‹ Recherches sur le "Phénomène de Zone ou Paradoxal" dans diverses réactions biologiques, en particulier la précipitation spécifiqueChapitre 10 sur 23 · LU LE · texte numérisé non relu

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relativement faible d’antigène et qu’on ajoute ensuite un excès de celui-ci, on constate très souvent au moins à la température ordinaire, que le précipité formé persiste. Mais il arrive aussi qu’il disparaît. Cette sofubilisation s’effectue — notamment quand il s’agit de mélanges de sérums antigènes aux immunsérums Correspondants — beaucoup plus aisément à la température de l’étuve (BonDET-GENGOU). Sans doute ne s’agitil pas, à vrai dire, en pareille circonstance, d’une simple redissolution du complexe qui s'était précipité: il est plus admissible que la composition de celui-ci se modifie; très probablement il perd une partie de l’anticorps entrant dans sa constitution, laquelle passe sur la nouvelle dose d’antigène ajoutée au mélange; en somme, l’anticorps manifeste alors une tendance plus ou moins prononcée, selon les cas, à se répartir également sur la totalité de l’antigène présent — et le phénomène est en tous points comparable à cleui qui s'effectue lorsqu'on ajoute à des globules rouges fortement sensibilisés de nouveaux globules de même espèce; comme nous l’avons rappelé plus haut, la sensibilisatrice qui s'était fixée se transmet en partie aux éléments introduits en dernier lieu. I! faut conclure que l’aptitude du complexe à se précipiter varie selon les doses relatives des deux constituants. Souvent c’est l’excès d’antigène qui entrave la précipitation, mais c’est parfois aussi celui de précipitine. »

Une théorie qui nous paraît devoir être soutenue à propos du phénomène de zone est celle du colloïde protecteur. On sait que si l’on mélange ensemble deux

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colloïdes on peut observer une diminution de la stabilité des colloïdes en présence, qui se traduit par une floculation — ceci surtout lorsque les deux colloïdes sont de signe inverse. Mais l'effet contraire peut être observé, l’addition d’un colloïde à un autre le protège contre la coagulation. Cette action protectrice se manifeste notamment, d’après J. DucLAUx (10), quand le premier colloïde est stable et le second instable au contraire. L’explication de ce phénomène du colloïde protecteur est d’ailleurs mal connue. Diverses interprétations ont été proposées : adsorption par le colloïde instable du colloïde stable protecteur qui lui impose ses propriétés et son signe électrique, — rôle mécanique du colloïde qui empêche la réunion des micelles du colloïde instable pour former des flocons de coagulum de grosseur visible.

Il est possible que dans le phénomène de zone, les protéines étrangères à la réaction, ajoutées en excès, avec l’excès d’antigène interviennent comme colloïdes protecteurs.

Pour HoLkER (15), la chimie-physique permettrait de comprendre de la façon suivante la réaction de zone manifestée par le sérum précipitant et l’antigène.

D’après les expériences de DEAN, l’addition d’une minime quantité d’antigène au sérum provoque la précipitation des particules d’euglobuline plus volumineuses et la quantité de précipité produite est faible. Pour une proportion plus considérable d’antigène, les particules plus petites sont précipitées et la masse du précipité augmente. Pour des quantités d’antigène encore plus élevées, le potentiel électrique à la sur-

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face de la totalité de l’euglobuline est annulé et le précipité atteint pour cette raison une quantité maxima.

Au delà de ce point, l’addition d’antigène a pour effet de porter le potentiel électrique de certaines particules du sérum au delà de zéro et de changer le signe de leur charge assurant ainsi leur stabilité. Dès lors, le précipité régresse et pour une dose d’antigène suffisante toutes les particules d’euglobuline sont stabilisées.

Les interprétations données du phénomène de zone sont donc nombreuses. Elles demeurent surtout des interprétations, les faits expérimentaux recueillis à ce sujet sont encore peu nombreux —- les plus intéressants pouvant bien être les expériences de DEAN, cidessus rapportées, relatées par HOLKER, puis par WELLS. Le déterminisme du phénomène apparaît évidemment complexe, ainsi qu’il est de règle en matière de réactions intercolloïdales, Nous avons cherché, à notre tour, d’élucider ce mécanisme. Nous nous sommes proposé d'étudier les variations des propriétés physiques du mélange précipitogène-précipitine en fonction du phénomène de zone.

C’est ainsi sue nous avons examiné successivement : viscosité, tension superficielle, PH,

Expériences personnelles

Les expériences pratiquées — et que nous allons relater ci-après — sont incomplètes en raison des

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multiples difficultés expérimentales du sujet et des quantités notables de sérum précipitant nécessaire pour les recherches. Il ne nous a pas été aisé de nous le procurer toujours en temps utile, Nous nous sommes proposé tout d’abord de vérifier l'existence du phénomène de zone et des lois classiques de FLEIs- CHMANN et MicHaELis. Le dispositif expérimental était le suivant :

Dans une série de tubes à essais, on place des quantités croissantes de sérum précipitant (sérum de lapin anti-humain), 3, 6, 9 gouttes. jusqu'à atteindre le nombre limite de 30 gouttes qui représente la dose maxima et constante pour un certain nombre de tubes. On ajoute ensuite des doses de sérum précipitable (sérum humain) de façon à répéter, mais en sens inverse, l’opération qui pient d’être effectuée. Il convient d’agiter soigneusement chaque tube après chaque mélange pour mêler aussi intimement que possible précipitine et précipitogène. Le tout est porté à l’étuve à 37° et lecture est faite après une heure.

On a ainsi le tableau suivant :

Précipitine Précipitogène Précipité h 30 — 6 30 — 9 . 30 12 30 RE 15 30 Æ 18 30 + 21 30 + 24 30 + + 27 30 EDR 30 30 + + 30 27 + + 30 24 + + 30 21 ++ +

Pen res

Précipitine Précipitogène Précipité 30 18 +++ 30 16 +++ 30 12 + + + 30 9 + + 30 6 + 30 3 He

L'examen de ce tableau permet la vérification des deux premières lois de MICHAELIS et FLEISCHMANN. En effet :

I. — Pour une quantité donnée de précipitogène (30 gouttes), la masse de précipité obtenue est proportionnelle à la quantité de précipitine (3, 6, 9... 30 gouttes).

II. — Si on ajoute à une quantité donnée de précipitine (30 gouttes) des quantités progressives de précipitogène, la masse de précipité obtenue croît d’abord proportionnellement, puis décroît et tend vers zéro pour un certain excès de précipitogène. :

Pour la troisième loi de ces mêmes auteurs, nous avons réalisé le dispositif suivant : des quantités constantes de précipitine et de précipitogène étaient placées dans des tubes à essais, dans les conditions optimales pour obtenir un précipité abondant — soit 20 gouttes de précipitine pour 10 de précipitgoène. Dans chaque tube était ajouté ensuite du sérum physiologique par doses régulièrement croissantes pour réaliser une dilution progressive 5, 10, 15... 45, 50 gouttes,

On obtient ainsi le tableau suivant :

Ne

Précipitine Précipitogène Sérum Phys. Précipité

20 10 10 & cine 20 10 15 +++ 20 10 20 ++ 20 10 25 + + 20 10 30 + + 20 10 35 + + 20 10 40 +

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