Inflaeiicede laelinleur. — La chaleur est l'agent
le plus efficace de la transformation des pigments biliaires, ou, pour préciser, du pigment fondamental dans les deux autres.
Il faut distinguer le cas où l'action de la température est peu prolongée, et le cas où cette action est longtemps prolongée.
l°Les températures de 40°à 100''favorisent extrêmement le passage du bilirubinate au biliprasinate (I'^ phase) : elles favorisent, mais moins bien, celui du biliprasinate au biliverdinate (2" phase, verdissement).
Si on soumet à la température de 50 degrés une solution de bilirubinate sodique neutralisée, on voit, au bout de 30 minutes, que la couleur est devenue rouge brun ; on constate qu'il s'est formé un biliprasinate.
Une solution de bilirubinate faiblement alcaline, étant chaufTée à lo° pendant 20 minutes, la couleur reste la même en se fonçant un peu : le stade biliprasinique persiste quelque temps. Ainsi, l'action de la température en liqueur légèrement alcaline est éminemment favorable à la démonstration du stade biliprasinique.
Pour la transformation poussée à son terme (verdissement) il faut prolonger un peu plus longtemps l'action ou
36 TRANSFOKMATION DES PIGMENTS
élever un peu plus la température. Des tubes très faiblement alcalins ou neutralisés, chauffés pendant 10 minutes à 100", à l'obscurité, sortent du thermostat tout à fait verts. De même des tubes chauffes à 75° pendant plus d'une heure. Les tubes témoins se conservent sans changement. La comparaison du tube chauffé, devenu vert avec le tube non chauffé resté jaune, donne une démonstration saisissante de l'intluence de la température.
2° Si l'action de la chaleur est quelque peu prolongée, et surtout si l'on opère sur une solution de bilirubinate très faiblement alcaline ou neutre, il se produit un phénomène remarquable, un dépôt. H y a un précipité floconneux jaunâtre qui tombe au fond du tube et qui prend bientôt un caractère d'extrême division.
Le bilirubinate a donc subi une altération qui se traduit par une diminution de solubilité. On comprend que ce dépôt sera d'autant plus marqué si l'on opère sur une liqueur qui, déjà, dissout difficilement le pigment, c'està-dire sur une solution neutre. On peut arriver à l'insolubilité absolue : la liqueur se décolore complètement. Elle se recolore pour un temps si l'on agite le tube, parce que le précipité de bilirubinate très divisé reste longtemps et facilement en suspension.
Ajoutons que la chaleur prolongée amène aussi le dépôt des biliprasinates et leur décomposition en bilirubinates insolubles.
SI . moyens de passer des pigments bilirabïni<|ues aux biliprasiniqaes et invepsement. — En outre des 4facteursqui réalisent la formation du stade biliprasinique en partant du stade bilirubinique, on peut utiliser pour le même résultat les agents chimiques oxydants : l'iode
ACTIOiN DE LA LACCASE
alcoolique, l'eau chlorco, l'eau bromée. Si l'on verse avec précaution une petite quantité de ces solutions dans le bilirubinate, le liquide prend une teinte vert clair (biliprasine). Cette biliprasine traitée par l'alcali, passe à la couleur rouge brun (biliprasinale, sel alcalin) ; par l'acide acétique elle retourne au vert.
Un autre procédé consistera à utiliser la cbaleur aidée du courant d'anhydride carbonique. Par le courant de (jO^ le bilirubinate neutre qui a subi l'influence niodérée de la chaleur (50°) devient vert clair : c'est la biliprasine ; l'alcali la ramène au rouge brun (biliprasinale).
Arrivé au stade biliprasinique on peut retourner au stade bilirubinique. On a trois moyens :
l°Le vide; la biliprasine devient jaune (bilirubine) ;
2° Le courant d'hydrogène sulfuré ; la biliprasine est transformée en bilirubine :
3o Le sulfure d'ammonium ; même action.
Les mêmes agents ou des agents analogues permettent d'aller plus loin, et par conséquent de passer en série ascendante des pigments bilirubiniques aux pigments biliverdiniques.
a) Action des agents oxydants. Moyens d'obtenir les pigments biliaires en série asceiidante.
On peut observer successivement les 3 stades des pigments biliaires : joi^/«en/ originel, jaune, bilirubinique; pigments intermédiai?'es, jaune brun, biliprasinale, vert clair, biliprasine; eX enRn pigment de/iniiif, \erl foncé, biliverdinique. 11 suffit de faire agir, d'une manière ménagée, la laccase, l'eau oxygénée, l'iode alcoolique.
