CH. GANTU, loc. cit

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Avec le lactose seulement, l'attaque n’est pas constante avec toutes les races et avee un même Proteus ».

« Les races isolées des viandes et, en général, des substances animales pourries, attaquent les sucres avec une violence qu’on ne retrouve pas dans les cultures de Proteus isolées des végétaux : cette différence est vraie des premières cultures; elle s’efface quand les Proteus ont 6t6 réensemencés plusieurs fois et s'éloignent pour ainsi dire des conditions naturelles. »

IL est assez difficile de se faire une idée de la valeur respective des conclusions de ces divers auteurs, car elles résultent de recherches faites dans des conditions par trop dissemblables. C’est ainsi que Gaillard et Herter ont étudié un très petit nombre de races, alors que Cantù à examiné cent quatre-vingt-un Proteus d'origines extrêmement variées. D'autre part, les auteurs que je viens de citer ne précisent guère, dans leurs mémoires, la composition des milieux qu'ils ont utilisés et ne donnent que fort peu de détails sur la technique qu'ils ont suivie.

Comme j'avais la chance de disposer d’un grand nombre de Proteus, j'ai tenu à étudier, à mon tour, l'action de ce microbe sur les hydrates de carbone, non seulement dans le but de préciser quelque peu la valeur d'un caractère important, mais aussi pour être en mesure de mieux comparer les échantillons isolés des diarrhées infantiles avec ceux qui provenaient d’autres origines.

Afin de pouvoir examiner toutes les races que je possédais j'ai dû m'en tenir, comme Cantü, à une méthode de recherches simple et d'application rapide ; je me suis efforcé toutefois d'éviter les causes d'erreurs dont il ne semble pas s'être inquiété. IT est regrettable que le nombre d'essais à entreprendre m'ait forcé d'utiliser des procédés purement qualitatifs ; mais fort heureusement l'infériorité des résultats que ceux-ci m'ont donnés est largement compensée, il me semble, par la grande diversité d’origine des Proteus que j'ai étudiés.

Comme milieu de culture j'ai utilisé la solution suivante : OT RE, DRE te 1000 Peptone pancréatique Defresne sèche, en paillettes 20

A l’aide de microbes dont je connaissais parfaitement les propriétés biochimiques je m'étais assuré au préalable que l’échantillon de peptone qui devait me servir pour toutes mes expériences ne renfermait pas de substances hydrocarbonées pouvant don-

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ner lieu à la production d'acides. Pour neutraliser l’eau peptonée je l'additionnais d'un excès de carbonate de calcium pur précipité et je la portais à l’ébullition pendant quelques minutes; je laissais le carbonate se déposer et je décantais sur un filtre. Le liquide filtré, neutre au tournesol ef à peine coloré était alors réparti dans des tubes à essais, dans lequels on en versait uniformément 10 centimètres cubes, puis stérilisé vingt minutes à 120°.

D'autre part je préparais des solutions concentrées des diverses substances parfaitement pures, sur lesquelles je voulais faire agir le Proteus, solutions qui étaient stérilisées soit à 120°, soit à froid (lévulose) par filtration sur bougie Chamberland. Pour chaque expérience, j'ajoutais aseptiquement dans une série de tubes d'eau peptonée un volume de solution sucrée calculé de telle façon que le milieu de culture contint environ 3 0/0 de l'hydrate de carbone considéré : je plaçais alors tous ces tubes à l’étuve à 310. Vingt-quatre heures après je m'assurais qu'aucun d'eux n'avait cultivé et je pratiquais l’'ensemencement avec une race de Proteus provenant d’une culture de 24 heures sur gélose ordinaire. Les milieux sucrés ainsi ensemencés étaient mis à 37° en même temps qu'un nombre égal de tubes d’eau peptonée ensemencés avec les mêmes Proteus.

Après un temps convenable de séjour à l’étuve, je versais dans tous les tubes le même volume d’une teinture de tournesol sensible et je notais la réaction présentée par les diverses cultures en eau peptonée et en milieu sucré.

Mes essais ont porté sur le glucose, Le galactose, le lévulose, le maltose, le saccharose, le lactose et la mannite ; mais comme le Proteus est avant tout un fort producteur d'ammoniaque, je ne me suis pas contenté d'un seul essai et j'ai examiné suecessivement des cultures de deux, cinq, dix et quinze jours. Voici les résultats que j'ai obtenus :

Avec le glucose et le galactose toutes les cultures de cinq, dix et quinze Jours étaient acides, tandis qu'elles étaient toutes alcalines avec le lactose et la mannite. Je dois dire cependant qu'un certain nombre de cultures de deux jours sur glucose ou galactose étaient neutres, mais le cinquième jour elles étaient toutes devenues acides. Avec le saccharose, au bout de deux jours certaines cultures accusaient une réaction acide, tandis que d’autres étaient neutres où faiblement alcalines ; les cultures de cinq jours étaient presque toutes acides, mais quelques-unes étaient neutres; enfin les

cultures de dix et quinze jours étaient toutes nettement acides.

Les cultures sur lévulose et maltose se comportaient, au début, à peu près comme celles sur saccharose ; les unes étaient acides, les autres neutres ou alcalines : mais le nombre de ces dernières ne diminuait pas, même au bout de dix ou quinze jours.

De l’ensemble de ces constatations il faut donc retenir que toutes les races de Proteus, quelle que soit leur origine (1), acidifient au bout de dir jours à 37°, les milieux renfermant du glucose, du galactose ou du saccharose comme unique aliment hydrocarboné, mais laissent neutres ou alcalins ceux qui contiennent du lactose ou de la mannite.

D'autre part il est important de remarquer que la grande variabilité des pouvoirs alcaligène et acidogène impose de ne tenir compte que des changements de réaction constatés sur des cultures assez âgées. Pour certains Proteus, en effet, la production d’ammoniaque est extrêmement précoce et inteuse, alors que la formation d'acides aux dépens des hydrates de carbone est assez lente ; on comprend facilement que dans ces conditions une observation trop hâtive donnerait un résultat inexact.

Ainsi qu'on peut s'en rendre compte par les faits rapportés plus haut, il suffit, pour éliminer cette cause d'erreur, de n'examiner les cultures qu'au bout de dix jours.

Pour ce qui concerne le lévulose et le maltose, si l’on avait affaire à une autre espèce qu'au Proteus, on pourrait conclure à l'existence de deux sortes de races caractérisées par leur différence d'action sur ces deux sucres. Mais avec un microbe comme celui qui nous occupe il serait singulièrement imprudent d'adopter de telles conclusions ; l'exemple du saccharose est là pour montrer que, dans des essais de cette sorte, basés simplement sur l’observation de la réaction finale, il ne faut pas oublier que celle-ci résulte du balancement des deux actions principales qui se manifestent simultanément dans les cultures : 1° attaque de l'aliment azoté avec formation d'ammoniaque, 2 attaque éventuelle de laliment hydrocarboné avec formation d'acides.

Tous les Proteus donnent peut-être des acides aux dépens du

4. À ce propos je dois faire observer que, pour éviter autant que possible l'influence de toute varialion individuelle, je n'ai utilisé pour mes essais que des Proteus isolés depuis au moins deux mois et ayant subi de nombreux passages sur les milieux usuels,

lévulose ou du maltose et il est possible que la diversité des résultats que j'ai obtenus à cet égard tienne simplement à des différences d'intensité du pouvoir alcaligène et de l'action saccharolytique des diverses races.

On pourra facilement m'objecter que je n'aurais pas dû laisser persister un tel doute sur un point aussi important. À cela Je répondrai qu'il m'était pratiquement impossible d'examiner l'action de 61 Proteus sur sept substances avec des méthodes comportant des déterminations quantitatives ; d’ailleurs je me suis déjà expliqué sur ce point.

Les résultats que m'ont donnés mes essais avec le glucose, le galactose, le saccharose, le lactose et la mannite sont asséz constants, il me semble, pour aider à l'identification du Proteus vulgaris, d'autant mieux qu'ils confirment pour le glucose, le saccharose et le lactose les constatations des auteurs qui ont étudié quelques races avec des méthodes plus précises. Toutefois, ces résultats ayant été obtenus à l'aide d’un procédé purement qualificatif, je Les considère simplement comme des renseignements utiles et je leur refuse toute valeur intrinsèque permettant de les utiliser à la distinction éventuelle de plusieurs races dans l'espèce créée par Hauser. À ce point de vue, seuls des dosages pourront fournir les données nécessaires.

Aussi bien, n'est-ce pas avec la simple étude analytique de l'action du Proteus sur quelques hydrates de carbone que Fon pourra trancher une telle question ; les recherches entreprises dans ce but ne devront pas seulement porter sur de nombreuses substances hydrocarbonées, mais aussi sur des albuminoïdes et leurs dérivés, ainsi que sur beaucoup d’autres sources de carbone et d'azote organiques où minérales. Elles devront également ne pas se borner à la mesure de lintensité et de la vitesse d'action de Proteus d'origines multiples sur tous ces corps, mais aussi apprécier les variations de cette vitesse ou de cette intensité sous des influences diverses et déterminer la nature des produits formés; enfin elles devront coïncider avec une étude biologique complète des races considérées.

d'à. à LES