz dans le cæcum. Rectum rempli de matieres dures. Léger épanchement elair dans la plèvre.
Témoin. — Dans le péritoine, épanchement abondant, rougeàlre. Intestin grêle rempli de liquide, très hyperhémié. Gaz dans le cæcum. Dans le rectum matières solides.
Examen des liquides (vacciné). — Liquide péritonéal : Nombreux vibrions cholériques libres et se colorant bien. Beaucoup sont disposés en chainettes de S, ce qui prouve une aetive multiplication. Leucocytose abondante composée surtout de polynucléaires. La plupart contiennent des vibrions non dégénérés ; l'immense majorité de ces leucocytes ont un protoplasma vacuolaire, dégénéré ; beaucoup sont réduits au noyau.
Jéjunum : Flore bactérienne abondante. Un grand bacille ; des coccus et des streptocoques. Nombreux vibrions se colorant bien. Aucune leucocytose. Quelques noyaux épithéliaux. — Jiéon : Très nombreux vibrious bien colorés. Pas de leucocytes. Bacilles et cocceus. — Cæcum : Très nombreux vibrions se colorant très mal. Nombreux\leucocytes mononucléaires dégénérés.
Témoin. — Liquide périlonéal : Très nombreux vibrions libres. Beaucoup de formes spirillaires. Leucocytose nulle. Beaucoup d’hématies. Intestin : Dans toute l'étendue de l'intestin (intestin grêle et cæcum) nombreux vibrions bien colorés. Pas de leucocytes.
Cultures sur plaques. — Vacciné : Le liquide péritonéal a fourni de nombreuses colonies cholériques. Le jéjunum et l’iléon également. Le cæcum a donné un nombre très faible de colonies. Le sang est stérile. — Témoin : Les liquides du jéjuoum, de l’iléon, du cæcum, l’épanchement péritonéal ont fourni un nombre énorme de colonies vibrioniennes. Le sang en a donné quelquesunes.
Coupes (vacciné). — Jéjunum : Dans la cavité intestinale, les vibrions sont très nombreux, disséminés ou formant, sur le bord de l’épithélium, des amas fournis. Ils prennent énergiquement la couleur. On trouve également des leucocytes polynucléaires très nombreux ; beaucoup sont bourrés de vibrions ; en général ils semblent sains. Cependant il existe beaucoup d'éléments réduits au uoyau. Ov trouve également d'assez nombreuses hémalies épanchées dans la cavilé.
L'épithélium est partout soulevé en masse par un œdème abondant. La partie profonde des cellules est rongée, déchiquetée. Au sommet des villosités, les cellules épithéliales manquent complètement et une communication béante existe ainsi: entre la cavité intestinale et le Lissu conjonctif sous-épithélial.
La solution de continuité ainsi formée, l’œdème sous-épithélial est rempli de leucocytes polynucléaires ne présentant, en général, aucun signe de dégénérescence. La plupart des leucocytes avoisinan‘ le 5cinmet de la villosité sont bourrés de vibrions dont beaucoup sont transformés en granulations. A un niveau
plus profond cette phagocytose est beaucoup plus rare. Il est évident que presque tout les vibrions qui ont pénétré dans le tissu de la villosité ont été englobés aussitôL.
On ne trouve de vibrions libres en aucun point de la villosité, de la muqueuse, ou de la sous-muqueuse.
On observe une leucocytose et une diapédèse intenses au niveau des capillaires entourant le lymphatique central. Celui-ci présente un endothélium intact et contient un nombre trés grand de macrophages mononucléaires. La muqueuse, la sous-muqueuse sont infiltrées de polynucléaires qui ne contiennent pas de microbes.
L'endothélium péritonéal est sain. Dans le tissu lâche du mésentère on trouve épanchés de nombreux globules rouges. Un nombre considérable de leucocytes, polynucléaires et mononucléaires, sont accumulés sous l'endothélium mésentérique. Plusieurs de ces éléments contiennent des vibrions. Contre l’endothélium. dans la cavité péritonéale, ou trouve de temps en temps des foyers vibrioniens libres. LÀ
Nous pouvons donc constater, dans ce cas : a) une multiplication active des vibrions dans la cavité de l'intestin grêle ; b) leur destruction dans le cæcum ; c) des lésions profondes de l’épithélium intestinal; d) une leucocytose très abondante de polynucléaires s’accompagnant de phagocytose dans la villosite ; e) l'absence de vibrions libres daus la paroi intestinale et le mésentère ; f) la présence de nombreux vibrions libres dans la cavité péritonéale.
Cobaye vacciné par voie intestinale. Injection intra-stomacale de la culture âgée de 24 heures. Injection péritonéale de teinture d'opium. Durée de la narcose :2 h.3/4. Mort au bout de 27 heures. Un témoin
* neuf est traité de même ; durée de la narcose :2 h. 1/4. Mort au bout de 12 heures.
LEUCOCYTOSE DU SANG
TEMPÉRATURES PAR MILLIM. CUBE HEURES VACCINE TEMOIN VACOCINE TÉMOIN Avant l'injection ....... DOTE 380,4... 16.000.... 4.900 1'heuren apres 21... SOMORE SHOP 19:000: . 217.000 SANEUTES MNT NE. 940: Fame DO PA AT ee RE Une. ha 10 — OUEN MATE BOSS DOS LEA TR ER 26.000 12 — AS EURE AÉPME TON Eee Monte PRÉDRN TE LA 20 Ne un OA DITES RE 14.000...
27 — ET PAR LE Mort.
AUTOPSIE (vacciné). — Le péritoine Contient un épanchement abondant,
louche. Dépôt fibrineux sur le mésentère, le foie, les anses intestinales. L’intestin grêle est hyperhémié du haut en bas et rempli de liquide. Le rectum est plein de matières dures. Foie, reins, faiblement congestionnés.
Témoin : Epanchement périlonéal abondant, légèrement hémorrhagique Pas de dépôts fibrineux sur les viscéres. Intestin grêle hyperhémié, rempli de liquide. Matières dures dans le rectum. Foie, rate, reins, congestionnés.
Examen des liquides (vacciné). — Liquide péritonéal : Leucocytose extrèmement abondante, composée exclusivement de polynucléaires. L'immense majorité contient des vibrions en grand nombre, Beaucoup de cellules sont dégénérées et réduites au noyau. Parmi les leucocytes sains, 3/4 sont bourrés de granulations pseudo-éosinophiles. 11 n'y a pas de vibrions libres. — Intestin grêle : Vibrions libres assez nombreux. Pas de leucocytes. Pas de noyaux épithéliaux. — Cæcum : Très nombreux vibrions se coloraut mal. Leucocytes mououucléaires dégénérés en grand nombre.
Témoin : Le liquide péritonéal contient une quantité énorme de vibrions libres. Beaucoup de formes spirillaires et filameuteuses. Peu de leucocytes polynucléaires ; 1/6 contiennent des vibrions. Beaucoup d’hématies. — Intestin grêle : Vibrions cholériques en grand nombre Pas de leucocytes. Quelques noyaux épithéliaux. — Cæcum : Beaucoup de vibrions se colorant énergiquement
Cultures sur plaques de gélatine (vacciné). — Le liquide péritouéal a donné des colonies cholériques en nombre assez grand. Le jéjuoum, l'iléon ont fourni de nombreuse colonies vibrioniennes. La plaque faite avec le contenu du cæcum en à présenté trois. Le sang est stérile.
Témoin : Le jéjunum, l’iléon, le cæcum, le péritoine ont fourui un nombre énorme de cultures. La plaque ensemencée avec le sang en a présenté 9.
Coupes (vacciné). — Jéjunum : La cavité intestinale contient quelques vibrions se colorant bien. Le long du bord épithélial, ces vibrions sont beaucoup plus nombreux et forment des foyers dans les dépressions de l’épithélium. Toute la surface de l’épithélium est recouverte d’une grande quantité de leucocytes polynucléaires, généralement sains, dont 1/4 environ contiennent des vibrions.
L’épithélium est soulevé par un œdème profond. Au sommet des villosités il est détruit; à ce niveau, il y a une abondante diapédèse de polynucléaires. Tout le tissu conjonctif sous-épithélial est infiltré d’une infinité de polynucléaires non éosinophiles, dont un certain nombre contiennent des vibrions, Parmi eux quel ques noyaux libres de polynucléaires au point que la région donne l'impression d’un foyer de suppuration. Ces leucocyles sortent tous des capillaires périchylifériens. La sous-muqueuse est (galement infiltrée de polynucléaires associés à de nombreux lymphocytes.
On ne trouve de vibrions libres à aucun niveau de la paroi intestinale.
Les endothéliums de la séreuse intestinale et mésentériquè sont dans un remarquable état de conservation.
Les vaisseaux sanguins du mésentère sont gorwés de polynucléaires qui sortent des capillaires et des veines et vont s’accumuler sous l’endothelium péritonéal qu'ils traversent pour pénétrer dans la cavité péritonéale. Sous cet endothélium, on trouve également accumulés un grand nombre de mononucléaires à protoplasma abondant dont beaucoup sont remplis de débris leuco-
cytaires, Un grand nombre de leucocytes sous-endothéliaux contiennent des vibrions dégénérés, On ne trouve pas dans Pépaisseur du mésentère de vibrions libres.
Eu résumé, nous constatons ici : a) une multiplication de vibrions dans l'intestin grêle; b) leur destruction dans le cæcum; c) leur destruction dans la villosité au moyen des phagocytes, et l’abondante leucocytose de cette région; d\ leur destruction par les phagocytes dans la cavité péritonéale ; e\ le début d'un processus secondaire caractérisé par l’arrivée des macrophages; f\ l’état stérile du sang. — Il n’y a donc plus de vibrions libres dans l’organisme ; celui-ci est mort intoxiqué.
Cobaye vacciné par voie périlonéale. Injection intra-stomacale de 1 culture 1/2 de ?: heures. Injection péritonéale de teinture d'opium. Durée de la narcose : 2? heures. Mort au bout de 19 heures. Témoin neuf traité de même. Durée de la narcose : ? heures et demie. Mort au bout de 11 heures.
AUTOPSIE (vacciné). — Épanchement moyen dans le péritoine. Dépôt fibrineux peu abondant sur les viscères. Intestin grêle hyperhémié, contenant un peu de liquide, à parois relâchées. Rectum rempli de matières dures. Réaction de l’estomac très acide ; de lintestin grêle, neutre; du cæcum, acide.
Témoin : Léger épanchement rougeûtre dans le péritoine. Pas de dépôts fibrineux. Intestin grêle très hyperhémié, plein de liquide. Rectum plein de matières solides. Réaction de l’estomac très acide ; de l'intestin grêle, très légèrement acide. Du cæcum, acide.
Examen des liquides (vacciné). — Liquide péritonéal : Leucocytose intense, composée de polynucléaires, la moitié contenant des granulations pseudo-éosinophiles. Les 3/4 renferment des vibrions à divers stades de dégénérescence. Beaucoup de noyaux libres. Pas de vibrions libres.
Intestin grêle : Vibrions assez nombreux, se colorant bien. Quelques leucocyles polynucléaires. Quelques-uns renferment des vibrions. Pas de noyaux cellulaires.
Cæcum : Quantité énorme de vibrions se colorant mal. Beaucoup de leucocytes de toutes formes dégénérés.
Témoin : Dans l'épanchement péritonéal beaucoup de vibrions libres. Pas de leucocytes. Nombreuses hématies. L’intestin grêle, le cæcum contiennent de très nombreux vibrions bien colorés. Pas de leucocytes. Quelques noyaux épithéliaux.
Cultures sur plaques (vacciné). — L'épanchement péritonéal, l'intestin grêle ont donné de nombreuses colonies cholériques. Le cæcum en a fourni 10 qui ont liquéfié la gélatine qu'au bout de 3 jours entiers. Sang stérile.
Témoin : L'intestin grêle, le cæcum, le péritoine ont fourni d'innombrables colonies. Le sang est stérile.
He
Cobaye vacciné par voie péritonéale. Injection intra-stomacale de
1 culture de 30 heures. Injection de teinture d'opium dans le péritoine. Durée de la narcose, 3 heures. Mort au bout de 37 heures. Un témoin neuf est traité de même. Durée de la narcose, ? heures. Mort
au bout de 19 heures.
LEUCOCYTOSE DU SANG
DEMPÉRATURES PAR MILLIM. CUBE HEURES VACCINE TEMOIN VACCINE TEMOIN Avant l'injection ....... 2901... OP Dee 17.000... 57.000 1 heure après, ...... NBAo BAT 2 2590 EEE 19.000..., 21.000 Le NOIRE DENT DO DIS DOTE ee DAT RSR ; 8 — as Mgr SAR»: 540,7... ARR ANRT EN 18 — messe 360,4. ... 290,072. 28.000.... 8.000 19 — NN TT SYRIE Mort®"…, GARD 25 — NS ALCEE 350,3, RD PR et PER PREENE 35 — etc RATE 7 De do a Us Ke 19000627 37 — Rose 700f, AUTOPSIE (vacciné). — Dans le péritoine, dépôt fibrineux sur les viscères.
Épanchement très faible, purulent. Intestin grêle très hyperhémié, contenant une faible quantité de liquide. Cæcum distendu par les gaz. Rectum rempli de matières solides. Rate très grosse. Foie, rein légèrement congestionnés.
Témoin : Dans le périloine, épanchement moyen, louche. Intestin grêle hyperhémié, flasque, rempli de liquide, Congestion intense de tous les viscères abdominaux. Un peu de dépôt fibrineux sur le foie et le mésentère.
Examen des liquides (vacciné). — Dans le péritoine, pas de vibrions libres. Masse énorme de leucocytes polynucléaires; les 2/3 dégénérés, réduits au noyau. Les autres contiennent des granulations provenant sans doute de la destruction des microbes. Dans l’intestin grêle, pas de vibrions. Très nombreux leucocyles polynucléaires (2/3) ou mononucléaires ne. contenant pas de vibrions. Quelques noyaux épithéliaux. Cæcum : Quelques vibrions se colorant mal; nombreux leucocytes dégénéres.
Témoin: Dans le périloine beaucoup de vibrions libres. Leucocytose assez forte, composée de polynucléaires ; beaucoup contiennent des vibrions. Mais la plupart de ces phagocyles sont dégénéres. Dans l'intestin grêle, assez nombreux vibrions libres. se colorant bien. De même dans le cæcum. Pas de leucocytes ; quelques noyaux épithéliaux.
Cultures sur plaques. — Chez le vacciné, la plaque ensemencée avec le liquide péritonéal a fourni 1 colonie cholérique. Le jéjunum a donné 2 eolonies ; l’iléon, le cæcum, le sang n'ont rien fourni.
Chez le témoin, l'intestin grêle, le cæsum, le péritoine ont donné de très wombreuses colonies vibrioniennes. La plaque ensemencée avec du sang en à donné 13.
Cultures sur gélatine-peplone. — Le jéjunum, l'iléon, le cæcum ont donné des voiles contenant des vibrions (cnez le vacciné).
Cobaye vacciné par voie péritonéale. Injection intra-stomacale de 1 culture 1/2 de 30 heures. Injection de teinture d'opium dans le périloine. Durée de la narcose : ? heures. Sacrifié au bout de ? heures.
AUTOPSIE. — Intestin grêle très faiblement hyperhémié, flasque, rempli de liquide. Dans le péritoine, faible épanchement rougeätre. Viscères très peu congestionnés. Rectum rempli de matières dures.
Examen des liquides. — Péritoine : Pas de vibrions. Pas de leucocytes. Quelques hématies. Jéjunum: Vibrions en assez grand nombre; beaucoup de formes spirillaires. Pas de leucocytes; pas de noyaux épithéliaux. Zléon : Mêmes observations. Cæcum : Vibrions en assez grande abondance; beaucoup se colorent mal.
Cultures sur plaques. — Jéjunum, iléon fournissent d'assez nombreuses colonies vibrioniennes. Le cæcum en donne très peu. Le péritoine, le sang sont stériles.
Coupes du jéjunum.— Épithélium partout en place. Striation du plateau intact. Beaucoup de cellules ont leur partie profonde trouble, irrégulièrement vacuolaire. Les vaisseaux ne sont pas hypernémiés. Le taux des leucocytes intra-vasculaires semble normal. Aucune diapédèse. Aucune infiltration leucocytaire de la muqueuse ni des villosités. Vibrions disséminés dans la cavité intestinale le long de l’épithélium ; aucun ne se trouve dans la paroi.
Cobaye vacciné par voie périlonéale. Injection intra-stomacale de 1 culture 1/2 de ?4k heures. Injection de teinture d'opium dans le péritoine. Durée de la narcose, 2 heures 1/2. Sacrifié au bout de 4 heures.
AUTOPSIE. — Les viscères sont très faiblement congestionués. L'intestin est flasque, rempli de liquides. L’estomac est plein de liquide ; le cæcum contient des gaz. Le contenu du rectum est solide. La réaction de l'estomac est acide. Celle de l'intestin grêle et du cæcum, alcaline. La rate et les ganglions mésentériques sont énormes. Faible épanchement rougeàtre dans le péritoine.
Examen des liquides. — Péritoine: Quelques vibrions. Pas de leucocytes. Hématies. Jéjunum : Vibrions cholériques nombreux ; streptocoques. Pas de leucocytes, pas de noyaux épithéliaux. Cæcum : Nombreux vibrions, en général se colorant mal.
Cultures sur plaques. — Eslomac : Pas de vibrions. Jéjunum : Nombreuses colonies vibrioniennes. Quelques streptocoques à gros grains. Zléon : Rares colonies vibrioniennes. Nombreuses colonies d’un cocco-bacille, Cæcum : Gélatine non liquéfiée. Pas de vibrions cholériques. Liquide péritonéal : Assez nombreuses colonies de vibrions. Sang : stérile.
Coupes du jéjunum.— Dans la cavité, vibrions en assez petit nombre le long de l’épithélium. Petits amas vibrioniens dans le conduit des glandes de Lieberkühn. L'épithélium ne manque nulle part. La partie profonde des cellules est très gonflée, parfois déchiquetée et arrachée à son substratum. Les noyaux se colorent bien. Leucocytose abondante dans les vaisseaux de la sous-muqueuse et du mésentère. Aucune diapédèse. Aucune infillration leucocytaire des tissus. Endothélium péritonéal intact. Pas de vibrions dans la paroi.
Cobaye vacciné par voie péritonéale. Injection intra-stomacale de 1 culture âgée de ?4 heures. Injection de teinture d’opium dans le péritoine. Durée de la narcose: ? heures. Sacrifié au bout de 6 heures.
AUTOPSIE. — [ntestin grêle hyperhémié, contenant du liquide. Rectum plein de matières solides. Épanchement péritonéal moyen. Pas de dépôts fibrineux sur les viscères. Rate très grosse.
Examen des liquides. — Péritoine : Vibrions nombreux. Beaucoup de formes spirillaires. Quelques rares leucocytes polynucléaires. Pas de phagocytose. Beaucoup d’hématies. Jéjunum : Nombreux vibrions. Pas de leucocytes. Quelques noyaux épithéliaux. Iléon : Vibrions très rares. Beaucoup de coeco-bacilles. Pas d'éléments cellulaires. Cæcum : Nombre énorme de vibrions, se colorant mal. Beaucoup de leucocytes dégénérés.
Cultures sur plaques. — Périloine : Nombreuses colonies vibrioniennes. Jéjunum : Même chose. Zléon : Colonies peu nombreuses. Cæcum : 3 colonies sur la plaque. Sang stérile.
Coupes du jéjunum. — Épithélium trouble et tuméfié à sa base, soulevé souvent par un œdème profond. Les cellules épithéliales du sommet des villosités manquent. Leucocytose énorme des vaisseaux sanguins. Aucune diapédèse. Aucune infiltration leucocytaire des tissus. Dans la cavité intestinale, nombreux amas vibrioniens à l’orifice des glandes de Lieberkühn et le long de l’épithélium. Au sommet des villosités, on les trouve au milieu de l’épithélium dégénéré ; on en trouve quelques-uns dans l’œdème sous-épithélial. Ils ne se montrent pas dans la sous-muqueuse ou la musculaire. Mais on trouve quelques petits foyers dans la séreuse et le long du bord péritonéal. Aucune phagocytose.
Cobaye vacciné par voie péritonéale. Injection intra-stomacale de 1 culture 1/2 âgée de ?h heures. Injection de teinture d'opium dans le péritoine. Durée de le narcose : ? heures trois quarts. Sacrifié au bout de 10 heures.
AUTOPSIE. — Intestin grêle hyperhémié, contenant du liquide. Cæcum tres distendu par les gaz. Matières solides dans le rectum. Pas de dépôt fibrineux sur les viscères. Dans le péritoine, épanchement abondant, rougeàtre.
Examen des liquides. — Péritoine : Très nombreux vibrions. Beaucoup de formes filamenteuses. Nombreux leucocytes polynucléaires. Presque tous sont dégénérés. Beaucoup de noyaux leucocytaires libres. Quelques-uns, mais rares, contiennent des vibrions. Jéjunum : Vibrions assez nombreux. Pas de leucocytes. Rares noyaux épithéliaux. Zléon : Vibrions nombreux et bien colorés. Cæcum : Vibrions très nombreux se colorant mal.
Cullures sur plaques. — Le péritoine, le jéjunum, l’iléon ont fourni de très nombreuses colonies vibrioniennes. Le cæcun en à donné 5 sur une plaque. Sang stérile.
Coupes du jéjunum. — L'épithélium est entièrement détruit au sommet des villosités ; ailleurs, il est soulevé par un œdème abondant. Les capillaires des villosités, comme les vaisseaux de la sous-muqueuse, contiennent un nombre très grand de leucocytes. Dans les villosités, diapédèse abondante des polynucléaires qui iufiltrent en grand nombre l’æœdème sous-épithélial ; beaucoup ont pénétré dans la cavité intestinale au niveau du sommet de la villosité. Parmi ces derniers, quelques-uns contiennent des vibrions, mais c’est l'exception. La plupart présentent des signes de dégénérescence.
Dans la portion profonde de la muqueuse, l’infiltration est peu abondante. Dans le mésentère, il y a une diapédèse considérable au niveau des veines et accumulation de polynucléaires le long de l’endothélium, dans la cavité péritonéale.
Dans la cavité intestinale, on trouve les vibrions disposés par petits amas le long de l’épithélium ; on les voit dans l’æœdème sous-épithélial.
A ce niveau, quelques-uns sont englobés par les leucocytes. On en voit quelques-uns situés dans la cavité péritonéale, le long de l’endothélium.
Résumé. — Gamaleia, Hafkine, puis Brieger, Kitasato et Wassermann, enfin Klemperer, ont soutenu que les cobayes vaccinés résistaient à l'injection intra-stomacale de vibrions cholériques accompagnée d'injection de teinture d’opium dans le péritoine. R. Pfeiffer est d'un avis opposé. Ë
. Les expériences que nous venons de relater prouvent que la vacci-
nation ne protège pas l'animal contre le choléra expérimental de Koch. Sur 7 cobayes vaccinés, 4 ont succombé (exp. LXXXV, LXXXVI, LXXXVII, LXXX VII. Trois ont résisté.
Toutes les observations que nous avons eu l’occasion de faire jusqu'ici s'accordent, en effet, pour nous montrer que si un animal ne parvient pas dans un délai suffisamment court, à mettre les vibrions envahisseurs hors d'état de sécréter leurs produits toxiques, il meurt intoxiqué. Dans le cas qui nous occupe il est évident que nos cobayes sont morts d'intoxication et non d'infection : constamment, en effet. leur sang a été trouvé stérile. Chez un cobaye neuf, traité par la méthode de Koch, ily a immobilisation de l'intestin grêle et les vibrions y pullulent. Les toxines sécrétées diffusent dans l'organisme et commencent leur œuvre. D'autre part, l’épithélium dégénère, tombe; les vibrions envahissent la paroi, parviennent dans le péritoine, s'y multiplient et y créent un nouveau et rapide foyer d'intoxication qui accélère la mort.
Chez le cobaye vacciné, traité de la même façon, les premiers stades du phénomène sont les mêmes : paralysie de l'intestin grêle, nécrose partielle de l'épithélium, pénétration des vibrions dans la cavité péritonéale. Pendant un espace de temps qui varie de 10 à 13 heures les microbes cholériques sécrètent librement leurs produits toxiques. Mais bientôt les phagocytes de l'animal sortant de leur narcose, affluent dans le péritoine, dans les villosités intestinales, dans l’æœdème sous-épithélial. L’englobement des vibrions commence et se fait dès lors très rapidement. A partir de ce moment, il n’y aura plus, dans la paroi intestinale et dans le péritoine, sécrétion de nouvelles doses de toxines : aussi l’animal vacciné résistera-t-il constamment pendant un temps deux fois plus long que le témoin, chez lequel cette phagocytose n’a pas lieu (voir les expériences).
Il est presque superflu de faire remarquer que la destruction des vibrions dans le péritoine coïncide exactement avec l’arrivée des leucocytes et n’est pas due à l’action bactéricide des humeurs, puisque, pendant les premières heures, la pullulation des microbes est des plus actives.
Notons ici que la pullulation des microbes n’a lieu que dans l'intestin grêle et surtout dans le jéjunum Ils périssent au contraire sitôt arrivés dans le cæcum, ainsi que le prouvent les cultures sur plaques. Il est donc évident que le cæcum des cobayes vaccinés représente
un milieu essentiellement bactéricide pour les vibrions, ce qui n'est pas vrai de l'intestin grêle.
La température des cobayes vaccinés qui succombent au choléra expérimental baisse aussitôt après l'injection, hypothermie due à l’action de l'opium. En effet, le réveil de l'animal s'accompagne d’une élévation de la courbe thermique qui cependant reste toujours inférieure à la normale, ce deuxième fait étant l'expression de l’intoxication cholérique.
L'injection de vibrions cholériques et d’opium, s'accompagne, chez le vacciné, d’une légère augmentation des globules blancs du sang. Mais jamais cette leucocytose n’est très élevée.
Les lésions des cellules épithéliales sont exactement celles que nous avons déjà étudiées chez les cobayes neufs atteints de choléra expérimental. Il n'y a donc pas accoutumance de ces cellules à la toxine.
Quant aux cobayes vaccinés qui résistent au choléra expérimental, l'étude de leur courbe thermique prouve que l'intoxication se fait chez eux comme chez les autres. Il est probable que chez ces individus, la paralysie intestinale dure moins longtemps et que, d'autre part, la réaction phagocytaire a lieu plus rapidement.
g.— Résumé des notions acquises sur la réaction cellulaire chez les cobayes auxquels on injecte des vibrions dans l'estomac.
De cette étude sur l'intestin cholérique des cobayes, il ressort nettement deux choses : le choléra est une intoxication ; le mode de destruction du vibrion est autre dans la cavité intestinale que dans les tissus. En outre, de la précocité de cette destruction dépendent les chances de guérison.
En effet, l'introduction des vibrions dans l'intestin détermine toujours, jusqu'a un certain point, l’abaissement de la température rectale ; cela tient à la diffusion des toxines dans l'organisme. Si, dans certains cas, comme par exemple dans le choléra expérimental de Koch, on constate une infection du système sanguin, ce n’est là évidemment qu'un phénomène tardif et qui ne joue, dans le mécanisme de la mort, qu’un rôle tout à fait accessoire. En effet, nous voyons les cobayes vaccinés succomber au choléra expérimental avec un sang stérile. Les animaux qui, sans avoir été soumis à l'action préalable de l'opium, meurent après l'injection de vibrions dans l'es- ;
tomac, ne présentent pas ces mêmes vibrions dans leur sang. Enfin, lorsque les cobayes succombent à l'introduction dans l'estomac de doses répétées de bacilles virgules, leur sang est toujours stérile et la mort est due à l’action seule de la toxine.
Une autre expression de la diffusion de cette toxine est la leucocytose. Chez les cobayes normaux, nous voyons le chiffre des leucocytes atteindre rapidement 15,000, 25,000 par millim. cube de sang. Puis cette leucocytose aboutit à une diapédèse des globules blancs au niveau des points d’où diffuse la toxine, c'est-à-dire sous l'épithélium intestinal.
Chez les cobayes normaux, cette diapédèse atteint son maximum vers la dix-huitième heure. À ce moment, les leucocytes polynucléaires s'accumulent au-devant des solutions de continuité laissées par la chute de lépithélium. Les vibrions qui s'insinuent par cette porte d'entrée sont englobés et digérés.
Chezles cobayes vaccinés, dont le sang contient un nombre de leucocytes 2 ou 3 fois supérieur à celui des cobayes neufs, cette diapédèse a lieu beaucoup plus tôt. Dès la cinquième heure, les leucocytes sont accumulés sous l'épithélium des villosités. Mais ici, la destruction des vibrions dans l'intestin est tellement rapide que l'épithélium ne tombe pas et que la phagocytose intrapariétale n’a pas lieu de se produire.
Au contraire, dans le choléra expérimental de Koch, par suite de l'immobilisation de l'intestin grêle, la destruction des vibrions n'a pas lieu dans le cæcum. L’épithélium, affaibli par la teinture d'opium, tué par la toxine cholérique, dégénère ; les vibrions envahissent la paroi intestinale puis le péritoine où ils pullulent, constituant ainsi un nouveau foyer d'intoxication. Sous l'influence de la narcose, la diapédèse n'a pas lieu et les vibrions qui ont pénétré dans les tissus ne sont pas détruits.
Cette destruction se produit, il est vrai, chez les animaux vaccinés auxquels on donne le choléra expérimental, mais trop tard, alors que l'intoxication a déjà eu lieu.
Si l'injection de teinture d'opium est suivie d'une élévation du chiffre des leucocytes intravasculaires, il faut considérer ce phénomène comme dû à une cause indirecte sur laquelle nous viendrons
dans le chapitre suivant.
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Il n'y a pas d'action antitoxique des humeurs puisque les cobayes vaccinés succombent au choléra expérimental.
[n'y a pas non plus propriété bactéricide des humeurs puisque chez les cobayes vaccinés, atteints de choléra expérimental, les vibrions passent dans le péritoine et y pullulent jusqu’au moment de l'intervention des phagocytes.
Les phagocytes seuls sont chargés de la destruction des vibrions qui, ayant franchi la barrière épithéliale, pénètrent dans la paroi. Sans leur intervention, les cobayes normaux succomberaient sûrement au choléra, puisque toujours il y a pénétration sous l’épithélium de quelques bacilles virgules. Et si les cobayes vaccinés résistent au choléra expérimental plus longtemps que les témoins neufs, ou même y résistent complètement, c'est qu'une active phagocytose s'oppose à ce que la cavité péritonéale ou les mailles du tissu conjonctif ne deviennent de nouveaux centres d'intoxication.
Nous voyons se vérifier ici ce que nous avons déjà constaté plus haut : les phagocytes sont les seuls agents de la destruction des vibrions dans les tissus. L’empoisonnement de l'organisme par les toxines étant fonction de la pullulation des vibrions dans ces tissus, c'est de la précocité de la phagocytose que dépend la guérison.
Les phagocytes bourrés de vibrions tombent dans la cavité intestinale où ils dégénèrent; sinon ils sont englobés et détruits par les macrophages dont l'afflux constitue le second temps du processus inflammatoire dans la paroi intestinale.
Notons ici que les leucocytes polynucléaires sortent toujours des vaisseaux sanguins; que l'arrivée des macrophages se fait par les chylifères centraux.
Les phagocytes, par contre, ne contribuent aucunement à la destruction des vibrions dans la cavité intestinale. Chez les cobayes qui résistent à l'injection, les bacilles virgules sont très rapidement transportés dans le cæcum, ainsi que le prouvent les préparations sur lamelles et les cultures sur plaques. LA ils périssent. Au bout de 2o heures chez les cobayes normaux le nombre des survivants est infime ; chez les vaccinés, au bout de 15 heures le procédé de la gélatine-peptone ne permet plus d'en déceler. Chez les vaccinés narcotisés, tandis que la pullulation s'effectue dans le jéjunum, tous les vibrions qui parviennent dans le cæcum, y périssent.
Ce transport a lieu grâce aux contractions de l'intestin grêle qui, chez les vaccinés, sont d’une énergie extraordinaire.
Il est certain que le cæcum des cobayes représente un milieu bactéricide pour les vibrions, cette propriété bactéricide étant infiniment plus développée chez les vaccinés que chez les animaux neufs. Peutêtre cette action antiseptique est-elle due dans le cæcum au développement d'une flore microbienne au contact de laquelle périt l’organisme cholérigène. La destruction des vibrions se fait dans le cæcum. L'intoxication de l'organisme a lieu au niveau de l'intestin grêle.
La substance bactéricide existe également dans l'intestin grêle des vaccinés, puisque 3 heures après l'injection intrastomacale, le nombre des vibrions vivants dans le jéjunum et l'iléon est minime, fait qu'il est impossible d'expliquer par la simple expulsion des germes vers le cæcum. Mais cet élément bactéricide y est beaucoup moins abondamment représenté que dans le cæcum, puisqu'il est impuissant à détruire les vibrions pendant la période de paralysie narcotique.
Notons, pour terminer, que la paroi intestinale réagit chez les cobayes vaccinés par voie péritonéale de la même façon que chez les cobayes vaccinés par l'intestin.
Rappelons enfin que la vaccination par voie intestinale est facile à condition d'observer les règles données dans le paragraphe consacré à ce sujet. Les vibrions ne pénétrant pas dans la paroi, c’est là une véritable vaccination chimique.
