BILE VERTE DE VEAU
h) Au moyen de la pompe à mercure, nous faisons le vide (2 à 4 h.) dans un tube contenant quelques centimètres cubes de bile verte fraîche. On ferme le tube à la lampe. Après quelques heures, la couleur a passé au jaune, ce qui n'arrive pas avec la bilivei'dine (biliverdinate).
Cette épreuve mérite de nous arrêter quelques moments. Nous disons que le pigment vert soumis au vide se change lentement en pigment jaune et nous en faisons un caractère différentiel d'avec la biliverdine. Bien entendu, il faut exclure toute intervention microbienne, caries microorganismes changent à l'abri de l'air la biliverdine en un pigment jaune (urobilinoïde pour Hugounenq et Doyon, bilirubinique pour d'autres). Mais ici l'action se produit assez rapidement ; elle aboutit à un pigment jaune qui a toutes les propriétés de la bilirubine, y compris la réaction de Gmelin. Néanmoins, pour écarter les objections, nous avons essayé d'éliminer toute action microbienne en chauffant le tube soumis au vide, à 75° à plusieurs reprises et même en le maintenant à 75°. Nous nous sommes assuré avec des tubes témoins, que ces traitements supprimaient en effet, le plus souvent, les altérations microbiennes que nous voulions éviter. Le jaunissement avait encore lieu.
Expérience. — Bile verte de veau (donnant la réaction alcalinoacide) chauffée à 75" pendant 30 minutes, est divisée en 2 tubes : • 1°'' Tube. -^ Le tube est fermé à cette température de 75° ; il n'y a pas de microbes.
S'' Tube. — Bile verte chauffée à 75° soumise au vide prolongé pendant 14 heures. Après 20 heures la bile est brune ; après 44 heures elle est rouge clair.
Après 72 heures changement de couleur et passage au brun marron. Pas de réaction alcalino-acide ; réaction de Gmelin.
VARIÉTÉS nr: COI!LKUIt DE T,A nir.K IN VITRO 47
Après 3 joiii-s le 1'' tube resté vert est examiné. Il donne la réaction ;>lcalino-.icide. H contient donc de la biliprasine. Son contenu est alors divisé en 2 parties :
a) Une partie est chauiïée à 73° pendant 30 minutes, et fermée à cette température. On constate qu'elle ne varie pas : elle est restée verte après 2 jours.
//) Une partie est chauffée à 73" pendant 30 minutes, et soumise au vide pendant 14- heures :
Après 14 heures elle est brun foncé ; après 38 heures elle devient jaune rouge; après 20 jours la bile reste encore jaune rouge clair.
Il n'y a pas de réaction alcalino-acide; réaction de Gmelin.
C'est dire que, par le vide, il y a eu dissociation du pigment vert, sans altération microbienne: il s'est formé du bilirubinate.
Nous concluons donc :
1° Le pigment Jaune de la bile normale de veau n'est pas le bilirubinique ; l'action de l'acide acétique le fait pas^ ser auvert, l'acide carbonique le fait passer au vert ; il n'est pas stable à l'abri de l'air sous l'influence de la lumière, tous caractères, qui n'appartiennent pas à la bilirubine et qui démontrent l'existence du pigment rouge-brun ou bilipr usinât e.
T Le pigment vert de la bile normale de veau n'est pas le biliverdinique, parce que l'action de l'alcali le change en pigment jaune, parce que l'action du vide le change en un autre pigment jaune [bilirubine] inattaquable par l'acide acétique, caractères qui n appartiennent pas à la biliverdine ; c'est de la biliprasine ou pigment vert clair.
31. Explication des variétés de coulenp de la bile, in vitro. — Les pigments biliprasiniques de la bile dérivent du pigment originel fondamental (bilirubine) par oxydation. Le bilirubinate alcalin jaune-rouge se change en biliprasinate jaune-brun par fixation d'oxygène et
48 INFLUENCE DE l'aIR ET DE LA. LUMIÈRE
d'eau. C'est là le point capital. Ce pigment une fois formé est mêlé dans la bile aux bilirubinates inaltérés. La bile est encore jaune. Elle devient verte dans un second stade, correspondant à la formation de la biliprasine, par suite de l'action sur le biliprasinate de l'acide carbonique. Celui-ci est très abondant dans la bile (au total, 561 de CO^ pour 1000 de bile). Enfin, l'action de l'oxygène de l'air, aidée de la chaleur ou de la lumière, change le biliprasinate en biliverdinate (pigment vert définitif).
a) Action de divers agents. — Transformations subies par la bile.
On peut maintenant se rendre compte des modifications que peut subir la bile de veau sous l'influence des divers agents dont on connaît déjà l'action sur les pigments biliaires isolés chimiquement. On pourra combiner l'action de deux ou plusieurs de ces agents et on pourra expliquer les divers changements qui se présentent à l'observateur, changements dont la raison d'être lui échappait nécessairement jusqu'ici.
Nous examinerons l'action de la lumière, l'action de la chaleur , les transformations ascendantes et descendantes des trois sortes de pigments dans la bile naturelle. C'est une étude parallèle à celle qui a été faite précédemment avec les pigments isolés chimiquement.
32. Influence de laîr et de la lumière. — On prend la bile jaune de veau.
Expérience. — On prépare 6 tubes, 2 tubes entièrement pleins; 2 pleins seulement à moitié, c'est-à-dire contenant moitié air et moitié bile ; et enfin 2 tubes dans lesquels le vide a été fait. Quatre tubes :
iNFi.iKNcIi Uii i.A r.iv.\(.;ii(iN DM i.A liii.i';
1 [ili'iii, l'uuti'e à nioitic, et les 2 tubes à vide sont mis h lu luinièi'o ; les 2 autres à l'obscurité.
On constiite que le tube exposé ù la luuiière et plein à moitié verdit avant celui qui est plein, lequel contient seulement l'air dissous dans la bile. Les 2 tubes à l'obscui'ité restent inaltérés; ils conservent longtemps la même couleur ; après quoi celui des deux qui contient une atmosphère d'air commence à verdir à la surface. Enfin la bile dans les tubes à vide ne verdit pas.
On voil par là le rôle essentiel de l'air (on mieux de l'oxygène) dans la Iransformation du pigment jaune en pigment vert. La lumière intervient comme (acteur adjuvant.
33. Influence «le la réaction de la bile. — En changeant la réaction de la bile, la transformation du pigment jaune en pigment vert est favorisée ou empêchée.
Expérience. — On laisse exposés à l'air, à la température ordinaire, les tubes suivants contenant de la bile naturelle jaune, c'est' à-dire légèrement alcaline, et la même bile neutralisée ou légèrement acidifiée.
après 15 heures 3 heures 6 heures
d'exposition au soleil.
verte . . commencement . décolorade décoloration tion complète
Bile jaune de veau 2 ce.
neutralisée.
Eau distillée . . . 3 »
Bile normale Eau distillée. .
Bile normale. .
Soude 15 0/0.
Bile normale. .
Soude 30 0/0.
2 » jaune verdâtre.
2 » couleur verte .
2 >) jaune .
3 » précipité
jaune
verte .
verte
verte.
décolora-' tion
. liquide décoloré dépôt vert
commencement de décoloration
