C. — Poison de Vaughan du « Proteus Tx

Il y a longtemps déjà que Vaughan (2) a montré que par l'hydrolyse alcaline en milieu alcoolique on peut extraire des corps microbiens une substance très toxique de nature albumosique qui parait être la même pour les nombreuses espèces microbiennes qu'il a étudiées. Cette substance soluble dans l'alcool et dans l’eau

1. J'ai déjà eu l’occasion d'observer que cé procédé se prête bien à l'extraction de diverses diastases endocellulaires de certains microbés : je continue d’ailleurs à étudier cette question.

2. VauGHan, « À study of Bacterial Cells », Trans. Ass. of Amer. Phys. 1902, pp. 242-331.

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est un poison du centre respiratoire qui agit sans incubation, elle ianifeste son action par les voies sous-cütanée, intra-péritonéale et intra-veineuse, mais elle est inoffensive par ingestion.

J'ai cherché à lextraire du Proteus Tr, en suivant la technique Sifbien précisée par S M. Wheeler (1) et qui est la suivante :

Les microbes rigoureusement secs sont délayés dans 15 à 25 fois leur poids d'alcool absolu contenant 2 pour 100 de NaOH ; le mélange placé dans un ballon muni d’un réfrigérant ascendant est mis au bain-marie. L'alcool est porté à l'ébullition et maintenu dans cét état pendant une heure. Au bout de ce temps la solution alcoolique est séparée et le résidu traité à nouveau par l'alcool sodique ; après séparation de cette deuxième liqueur alcoolique on fait encore une extraction dans les mêmes conditions. On réunit les solutions alcooliques des trois opérations et l’on filtre rapidement sur papier.

Le filtrat contenant le poison dissous est neutralisé avec une quantité calculée d'acide chlorhydrique concentré ; on filtre pour séparer lé chlorure de sodium formé et on distille dans le vide à 40° la liqueur claire obtenue.

Le résidu de la distillation parfaitement desséché dans le vide, sur l'acide sulfurique, est repris par l'alcool absolu bouillant pour débarrasser le poison de Vaughan de ce qu'il contient encore de chlorure de sodium. On filtre et l’on concentre dans le vide à 400 cétté solution purifiée ; on verse le résidu de cette distillation dans un récipient largement ouvert et on achève la dessication dans le vide sur l’acide sulfurique à la température du laboratoire.

Si l’on a employé de l’alcoo! bien absolu et des corps microbiens parfaitement exempts d’eau, le poison de Vaughan forme au fond du vase d'évaporation une croûte friable qui se détache facilement et que l’on peut aisément pulvériser. Bien entendu la poudre obtenue doit être conservée à l'abri de l'humidité.

En traitant de cette façon 10 grammes de corps microbiens, j'ai eu finalement 1 gr. 35 d’une poudre jaune entièrement soluble dans l'alcool absolu bouillant et dans l’eau. J'en ai fait une solution dans l’eau physiologique, à une concentration telle que 1 ce. correspondait à 20 millig'ammes; j'ai déterminé la toxicité de cette liqueur en injéctant des doses croissantes dans la jugulaire de très gros cobayes d'un poids moyen de 700 grammes. I m'a

4. Sveiz May Wugeer, « À study of the chemistry of bacterial cellular proteins », Journal of Biological Chemistry, t. VT, 1909, p. 508.

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fallu atteindre la dose de 45 milligrammes pour obtenir la mort immédiate des animaux — en 3 à 4 minutes — avec la dyspnée violente si caractéristique.

La toxicité du poison de Vaughan que j'ai extrait du Proteus Tx est donc relativement faible puisque la dose mortelle établie par M. Nicolle et G. Abt (1) pour le B. coli était seulement de 3 milligrammes.

D. — Lésions produites par les poisons du « Proteus »

Pour terminer cette étude sommaire des facteurs de toxicité du Proteus Tr, je vais exposer brièvement ce que j'ai eu l'occasion d'observer à l'autopsie des cobayes ayant succombé à l'injection des solutions ou émulsions les plus toxiques que j'ai utilisées dans mes diverses expériences. Je décrirai ensuite les lésions locales consécutives à l'injection sous-cutanée de doses incapables d’altérer l'état général des animaux.

a) Lésions viscérales.

1° Corps microhiens traités par l'acétone. — Injection intra-péritonéale de 40 milligrammes de microbes secs (200 b. humides) ; cobaye de 475 grammes. — Mort en 17 heures; autopsie 4 heures après :

Congestion intense du péritoine ; exsudat péritonéal louche, très abondant et aseptique. Reins pâles ; surrénales très congestionnées; exsudat blanchâtre à la surface de la rate et à la face postérieure du foie. [Intestin grêle très hyperémié et distendu par un liquide jaunâtre et filant; fausses-membranes peu épaisses à la face postérieure de l'estomac. Poumons normaux, cœur distendu.

2 Corps microbiens traités par COSNa?. — Injection intra-péritonéale de 10 milligrammes microbes secs (50 b. humides) ; cobaye de 490 grammes. Mort en 7 heures, autopsie immédiate :

Intestin grêle et péritoine pâles ; exsudat péritonéal rosé, abondant et aseptique. Fausses-membranes épaisses à la face postérieure de l'estomac. Foie pâle et couvert d’un enduit crêmeux ;

4. M. Nicozze et Agr. « Les anticorps des albuminoïdes et des cellules », Ann. de lInst. Pasteur, {. XXII, 1908, p. 132.