STE

neuf, l’afflux leucocytaire est presque nul et l'infection se généralise pour aboutir à la mort. Le processus local s'accompagne, chez les cobayes qui résistent, d'une leucocytose du sang; chez le témoin neuf, il y a, jusqu'à la fin, diminution du nombre des globules blancs intravasculaires.

Le sérum n’a aucune action chimique qui détruise les vibrions ou leur toxine; car ses propriétésthérapeutiques cessent lorsqu'on soumet les cobayes au refroidissement. Celui-ci, en effet, paralyse l’action des phagocytes, et ces derniers sont les seuls agents de la défense de l'organisme contre les vibrions après vaccination et dans la guérison.

Metchnik off, dansun mémoirepubliépeuaprès celuide Sanarelli dans les Annales de l'Institut Pasteur, sedemande si les cobayespeuvent être sûrement vaccinés contre l'introduction d'une dose mortelle de vibrions dans l'estomac. Puis il expose ses recherches relatives au pouvoir préventif du sang humain. Il constate que la moitié des individus normaux « possèdent dans leur sérum des substances qui protègent les cobayes contre une infection mortelle ». Il considère cette: propriété préventive du sang comme une action stimulant la résistance de l'organisme, rappelant à ce propos les travaux de Sanareïiliï. Des recherches portant sur des cholériques ayant résisté ou succombé à la maladie pendant l'épidémie de Paris de 1892, il résulte qu'il n'existe pas de rapport entre le pouvoir préventif du sang d’un individu et le mode de terminaison de la maladie. Ce pouvoir « existe dans 58 p. 100 des personnes qui ont subi l'attaque. Presque la moitié des malades cholériques et la moitié des individus morts de cette: affection présentent également la propriété préventive du sang. La guérison peut se faire sans que cette propriété s'établisse, »

L'immunité n’est donc pas fonction de ce pouvoir préventif du sang.

Metchnikoff, aw cours des expériences sur l'homme qu'il à consignées dans son deuxième mémoire sur la propriété pathogène des: vibrions cholériques, a constaté que les phagocytes jouent un rôle dans le choléra humain; il a pu s’en assurer en étudiant les selles: d’une personne atteinte de choléra expérimental et guérie.

Pawlowsky et Buchstab, la même année, défendirent, dans un: travail publié par la Deutsche med. Wochenschrift, la doctrine de læ propriété antitoxique du sang.

Signalons ici une hypothèse exposée par Metchinikoff dans les

2 opte

leçons sur le choléra, qu'il fit à l’Institut Pasteur au mois de novembre 1893. Se fondant sur ce fait que, dans les eaux de Versailles et de Lyon (localités indemnes de toute épidémie cholérique),ontrouve constamment et en nombre très considérable des vibrions présentant les caractères des vibrions cholériques et capables de conférer aux cobayes l’immunité cholérique, il se demande s'il ne se produit pas chez les habitants des régions susdites une vaccination lente et continue par voie intestinale grâce à l'introduction constante dans l'estomac de ces vibrions des eaux.

Isaeff, en 1894, fit à l'Institut de Koch une série de recherches relatives aux propriétés des humeurs et à la réaction cellulaire chez un organisme réfractaire au choléra. Voici les conclusions auxquelles il arrive :

Le pouvoir bactéricide du sang chez les malades qui ont résisté au choléra ne s'établit que très tardivement, alors que la maladie est terminée depuis longtemps. De plus, il ne dépasse que peu le pouvoir bactéricide du sang normal.

Les cobayes vaccinés, ne le sont que contre le virus vivant; ils sont aussi sensibles que les animaux neufs à la toxine cholérique.

L'injection intrapéritonéale de sérum de personnes non atteintes du choléra, préserva souvent complètement les cobayes contre l'injeetion de virus vivant; toujours elle leur conféra nn certain degré d’immunité. Ce même résultat fut obtenu avec une solution physiologique de chlorure de sodium, de bouillon, une solution de nucléine à 2 p. 100, de la tuberculine, etc.

Le sérum fourni par des cobayes bien vaccinés est souvent immunisant; cette propriété n'apparaît qu'un certain temps après la vaccination. Quant au sérum fourni par des personnes ayant résisté au choléra, il présente un remarquable pouvoir immunisant; ce pouvoir ne s'établit néanmoins que trois semaines après le début du choléra.

Après avoir établi que le sang des individus qui ont résisté au choléra n’est ni bactéricide, ni antitoxique, il étudie la réaction phagocytaire. Il établit que l'injection intrapéritonéale d'une solution de chlorure de sodium, de bouillon, etc., détermine localement un afflux considérable de leucocytes. C’est une solution de nucléine qui a déterminéfla leucocytose la plus énergique. Si le liquide injecté estune culture stérilisée de vibrionscholériques, cette leucocytose est d'autant

plus précoce que la dose est plus faible. Avec des doses élevées de toxines, la réaction leucocytaire n’a lieu que très tard, mais est d'autant. plus intense. Lorsque la quantité injectée est mortelle, la période de chimiotoxisme négatif dure jusqu'à la mort de l'animal. Le sérum immunisant détermine un afflux presqu'immédiat (10 minutes) des leucocytes.

Lorsqu'à un cobaye neuf on injecte une dose mortelle, très forte de vibrions de Koch, l’exsudat, au moment de la mort, contient des vibrions en quantité, pas de leucocytes.

Si l’on injecte une dose maximale non mortelle, pendant les six premières heures, les vibrions sont très nombreux et la Ieucocytose faible. À partir de la septième heure, le nombre des leucocytes augmente, la phagocytose est énergique, le nombre des vibrions diminue. [ls sont tous englobés au bout de vingt-quatre heures et détruits au bout de trente-sept heures.

Si le cobaye a reçu au préalable une injection de sérum humain normal, la phagocytose débute un quart d'heure après et au bout de sept heures il n'y a plus de vibrions libres. Si le cobaye est fortement immunisé, les vibrions sont tous englobés au bout de trois quarts d'heure.

La destruction des vibrions est donc d'autant plus rapide que le degré de l'immunité est plus grand, et cette destruction est fonction directe de l'état de la leucocytose et de la phagocytose dans l'exsudat. Les liquides tels que le bouillon, la nucléine, le sérum immunisant, etc.,injectés dans le péritoine, jouent le rôle d'excitants vis-à-vis de l’activité phagocytaire.

R. Pfeiffer, dans une étude publiée récemment sur l'étiologie du choléra, reconnaît l'exactitude des faits avancés par Isaeff; il insiste sur ce phénomène observé par cet auteur, à savoir qu'un cobaye vacciné est encore réfractaire au choléra, alors que son sang a perdu tout pouvoir immunisant. Il déclare cependant qu'ils ne faut pas confondre « cette résistance transitoire et fondée sur la phagocytose avec la véritable immunité cholérique » qui est permanente et stable.

Kolle, étudiant les phénomènes qui accompagnent l'injection de vibrions cholériques dans la carotide des cobayes neufs, vit que, très peu de temps après l'injection le sang du cœur ne contient plus que très peu de micro-organismes, tandis que l'animal meurt en présen-

HD

tant les symptômes d’une intoxication aiguë. Mais l'auteur ne s'explique pas sur la cause de cette abondante destruction des vibrions.

Enfin, tout récemment, Klemperer, dans une communication faite : à la Société de médecine interne de Berlin, a émis une opinion originale relativement à l'immunité locale que possèdent la plupart des animaux vis-à-vis du bacille virgule injecté dans l'intestin. Se fondant sur le fait énoncé par Kossel, à savoir que l'acide nucléinique détruit les vibrions du choléra plus rapidement que les autres acides, l’auteur pense que l’acide nucléinique contenu dans le noyau des cellules de l'épithélium intestinal est lé véritable agent de limmunité locale. I] démontre la présence de cet acide nucléaire en colorant l'épithélium intestinal au moyen de la solution triacide d'Ehrlich ; dans ce cas, le noyau cellulaire se colore en vert, le protoplasma en rouge. Or : « Lilienfeld et Posner ont démontré que le vert de méthyle possède des éléments basiques qui se combinent avec-les éléments acides du noyau pour produire une coloration verte... Il s'ensuit que par= tout où nous constaterons une coloration verte méthylique nous pourrons affirmer que nous avons affaire à un tissu à réaction acide. » Plus loin il ajoute : « Comment l'acide renfermé dans le noyau de la cellule épithéliale peut-il. agir sur le bacille qui se trouve à l’état libre dans l'intestin ? [1 nous est encore impossible de répondre à cette question, mais nous avons poursuivi nos expériences à un autre point de vue. Lorsqu'on injecte cet acide nucléinique à des cobayes, ils deviennent légèrement malades, puis se rétablissent le lendemain ; six à huit jours après ils ne meurent pas, tandis que tous les animaux témoins succombent ; cet acide nucléinique intestinal ne fait donc pas seulement périr les bacilles du choléra, ïi affaiblit encore l’action toxique du virus cholérique, puisqu'ils rend l'animal réfractaire contre ce dernier. »

De tout cet ensemble de recherches, il résulte clairement que ni la propriété bactéricide des humeurs, ni le pouvoir antitoxique du sérum ne sauraient rendre compte du phénomène de l'immunité cholérique. En effet, les cultures faites, in vitro, dans du sang de cobaye vacciné, finissent presque toujours par se développer ainsi que l'ont constaté Sanarelli, Pfeiffer et Wassermann. Isaeff a démontré que le pouvoir bactéricide d'individus ayant résisté au choléra ne s'établit que longtemps après la guérison. Pfeiffer, Metchnikoff, Sana-

relli montrèrent que le virus peut rester à l'état vivant dans l'organisme vacciné plus longtemps que dans le sérum soustrait à ce même organisme. D'ailleurs Pfeiffer, ardent défenseur de la théorie bactéricide des humeurs, la considère maintenant comme tout à fait insuffisante.

D'autre part, il est bien établi aujourd'hui que les cobayes vaccinés contre le virus vivant ne le sont pas contre la toxine (Gamaleia, Pfeiffer et Wassermann, Isaeff); que les cultures faites dans le prétendu sérum antitoxique ont une toxicité très grande (Sanarelli) ; que le pouvoir immunisant du sang ne s'établit que tard chez les cholériques guéris; enfin que, chez le cobaye, les chances de guérison ne croissent pas avec les doses du sérum immunisant employées : tout cela démontre combien la théorie antitoxique est peu fondée.

Nous avons également pu nous convaincre, en analysant le mémoire de Sanarelli, que la propriété atténuante des humeurs est illusoire pour ce qui regarde le vibrion cholérique. Il résulte au contraire des recherches de Metchnikoff, Vincenzi, Sanarelli, Isaeff qu'il existe une corrélation étroite entre la destruction du vibrion et l’intensité du processus phagocytaire ; ue le froid, qui arrête les mouvements des leucocytes, favorise également, dans un organisme réfractaire, la pullulation des microbes.

Nous nous sommes donc proposé de reprendre dans le présent travail l'étude minutieuse et systématique des réactions cellulaires, générales et locales, qui accompagnent la pénétration du vibrion cholérique dans l'organisme. Et d'abord pour éliminer les facteurs multiples qui rendent si difficile cette étude dans l'intestin, pour étudier le phénomène sous sa forme la plus simple, nous avons examiné ce qui se passe lorsque l’on introduit le vibrion sous la peau où dans la cavité péritonéale d'un animal. Nous avons pu déterminer ainsi les circonstances qui favorisent ou retardent la destruction du microbe cholérigène. Nous nous sommes demandé ensuite ce que devient le

-vibrion introduit dans l'intestin ; si son mode de destruction est le

même dans la cavité intestinale et dans les tissus ; quelles sont les causes qui permettent où empêchent sa pénétration dans la paroi. Nous avons recherché également quel peut être, dans le choléra expérimental de Koch, le rôle de la teinture d'opium et pourquoi elle supprime l'immunité naturelle des cobayes contre le choléra intes-